HHP ICS 13.310 CCS A 92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA GA/T ×××× —×××× 法庭科学 生物检材中 α-硫丹等20种 有机氯类杀虫剂检验 气相色谱 -质谱法 Forensic science s—Examination methods for 20 organochloride insecticides including α-endosulfan in biological samples —GC-MS ×××× -××-××发布 ×××× -××-××实施 中华人民共和国公安部 发 布 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会 （ SAC/TC 179/SC 1 ）提出并归口。 本文件起草单位：南京市公安局刑事科学技术研究所 、 公安部物证鉴定中心、 青岛市公安局技术处、 泰安市公安局刑事科学技术研究所 。 本文件主要起草人： 王勇、章志成、李黎明、刘俊宁、张云峰、王磊、王伟、周欣、孙鑫、王爱华、 王瑞花、任昕昕、杨虹贤、郭杰、吕惊晗、李文海。 GA/T × × × × —× × × × 1 法庭科学 生物检材中 α-硫丹等20种有机氯类杀虫剂检验 气相色谱 -质谱法 1 范围 本文件规定了生物检材血液、尿液中 20种有机氯杀虫剂 的气相色谱 -质谱（ GC-MS）检验方法。 本文件适用于法庭科学领域 生物检材血液、尿液中 20种有机氯杀虫剂 的定性分析和定量分析。其他 检材可参照使用。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照， 按平行操作的要求， 对检材样品 中20种有机氯杀虫剂 （详见附录 A） 进行提取、净化及浓缩，采用气相色谱 -质谱法检测， 以保留时间 、质谱特征离子碎片峰和相对丰度或 峰面积作为定性判断依据， 用外标法或内标法 进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的 三级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试 剂包括： a) 无水硫酸 镁； b) 无水硫酸钠； c) 氯化钠； d) 浓硫酸； e) 甲醇； f) 乙酸乙酯； g) 乙腈； h) 环已烷； i) 正已烷； j) N-丙基乙二胺（ primary secondary amine, PSA）； k) 石墨碳黑（ graphitized carbon black , GCB）； GA/T × × × × —× × × × 2 l) 标准溶液： 1) 1.0mg/mL 单一标准物质储备溶液 ： 根据 20种有机氯杀虫剂标准物质的纯度和盐型换算后， 各称取适量 ，用甲醇分别配制 1.0mg/mL 20 种有机氯 标准物质溶液，混匀，密封， -18℃以 下保存， 有效期 6个月。或采用市售单一标准溶液 ； 2) 1.0mg/mL 混合标准物质储备溶液： 根据 20种有机氯杀虫剂 标准物质的纯度和盐型换算后， 各称取适量，用 甲醇配制成 1.0mg/mL 的混合标准物质储备溶液， 密封， -18℃以下保存，有 效期 6个月。或采用市售混合标准溶液； 3) 单一标准 物质工作溶液：移取 1.0mg/mL 的20种有机氯 标准物质 储备液各 1.0mL，用甲醇 分别配制成浓度为0.1mg/mL的单一标准物质工作 溶液，现用现配 ；实验中所用其 他浓度的 单一标准工作溶液均由 1.0mg/mL 单一标准物质 储备液用甲醇稀释得到 ； 4) 混合标准 物质工作溶液： 移取 1.0mg/mL 的20种有机氯混合 标准物质 储备液1.0mL，用甲 醇配制成浓度为 0.1mg/mL的混合标准物质工作 溶液，现用现配 ；实验中所用其 他浓度的混 合标准工作溶液均由 1.0mg/mL 混合标准物质 储备液用甲醇稀释得到 ； 5) 1.0mg/mL 内标储备溶液：以环氧七氯 作为内标，根据其纯度和盐型换算后，用甲醇配制 1.0mg/mL 内标溶液，混匀，密封， -18℃以下保存，有效期 6个月； 6) 0.1mg/mL内标工作溶液：移取 1.0mg/mL 的内标储备溶液 ，用甲醇配制成浓度为 0.1mg/mL 的内标工作溶液，现用现配。 实验中所用其他浓度的 内标工作 溶液均由 1.0mg/mL 内标储备 溶液配制 得到。 5.2 材料 材料包括： a) 具塞离心管； b) 具塞玻璃试管 。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱 -质谱仪（GC-MS）：配有电子轰击源（ EI）； b) 振荡器； c) 电子天平： 实际分度值 d≤0.01mg； d) 离心机； e) 移液器； f) 浓缩器。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品前处理 7.1.1.1 分散固相萃取 移取血液等液体检材样品 2.0mL于具塞离心管中。 加入乙腈 4.0mL， 振荡 5min，加入氯化钠 1.0g， 振荡 1min，离心 5min，分离上层有机相 ，重复提取一次，合并两次提取的 上层有机相 ，加入无水硫酸 镁100mg，PSA 100mg，GCB 10 mg，振荡 1min，不低于 6000r/min 离心 5min，取上层有机相置于尖底GA/T × × × × —× × × × 3 玻璃试管中 ，于浓缩器上 50℃浓缩至干， 残留物用 甲醇 0.1mL溶解，作为检材样品提取液，供仪器检 测。 注：检材样品取样量、乙腈体积及定容体积可根据实际情况调整。 7.1.1.2 液液萃取 移取血液等液体检材样品 1.0mL于具塞离心管中。加入 乙腈 2.0mL，震荡 1min，加入乙酸乙酯 /环 已烷（体积比 3：1）混合溶剂 2.0mL，振荡 5min，不低于 6000r/min 离心 10min，分离有机相；重复提 取一次，合并两次提取的有机相，用无水硫酸钠脱水后，转入尖底玻璃试管中 ，置于浓缩器上 50℃浓 缩至干，残留物用甲醇 0.1mL溶解，作为检材样品提取液，供仪器检测。 注：检材样品取样量、混合溶剂体积及定容体积可根据实际情况调整。 7.1.1.3 质控样品 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用 血液替代）两份于具盖离心管中，一份作 为空白样品，一份添加 标准物质工作溶液， 使其浓度为 0.5µg/mL，作为添加样品 ，与检材样品平行操 作，得到空白样品提取液和添加样品提取液 ，供仪器检测。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 气相色谱 -质谱仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整 ： a) 色谱柱： DB-5MS毛细色谱柱 (30m× 0.25mm× 0.25µ m) 或其他等 效柱； 注： DB-5MS毛细色谱柱是 Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示 对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 180℃保持 1min，以 15℃/min速率升温至 225℃，保持 1min，再以 10℃/min速 率升温至 280℃，保持 10min； c) 进样口温度： 280℃； d) 传输线温度： 260℃； e) 载气：氦气； f) 电子轰击能量： 70eV； g) 离子源温度： 230℃； h) 扫描方式：全扫描（ SCAN）； i) 溶剂延迟： 3min； j) 柱流量： 1.0mL/min ； k) 进样方式：分流进样 ； l) 分流比： 10:1； m) 质量范围： 40amu～450amu； n) 定性定量离子 ：参见附录 A。 7.1.2.2 进样 分别吸取 空白溶剂、添加样品 提取液、空白样品 提取液、检材样品 提取液、标准物质工作溶液， 按 7.1.2.1仪器条件 进样检测。进样顺序和进样次数应确保结果有效。 7.2 定量分析 7.2.1 样品前处理 GA/T × × × × —× × × × 4 移取血液等液体检材样品 2.0mL （液液萃取 1.0mL）2份（采用内标法 时，则加入内标，使其浓度为 1.0µg/mL，混匀），按 7.1.1进行操作