ICS 13.310 CCS A 92 GA 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T ××××—×××× 法庭科学 疑似毒品中苄基哌嗪、 1-(3-氯苯 基)哌嗪、1-(3-三氟甲基苯基 )哌嗪检验 液 相色谱和液相色谱 -质谱法 Forensic sciences —Examination methods for BZP, mCPP and TFMPP in suspected drugs —LC and LC-MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发 布 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文 件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别 专利的责任。 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC 179/SC 1 ）提出并归口。 本文件起草单位： 公安部物证鉴定中心、福建省公安厅刑事技术总队、浙江省公安厅、广西省公安 厅、公安部禁毒情报技术中心 、贵州省毕节市公安局。 本文件主要起草人： 赵阳、常颖、翟晚枫、郑珲、张春水、李航麒、傅得锋、黄克建、刘培培、钱 振华、李彭、赵彦彪、杨虹贤、郑晓雨、闻武、刘克林、叶树海、孙剑聪、刘晓锋、吴开封、刘季铭、 杜松、温彪、杨俊、张有志、龙路爽、高利生 。GA/T × × × ×—× × × × 1 法庭科学 疑似毒品中苄基哌嗪、 1-(3-氯苯基)哌嗪、1-(3-三氟甲基 苯基)哌嗪检验 液相色谱和液相色谱 -质谱法 1 范围 本文件规定了法庭科学领域疑似毒品 样品中苄基哌嗪 （BZP）、 1-（3-氯苯基）哌嗪 （mCPP）、 1-（3-三氟甲基苯基） 哌嗪（TFMPP）的液相色谱 -质谱（ LC-MS）定性检验方法和液相色谱（ LC）定 量检验方法。 本文件适用于法庭科学领域疑似毒品 样品中 BZP、mCPP、TFMPP的定性分析和定量分析。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 27418 测量不确定度评定和 表示 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件 。 4 原理 对疑似毒品样品中的 BZP、mCPP、TFMPP（化合物信息参见附录 A）进行提取。采用液相色谱 - 质谱检测，以保留时间、质谱特征离子对和离子 对丰度比作为定性判断依据；采用液相色谱检测， 以色 谱峰面积作为定量依据， 用外标单点法或外标 标准曲线法进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682中规定的一级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯，试 剂包括： a） 乙腈； b） 甲醇； c） 乙酸铵； d） 甲酸； e） 甲酸铵； GA/T × × × ×—× × × × 2 f） 甲酸-乙酸铵缓冲液（ 以配制 1000mL为例）：称取乙酸铵 154mg，用 200mL水溶解，量取甲酸 1.0mL，滴入上述乙酸铵溶液中，转移至 1000mL容量瓶中用水定容，用真空抽滤泵抽滤，超 声波清洗器超声，即可使用； g） 0.1%甲酸甲醇溶液 （以配制 1000mL为例）：量取甲酸 1.0mL，用200mL甲醇稀释， 转移至 1000mL 容量瓶中用甲醇定容，用真空抽滤泵抽滤，超声波清洗器超声，即可使用 ； h） 20mM甲酸铵水溶液（ 以配制 1000mL为例）：称取甲酸铵 1260mg，用 200mL水溶解，转移至 1000mL容量瓶中用水定容，用真空抽滤泵抽滤，超声波清洗器超声，即可使用 ； i） 定性提取溶剂（ 以配制 1000mL为例）：量取 950mL甲酸-乙酸铵缓冲液 和50mL 0.1% 甲酸甲醇 溶液，混匀即可使用； j） 定量提取溶剂（ 以配制 1000mL为例）：量取 950mL 20mM甲酸铵水溶液和50mL乙腈，混匀即 可使用； k） 标准溶液： 1）标准物质 储备液：1.0mg/mL BZP、mCPP、TFMPP标准物质 储备液 ,0℃~4℃冷藏保存，有 效期 12个月； 2）标准工作溶液按实验需求分为以下 四类： ——定性用标准工作溶液： 移取 BZP、mCPP、TFMPP标准物质 储备液各适量，用定性提 取溶剂稀释，分别配制成 100ng/mL的BZP、mCPP、TFMPP标准工作溶液。 