ICS 79.020 B71 中 华 人 民 共 和 国 林 业 行 业 标 准 LY XX/T XXXXX—XXXX 竹木材料及其制品表面防霉变效果评价 环境试验箱法 Evaluating the resistance of bamboo/wood product surfaces to mold growth —— Environmental chamber t esting method （报批稿） ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 国家林业和草原局 发布 XX/T XXXXX —XXXX I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 -2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由全国竹藤标准化技术委员会（ SAC/TC263 ）提出并归口。 本文件起草单位：广东省林业科学研究院、国际竹藤中心、仁化县奥达胶合板有限公司、广东省质 量监督林产品检验站、国家林业和草原局林产品质量检验检测中心（广州）、 浙江农林大学。 本文件主要起草人：何雪香、马红霞、覃道春、孙芳利、 张燕君、陈利芳、谢桂军、刘杏娥、曹永 建、王剑菁、陆方、李兴伟、潘金闪。XX/T XXXXX —XXXX 1 竹木材料及其制 品表面防霉变效果评价 环境试验箱法 1 范围 本文件规定了环境试验箱法 测定竹木材料及其制品 表面防霉变 效果及评价方法 。 本文件适用于室内用竹木材料及其制品防霉变性能检验评价， 也可用于竹木材用防霉剂 的防霉效果评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注 日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版 本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 14019 —2009 木材防腐术语 GB/T 18261 —2013 防霉剂对木材霉菌及变色 菌防治效力的试验方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 GB/T 14019 —2009 界定的术语和定义适用于本文件。 4 仪器设备 4.1 霉菌培养实验室主要仪器设备 。 4.1.1 蒸汽高压灭菌锅，最高设计温度 138℃，最高设计压力 0.25 MPa 。 4.1.2 超净工作台，洁净等级不低于 100 级。 4.1.3 霉菌培养箱，温度范围 0℃～65℃, 相对湿度范围 60%～90%。 4.1.4 天平，精确到0.01 g。 4.1.5 培养皿，直径 90 mm。 4.1.6 直口三角瓶， 500 mL。 4.1.7 烧杯，500 mL。 4.1.8 酒精灯、镊子等。 XX/T XXXXX —XXXX 2 4.2 霉菌接种孢子悬浮液制备主要仪器设备 4.2.1 实验室用组织捣碎机， 1 L。 4.2.2手持式喷雾器， 500 mL。 4.2.3脱脂棉纱布，型号 （28×28）tex，（ 118×110）根。 4.3 环境试验箱 环境试验箱由 箱盖、箱体、试件架、 土壤托盘、 加热及气流微循环装置等组成，详见附 录A。 5 试验材料 5.1辅助材料与试剂 5.1.1 分散剂吐温80或Triton X-100 用于制备接种用霉 菌孢子悬浮液。 5.1.2 环氧树脂 用于密封防霉试件切口等未处理部分。 5.1.3 水 符合GB/T 6682 中三级水要求 。 5.2 试样要求及试件制备 5.2.1 试样要求 试样应无缺陷， 无霉变、 腐朽或虫蛀。 木材对照样选用马尾松 （ Pinus massoniana Lamb.） 边材等易霉变的松树类木材；竹材对照样选用 3年～5年生精刨毛竹条 （Phyllostachys edulis (Carriè re) J. Houzeau ）。 5.2.2 试件制备 木材试件尺寸为100 mm（顺纹）× 75 mm×12 mm，竹材试件尺寸为 100 mm（顺纹）× 75 mm×厚度，其它材料制品尺寸为 100 mm×75 mm×厚度。 每一试验条件至少 6个重复试 件。从防霉处理试样上锯制试件，应用环氧树脂对切口进行密封，晾干后进行测试。 6 试件防霉处理步骤 6.1试件称重，然后根据防霉剂使用要求对试件进行处理。 XX/T XXXXX —XXXX 3 6.2 试件处理完毕后， 用吸水纸吸去表面多余药剂，立即称重，根据 GB/T 18261 -2013 中 4.4.2计算试件吸药量。 