ICS 13.310 A 92 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA GA/T × × × × －× × × × 法庭科学 生物检材中乐果等八种有机磷 类农药检验 气相色谱 和气相色谱-质谱法 Forensic sciences—Examination method s for eight organophosphorus pesticide s including dimethoate in biological samples —GC and GC -MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 -2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析 分技术委员会 （SAC/TC 179/SC1 ）提出并归口。 本标准起草单位： 公安部物证鉴定中心 、山东省公安厅 。 本标准主要起草人： 栾玉静、杜鸿雁、王瑞花、董颖、魏春明、 王爱华、任昕昕、 王芳琳、 常靖、 于忠山、高宏、宋丽娟。 GA/T × × × × —× × × × 1 法庭科学 生物检材中乐果等八种有机磷 类农药检验 气相色谱和 气相色谱 -质谱法 1 范围 本标准规定了 法庭科学 生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等） 中乐果、氧乐果、马拉硫磷、 对硫磷、 甲基对硫磷、 甲拌磷、 倍硫磷和 乙拌磷的气相色谱 （ GC）定量检验方法 和气相色谱 -质谱 （ GC-MS） 定性定量 检验方法。 本标准适用于 法庭科学 生物检材中乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、 倍硫 磷和乙拌磷的定性分析和定量分析。 其他可疑样品 中乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、 甲拌磷、 倍硫磷和 乙拌磷的定性分析和定量分析 可参照使用 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是 注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对生物样品进行提、净化及浓缩，采用气相色 谱法进行定 量、气相色谱 -质谱法进行定性定量，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度比作为 定性判断依据；以峰面积为依据，用外标法进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的三级水。 除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯， 试剂包括： a) 乙酸乙酯（色谱纯） ； b) 环己烷（色谱纯） ； c) 甲醇； d) 标准溶液： 1) 1.0mg/mL 标准物质溶液：根据标准物质的纯度，各称取适量，分别用甲醇配制 1.0mg/mL 乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、 倍硫磷和 乙拌磷标准物质溶液， 置于冰箱中冷藏保存。有效期 6个月。或采用市售标准溶液 ； 2) 0.1mg/mL单一标准工作 溶液：移取 1.0mg/mL 的乐果、氧乐果、马拉硫磷、对 硫磷、甲GA/T × × × × —× × × × 2 基对硫磷、 甲拌磷、 倍硫磷和 乙拌磷标准物质溶液 各1mL， 分别用甲醇稀释并定容至 10mL， 混匀，配制成浓度为 0.1mg/mL的单一标准工作 溶液，密封，置 于冰箱中冷 藏保存。有效 期3个月。实验中所用其 他浓度的单一标准工作溶液均由 0.1mg/mL标准物质 溶液用甲醇 稀释得到 。 注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。 5.2 材料 材料包括： a) 具盖离心管； b) 玻璃试管 。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱 -质谱仪：配有电子轰击源（ EI）； b) 气相色谱仪：配有火焰光度检测器（ FPD）； c) 凝胶渗透 色谱净化浓缩联用仪； d) 电子天平； e) 振荡器； f) 离心机； g) 移液器； h) 浓缩器； i) 匀浆机。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 7.1.1.1 液液萃取 移取血液等液体检材样品 1.0mL～2.0mL， 或称取铰碎（或匀浆） 的肝脏等固体检材样品 1.0g～2.0g 于具盖离心管中 ，加入乙酸乙酯或二氯甲烷 3.0mL~ 6.0mL，振荡 5min，8000r/min 离心 10min，分离有 机相；重复提取一次，合并两次提取的有机相 ，置于浓缩器上 45℃浓缩至干， 残留物用甲醇 100L溶 解，作为检材样品提取液供 仪器分析。如需净化，按 7.1.1.2操作。 7.1.1.2 样品净化 取7.1.1.1中两次提取后 合并的有机相， 用凝胶渗透色谱仪净化 按7.1.2.1.1 操作，浓缩至 1mL，再 置于浓缩器上 45℃浓缩至干， 残留物用甲醇 100L溶解，作为检材样品提取液供 仪器分析。 7.1.1.3 质控样品制备 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份作 为空白样品，一份添加 乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、 倍硫磷和 乙拌磷标准 物质，作为添加样品 （添加样品的浓度为 1.0μg/mL（g）），与检材样品平行操作，得到空白样品提取 液和添加样品提取液供仪器 分析。 GA/T × × × × —× × × × 3 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 仪器条件 7.1.2.1.1 凝胶色谱净化浓缩联用仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品 等实际情况进行调整 : a) 净化柱： 20mm× 300mm ，填料为 50.0 g 中性多孔的交联 苯乙烯二乙烯基苯聚合物或类似物 ； b) 流动相： 环己烷 /乙酸乙酯 （体积比 1:1 ）混合溶剂 ； c) 流速： 4.7 mL/min ； d) 收集时间： 收集 540 s～900s的洗脱液； e) 在线浓缩温度和真空度： 1区： 40℃ 30.0 kPa；2 区： 50℃ 25.0 k Pa；3 区： 50℃ 22.0 k Pa。 7.1.2.1.2 气相色谱 -质谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： DB-5MS柱（ 30m× 0.25mm× 0.25µ m ）或等效色谱柱 ； 注： DB-5MS柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品 的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 100℃保持 2min，以 30℃/min速率升温至 280℃，保持 17min； c) 进样口温度： 280℃； d) 传输线温度： 260℃； e) 载气：氦气； f) 进样方式：分流进样，分流比 10∶1； g) 电子轰击能量： 70eV； h) 离子源温度： 250℃； i) 倍增器电压：自动调谐值； j) 柱流量： 1mL/min ； k) 质量扫描范围： 40amu~450amu ； l) 扫描方式：全扫描（ Scan）； m) 目标物质谱特征离子碎片峰： 见表 1。 表1 检测目标物 质谱特征离子碎片峰 名称 质谱特征离子碎片峰（ EI源） 甲拌磷 m/z 75*、m/z 121、m/z 231、m/z260 乙拌磷 m/z 88*、m/z 97、m/z 1 86、m/z 2 74 马拉硫磷 m/z 125*、m/z 93、m/z 158、m/z 173 乙基对硫磷 m/z 97*、m/z109、m/z 139、m/z291 乐果 m/z 87*、m/z 93、m/z 125、 m/z229 氧乐果 m/z 156*、m/z 1 10、m/z 213 甲基对硫磷 m/z 1 09*、m/z 125、m/z 2 63 倍硫磷 m/z 278*、m/z 1 09、m/z 125、m/z169 注：*为定量离子 。 7.1.2.2 进样 分别吸取检材、空白和添加样品提取液 及标准工作溶液，按 7.1.2.1的分析条件进样分析。 GA/T × × × × —× × × × 4 7.2 定量分析 7.2.1 样品提取 移取血液等液体检材样品 1.0mL～2.0mL，或称取铰碎 （或匀浆） 的肝脏等固体检材样品 1.0g～2.0g 两份，按 7.1.1进行操作。 另取等量 相似基质的空白样品 三份，其中两份分别添加 乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对 硫磷、甲 拌磷、倍硫磷和 乙拌磷（添加样品中目标物含量应为检材 样品中目标物含量的 (100±50)%）， 另一份作为空白样品，与检材 样品平行 操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器 分析。 7.2.2 仪器检测 7.2.