0℃~4℃冷 藏保存，有效期 1个月； ——定性质控标准工作溶液： 移取 BZP、mCPP、TFMPP标准物质 储备液各适量，用定性 提取溶剂 稀释，分别配制成 1ng/mL的BZP、mCPP、TFMPP标准工作溶液。 0℃~4℃冷 藏保存，有效期 1个月； ——外标单点法定量用标准工作溶液：移取 BZP、mCPP、TFMPP标准物质 储备液各适量， 用定量提取溶剂 稀释，配制成0.1mg/mL的BZP、mCPP、TFMPP标准工作溶液。 0℃~4℃ 冷藏保存 ，有效期 1个月； ——外标标准曲线法定量用标准工作溶液： 移取 BZP、mCPP、TFMPP标准物质 储备液各 适量，使用定量提取溶剂 稀释， 配制成浓度为 0.01mg/mL~0.5mg/mL范围的BZP、mCPP、 TFMPP标准工作溶液 ，至少配制 5个浓度。 5.2 材料 材料包括： a） 具盖离心管 ； b） 容量瓶； c） 有机系微孔滤膜： 0.22µm； d） 水系微孔滤膜： 0.22µm。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a） 液相色谱仪 （LC）：配有二极管阵列 （DAD）或紫外检测器 （UV）； b） 液相色谱 -质谱仪（LC-MS）：配电喷雾离子源 ，具备 MRM检测模式 ； c） 电子天平： 分度值 d≤0.01 mg； d） 离心机； GA/T × × × ×—× × × × 3 e） 振荡器； f） 真空抽滤泵； g） 超声波清洗器； h） 移液器或移液管 。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品制备 样品充分均质 化，根据实际需求，称取 10mg ~100mg于具盖离心管中 ，加入10mL甲醇，密封并振 荡5min，以不低于 4000 r/min离心 5min，取上清液， 用定性提取溶剂稀释 ，稀释液经 0.22µm的水系微 孔滤膜过滤，滤液作为样品溶液，供 LC-MS分析。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 液相色谱 -质谱仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a） 色谱柱： Zorbax Eclipse Plus RRHD C18 （1.8μm，2.1×100mm）或其他等效柱； 注： Zorbax Eclipse Plus RRHD C 18柱为 Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者， 并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相 同的效果，则可使用这些等效产品。 b） 柱温： 40º C； c） 流动相：A：甲酸 -乙酸铵缓冲液 ，B：0.1%甲酸甲醇溶液 ； d） 洗脱：梯度洗脱程序 见表 1； 表1 梯度洗脱程序 时间 min 流动相 A 流动相 B 0 95% 5% 0.5 95% 5% 5 75% 25% 12 40% 60% 13 20% 80% 14 10% 90% 14.5 0% 100% 16 0% 100% 16.1 95% 5% 20 95% 5% e） 流速： 0.4mL/min； f） 进样量： 1μL； g） 离子源：电喷雾离子源； h） 检测模式 ：正离子模式； GA/T × × × ×—× × × × 4 i） 毛细管电压： 4000 V； j） 干燥气： 10L/min； k） 干燥气温度： 350ºC； l） 雾化气： 25psi； m） BZP、mCPP、TFMPP的离子对和 Fragmentor 电压、碰撞能量 （CE）：见表 2。 表2 质谱参考条件 名称 母离子 m/z 子离子 m/z Fragmentor 电压 V 碰撞能量 eV BZP 177.1 91.0 100 15 85.0 30 mCPP 197.0 154.0 120 20 119.0 30 TFMPP 231.1 188.0 120 25 44.0 25 7.1.2.2 进样 分别吸取 样品空白（定性提取溶剂 ）、样品溶 液、标准溶液空白（ 定性提取溶剂 ）和定性用标准工 作溶液，按 7.1.2.1条件进样分析。 或根据实际需求，再 分别吸取标准溶液空白 （定性提取溶剂 ）和定性 质控标准工作溶液，按 7.1.2.1条件进行分析。 7.2 定量分析 7.2.1 外标单点法 7.2.