代替 GA/T 204 －1999 GA/T × × × × －× × × × GA/T × × × × －× × × × ICS 13.310 A 92 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA 法庭科学 血液、尿液中苯、甲苯、乙苯 和二甲苯检验 顶空气相色谱法 Forensic science s—Examination method for benzene, toluene, ethylbenzene and dimethyl benzene in blood and urine—HSGC ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本标准按照 GB/T1.1 -2009给出的规则起草。 本标准代替 GA/T 204 -1999《血、尿中的苯、甲苯、乙苯、二甲苯的定性及定量分析方法》 ，与GA/T 204-1999相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： ——修改了标准名称（见封面 ，1999年版的封面）； ——修改了试剂和材料（见第 5章， 1995年版的第 5章）； ——增加了仪器及设备（见第 6章）； ——修改了定性分析和定量分析的有关内容（见第 7章， 1999年版的第 7章）； ——修改了定性结果评价和定量结果评价的 有关内容（见第 8章， 1999年版的第 8章）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会 （ SAC/TC 179/SC 1 ） 提出并归口。 本标准起草单位：司法鉴定科学研究 院、公安部物证鉴定中心。 本标准主要起草人：刘伟、沈敏、沈保华、卓先义、向平、于忠山、王芳琳、何毅。 GA/T × × × × —× × × × 1 法庭科学 血液、尿液中 苯、甲苯、乙苯和 二甲苯检验 顶空-气相色谱法 1 范围 本标准规定了 法庭科学血液、尿液 中苯、甲苯、乙苯和二甲苯的 顶空 -气相色谱 （HS-GC）定性定量 检验方法 。 本标准适用于 法庭科学 血液、尿液中 苯、甲苯、乙苯和二甲苯 的定性分析和定量分析 。其他可疑样 品中苯、甲苯、乙苯和二甲苯的 定性分析和定量分析可参照使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件 。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，采用顶空 -气相色谱法定性定量 ，以保留时间 作为定性判断依据； 以峰面积为依据，采用内标法或外标法 进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的 二级水。试剂包括： a) 叔丁醇，色谱纯 ； b) 标准溶液： 1） 1.0mg/mL 标准物质溶液：根据苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯标准物质 的纯度，移 取适量， 分别用甲醇配制 1.0mg/mL 苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、 对二甲苯标准物质溶液， 置于冰箱中冷藏保存。 有效期 6个月。 或采用市售溶液标准物质； 2） 0.1mg/mL 标准工作溶液：移取 1.0mg/mL 的苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二 甲苯标准物质溶液各 1.0mL分别于 10mL容量瓶中，用水定容至 10mL，混匀，密封，分 别配置成 浓度为 0.1mg/mL 苯、甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯标准工作溶 液，置于冰箱中冷藏保存。有效期 6个月。实验中所用其他浓度的标准工作溶液均由 1.0mg/mL 标准物质溶液用水稀释得到； 3） 5.0mg/mL 内标物质溶液： 根据内标 叔丁醇标准物质的纯度， 移 取适量，用水配制 5.0mg/mL 叔丁醇内标物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。有效期 6个月。或采用市售溶液标准物质 ； GA/T × × × × —× × × × 2 4） 0.04mg/mL内标工作溶液：移取 5.0mg/mL 内标物质溶液 适量用水稀释 配制成浓度为 0.04mg/mL的叔丁醇 内标工作溶液，置于冰箱中冷藏保存 。有效期 3月。实验中所用其他 浓度的内标工作溶液均由 1.0mg/mL 内标物质溶液用水稀释得到 。 注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液 。 5.2 材料 材料包括： a) 顶空瓶； b) 硅橡胶垫； c) 铝帽； d) 密封钳； e) 注射器（1mL）。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱仪：配有氢 火焰离子化检测器 （FID）； b) 顶空自动进样器 c) 分析天平：感量 0.1mg； d) 恒温水浴锅。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 7.1.1.1 检材样品制备 移取血液或尿液检材样品 200µ L及水（若采用内标法 ，则为叔丁醇内标工作溶液 ）500µ L置于 10mL 顶空瓶中，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，供仪器分析。 若采用顶空自动进样器，封盖后直接供仪器分析；若采用手动进样，封盖后将顶空瓶置于恒温电加 热器中 65℃下加热 10min，抽取液上气体 400µ L。 7.1.1.2 质控样品制备 移取0.2g/mL苯（或甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯） 标准溶液 100L及水（若采用 内标法，则为叔丁醇内标工作溶液 ）500µ L作为添加样品；另取水600L（内标法，则为 水100L及叔丁 醇内标工作液 500L）作为空白样品， 与检材样品平行操作， 供仪器分析 。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 仪器条件 7.1.2.1.1 顶空自动进样 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品实际情况进行调整： a) 加热箱温度： 65℃； b) 定量环温度： 105℃； GA/T × × × × —× × × × 3 c) 传输线温度： 110℃； d) 气相循环时间： 15min（色谱柱 1、色谱柱 2）， 25min（色谱柱 3）； e) 顶空瓶加热平衡时间： 10.0min； f) 顶空瓶加压时间 ：0.10min； g) 定量环充满时间 ：0.10min； h) 定量环平衡时间 ：0.05min； i) 进样时间： 1.00min。 7.1.2.1.2 顶空手动进样 将样品置于 65℃恒温水浴中加热 10min，用 1mL注射器吸取瓶内液面上气体 0.4mL，进样。 7.1.2.1.3 气相色谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品实际 情况进行调整： a) 色谱柱： 1） DB-ALC1柱（ 30m0.32mm1.8m）或等效色谱柱； 2） DB-ALC2柱（ 30m0.32mm1.2m）或等效色谱柱 ； 注：DB-ALC1、DB-ALC2柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表 示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 40℃保持 3min，以 10℃/min 速率升至 150℃，保持 1min； c) 进样口温度： 150℃； d) 检测器温度： 300℃； e) 氢气流量 ：40mL/min； f) 空气流量 ：400mL/min ； g) 载气：高纯氮； h) 柱流量：8.0mL/min 。 7.1.2.2 进样 分别吸取检材、空白和添加样品液上气体，按 7.1.2.1的分析条件进样分析。 7.2 定量分析 7.2.1 样品制备 准确移取血液或尿液检材样品 200µ L两份分别置于 10mL顶空瓶中，按 7.1.1.1进行操作。 用单点校正法定量时，配置单点浓度的苯（ 或甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯）标准 溶液，准确移取标准溶液 200µ L两份分别置于 10mL顶空瓶中， 加水（若采用内标法 ，则为叔丁醇内标 工作溶液 ）500µL（标准溶液中目标物含量应为检材样品中目标物含量的 (100± 50)%），作为单点 校正样 品，与检材样品平行操作，供仪器分析。 用标准曲线法定量时， 配制系列浓度的苯（ 或甲苯、乙苯、邻二甲苯、间二甲苯、对二甲苯）标准 溶液（参见附录 A中A.1），准确移取 标准溶液 200µ L各两份分别置于 10mL顶空瓶中 ，加水（若采用内标 法，则为叔丁醇内标工作溶液 ）500µ L（检材样品中目标物的含量应在 标准曲线的线性范围内），作为 系列浓度 标准曲线 样品，与检材样品平行操作，供仪器分析。 7.2.2 仪器检测 7.2.2.1 仪器条件 按7.1.2.1规定的条件分析。 GA/T × × × × —× × × × 4 7.2.2.2 进样 分别吸取检材、空白和 单点校正或标准曲线样品 液上气体，按 7.2.2.1的分析条件每个样品进样分析 1次。