ICS 13.310 CCS A 92 GA 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T ××××—×××× 法庭科学 疑似毒品中α -PBP、α-PVP和 4-F-α-PVP检验 液相色谱和液相色谱 -质谱法 Forensic sciences —Examination methods for α-PBP, α-PVP and 4 -F-α -PVP in suspected drugs —LC and LC -MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发 布 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别 专利的责任。 本文件由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会 （ SAC/TC 179/SC 1 ）提出并归口。 本文件起草单位： 公安部物证鉴定中心、 黑龙江省公安厅刑事技术总队、 公安部禁毒 情报技术中心 。 本文件主要起草人： 钱振华、杨虹贤、赵彦彪、郑珲、张春水、张吉林、张大雷、乔宏伟、赵阳、 常颖、李彭、郑晓雨、闻武、翟晚枫、刘克林、高利生 。 GA/T × × × ×—× × × × 1 法庭科学 疑似毒品中 α-PBP、α-PVP和4-F-α-PVP检验 液相色谱和液相色谱 -质谱法 1 范围 本文件规定了法庭科学领域疑似毒品 样品中1-苯基 -2-(N-吡咯烷基 )-1-丁酮（α-PBP）、1-苯基 -2-(N- 吡咯烷基 )-1-戊酮（α-PVP）和1-(4-氟苯基 )-2-(N-吡咯烷基 )-1-戊酮（4-F-α-PVP）的液相色谱 -质谱 （ LC-MS） 定性检验方法和液相色谱（ LC）定量检验方法。 本文件适用于法庭科学领域疑似毒品 样品中α-PBP、α-PVP和4-F-α-PVP的定性分析和定量分析。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 27418 测量不确定度评定和 表示 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件 。 4 原理 对疑似毒品样品中的 α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP（化合物 基本信息参见附录 A）进行提取。采用液 相色谱 -质谱检测，以保留时间、质谱特征离子对和离子 对丰度比作为定性判断依据；采用液相色谱检 测，以色谱峰面积作为定量依据， 用外标单点法或外标标准曲线法进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的一级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯，试 剂包括： a） 乙腈； b） 甲醇； c） 浓磷酸； d） 三乙胺； e） 甲酸； f） 0.1%（v/v）甲酸水溶液： 以配制 1000mL为例，量取甲酸 1mL，加水定容至 1000mL的容量瓶 中，摇匀，用真空抽滤泵过滤，超声波清洗器超声， 即可使用 ； GA/T × × × ×—× × × × 2 g） 磷酸-三乙胺缓冲液： 以配制 1000mL为例，量取浓磷酸 4.12mL，加入 200mL水稀释；量取三乙 胺5.56mL， 滴入上述磷酸溶液中； 加水定容至 1000mL的容量瓶中， 摇匀 ，用真空抽滤泵过滤， 超声波清洗器超声，即可使用； h） 甲醇-磷酸-三乙胺缓冲液 混合溶液 ：以配制 500mL为例，量取 100mL甲醇和 400mL磷酸-三乙 胺缓冲液，配制成甲醇：磷酸 -三乙胺缓冲液 =1:4（v/v）的混合溶液 ，摇匀，即可使用 ； i） 标准溶液： 1）标准物质 储备液：1.0mg/mLα-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准物质 储备液，0℃~4℃冷藏保存， 有效期 12个月； 2）标准工作溶液按实验需求分为以下四类： ——定性用标准工作溶液： 移取α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准物质 储备液各适量，用0.1% 甲酸水溶液 稀释， 分别配制成 100ng/mL 的α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准工作溶液。 0℃ ~4℃冷藏保存， 有效期 7天； ——定性质控标准工作溶液： 移取α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准物质 储备液各适量，用 0.1%甲酸水溶液 稀释， 分别配制成 1ng/mL的α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准工作溶液。 随用随配 ； ——外标单点法定量用标准工作溶液：移取适量 α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准物质储备 液，用甲醇稀释，配制成0.1mg/mL的α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准工作溶液。 0℃~4℃ 冷藏保存 ，有效期 3个月； ——外标标准曲线法定量用标准工作溶液：使用 α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准物质 储备 液，按标准物质 储备液：磷酸-三乙胺缓冲液 =1:4（v/v）的比例进行稀释 ，配制成 0.5mg/mL 的α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准工作溶液；再使用甲醇 -磷酸-三乙胺缓冲 液 混合溶 液对 上述 0.5mg/mL 的标 准工作 溶液 进行稀 释， 配制成浓 度为 0.01mg/mL~0. 5mg/mL范围的α-PBP、α-PVP、4-F-α-PVP标准工作溶液 ，至少配制 5个 浓度。 5.2 材料 材料包括： a） 具盖离心管； b） 容量瓶； c） 有机系微孔滤膜： 0.22µ m或0.45µm； d） 水系微孔滤膜： 0.22µ m。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a） 液相色谱仪（ LC）：配有二极管阵列（ DAD）或紫外检测器（ UV）； b） 液相色谱 -质谱仪（ LC-MS）：配电喷雾离子源 ，具备 MRM检测模式 ； c） 电子天平： 定性检验实际分度值 d≤0.1mg，定量检验实际分度值 d≤0.01mg； d） 离心机； e） 振荡器； f） 真空抽滤泵； GA/T × × × ×—× × × × 3 g） 超声波清洗器； h） 移液器或移液管 。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品制备 样品充分均质化，称取约 10mg于具盖离心管中，加入 10mL甲醇，密封并振荡 5min，以不低于 4000r/min 离心 5min，取上清液， 用0.1%甲酸水溶液稀释 1000倍，稀释液经 0.22µ m的水系微孔滤膜 过滤，滤液作为样品溶液， 供LC-MS分析。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 液相色谱 -质谱仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a） 色谱柱： ACQUITY UPLC CSH C 18 （1.7μm，100mm×2.1mm）或其他等效柱； 注： ACQUITY UPLC CSH C 18柱为 Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不 是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品 。 b） 柱温： 40ºC； c） 流动相：A：0.1%甲酸水溶液， B：乙腈； d） 洗脱：梯度洗脱程序见表 1； 表1 梯度洗脱程序 时间 min 流动相 A 流动相 B 0 98% 2% 1.5 98% 2% 6.5 10% 90% 8.0 10% 90% 8.1 98% 2% 12 98% 2% e） 流速： 0.4mL/min ； f） 进样量：1μL； g） 离子源：电喷雾离子源； h） 检测模式 ：正离子模式； i） 离子喷雾电压： 5500V； j） 离子源温度： 550ºC； k） 碰撞气（ CAD） 、气帘气（ CUR） 、雾化气（ GS1） 、辅助气（ GS2）均为高纯氮气，使用前调 节各气流的流量以使质谱灵敏度达到检测要求 ； l） α-PBP、α-PVP和4-F-α-PVP的离子对、去簇电压 （DP）和碰撞能量 （CE）：见表 2。 GA/T × × × ×—× × × × 4 表2 质谱参考条件 名称 母离子 m/z 子离子 m/z 去簇电压 V 碰撞能量 eV α-PBP 218.1 91.1 46 31 112.1 23 α-PVP 232.1 126.1 30 33 161.1 25 4-F-α-PVP 250.1 109.1 41 31 126.1 35 7.1.2.2 进样 分别吸取样品空白（ 0.1%甲酸水溶液 ）、样品溶液、 标准溶液空白（ 0.1%甲酸水溶液 ）和定性用 标准工作溶液， 按 7.1.2.1条件进样分析。 或根据实际需求， 再分别吸取标准溶液空