6.3 处理试件 置于洁净、通风良好 处自然晾干。如使用的防霉剂有特殊要求，则应根据防 霉 剂使用要求进行干燥。 6.4对于新开发的防霉剂产品，至少设置 3个吸药量梯度。 6.5若同组处理测试试件吸药量相对于平均吸药量偏差超过 15%，则应剔除。 7 霉菌接种菌种准备 7.1 供试霉菌种类 7.1.1 变色菌： ——可可球二 孢 (Botryodiplodia theobromae Pat.)； ——串珠镰刀菌 (Fusarium monilifome Sheldon）； ——链格孢霉（Alternaria alternale (Fries）Keissl)，异名细交链格孢 (A.denuis Nees)。 7.1.2 霉菌： ——黑曲霉 （Aspergillus niger V. Tiegh ）； ——桔青霉（ Penicillium citrinum Thom）； ——绿色木霉（ Trichoderma viride Pers. ex Fr. ）； ——黄曲霉 （Aspergillus flavus LK.）； ——出芽短梗霉（ Aureobasidium pullulans (de Bary ）Arn.)； ——球毛壳菌（ Chaetemium globosums Kunze ex. Fr.）。 7.1.3 菌种规定 7.1.3.1 允许选择同属不同种的变色菌和霉菌菌株作为供试菌种。 7.1.3.2 测试时，应使用包括至少 1种变色菌和至少 3种霉菌的混合菌体接种； 如测试对 象为防霉剂的防霉效果，应采用以上 9个菌种的混合菌体接种。 其中，竹材及其制品必须包 括黄曲霉、链格孢霉和串珠镰刀菌；人造板必须包括黄曲霉。 除上述规定菌种外，也可采用 客户指定的特定霉菌菌种。 7.2 培养基制备 7.2.1 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基（ PDA）配制 XX/T XXXXX —XXXX 4 取去皮马铃薯 200.0 g, 切成小块，加水 1000 mL，煮沸30 min后滤去马铃薯块， 加入葡 萄糖20.0 g、蛋白胨 0.5 g、硫酸镁 0.3 g、磷酸氢二钾0.5 g、琼脂25.0 g，加热溶化，将 滤液用水 补足至1000 mL。 7.2.2 麦芽糖琼脂培养基配制 将1000 mL水在水浴锅中 加热至50℃～60℃，陆续加入麦芽提取粉 15.0 g、 琼脂粉25.0 g， 一边加入一边搅拌 。加热直至琼脂完全溶解。 7.2.3 培养基消毒 将培养基置于蒸汽灭菌锅中灭菌，压力 0.1 MPa，温度121℃，灭菌40 min。 7.2.4 培养基分装 灭菌后的培养基 倒入已灭菌的培养 皿中，制成培养基平板备用。 7.3 供试菌种培养 在无菌条件下，将供试菌种接种在 平板培养基上，然后置于霉菌培养箱中保持温度（ 28 ±1）℃、相对湿度 75%～85%，培养14 d～20 d备用。每种供试菌种不少于 6个培养皿。 7.4 霉菌孢子悬浮液的制备 在培养皿中加入 10 mL水，滴入2滴吐温80或Triton X-100，用玻璃棒或软毛笔将新 鲜霉菌孢子刮下，将孢子液倒入烧杯中；用 10 mL水冲洗培养皿中菌体表面，将冲洗液与孢 子液混合，倒入组织捣碎机捣碎 、搅拌，单层纱布过滤 ；用水定容至 1000 mL，制成孢子 悬 浮液。 孢子悬浮液需在接种当天制备，以保持菌种的新鲜。 8 环境试验箱暴露测试 8.1 环境条件及环境试验箱温度 环境试验箱测试温度（ 25±1）℃，相对湿度 95%以上；环境试验箱置 于（20±1）℃环 境中。环境温度 比环境试验箱测试温度低 5℃左右。 8.2 实验步骤 8.2.1 试验箱开启 箱体内加入水，浸没加热棒和水泵，高度约 80 mm；将装有土壤的托盘放入箱体，距 水 面25 mm以上；试件架上悬挂一个热电偶温度计，监测箱体内温度；运行加热棒和水泵，使 环境试验箱内温度达到测试要求温度。 XX/T XXXXX —XXXX 5 其中土壤为园林盆栽土壤， 含至少 25%的泥炭土 和10%的蛭石，pH 5.5～7.6。 土壤在120℃ 条件下烘至绝干，将 水用手持式喷雾器喷洒在土壤上，使其持水量保持为 100%。 8.2.2 环境试验箱中土壤接种 箱体内温度达到测试温度 24 h后对土壤进行接种。将新鲜霉菌孢子悬浮液用手持式喷雾 器均匀喷洒在土壤上，以不流水为宜。开启微循环 风扇。 8.2.3 试件表面接种及放置 土壤接种 2周后，将新鲜霉菌孢子悬浮液用喷雾器均匀喷洒在试件表面，以试件表面不 滴水为宜。试件接种完毕