ICS 13.310 A 92 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA GA/T × × × × －× × × × 法庭科学 生物检材中毒死蜱等 五种有机 磷农药检验 快速溶剂萃取 气相色谱 和气 相色谱-质谱法 Forensic sciences —Examination me thods for f ive organophosphorus pesticides including chlo rpyrifos in biological samples —Accelerated solvent extraction GC and GC -MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本标准按照 GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC 179/SC 1 ）提出并归口。 本标准起草单位： 公安部物证鉴定中心 、上海市公安局 、司法鉴定科学研究院 、黑龙江省公安厅。 本标准主要起草人 ：杜鸿雁、栾玉静、张蕾萍、董颖、王瑞花 、于忠山、何毅、王芳琳、张玉荣、 刘伟、沈敏、张吉林。GA/T × × × × —× × × × 1 法庭科学 生物检材中毒死蜱等 五种有机磷农药 检验 快速溶剂萃取 气相色谱 和气相色谱 -质谱法 1 范围 本标准规定了 法庭科学 生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等） 中毒死蜱、甲基对硫磷、对硫 磷、甲拌磷 和乐果的快速溶剂萃取 气相色谱 （GC）定量检验方法 和气相色谱 -质谱（GC-MS）定性定量 检验方法。 本标准适用于 法庭科学 生物检材中毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷、甲拌磷、乐果 的快速溶剂萃取气 相色谱（ GC）法定量分析 和快速溶剂萃取 气相色谱 气相色谱 -质谱（GC-MS）法定性定量分析 。其他可 疑样品中毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷、甲拌磷、乐果 的定性分析和定量分析可参照使用。 2 规范性引 用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件 。 4 原理 以空白样品和 添加样品作对照，按平行操作的要求， 用快速溶剂萃取仪（ ASE）对生物检材进行提 取、净化及 浓缩，采用气相色谱 -质谱法定性 定量，气相色谱 法定量，以保留时间 、质谱特征离子碎片 峰和离子丰度比作为定性判断依据； 以峰面积为依据，采用外标法 进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的三级水。 在分析中使用的 试剂均为分析纯 ，试剂包括： a) 乙酸乙酯； b) 丙酮； c) 二氯甲烷； d) 甲醇； e) 标准溶液： 1） 1.0mg/mL 标准物质溶液 :根据毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷、甲拌磷和乐果标准物质的纯 度，分别用甲醇配制 1.0mg/mL 毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷、甲拌磷和乐果标准物质溶 液，置于冰箱中冷冻保存。有 效期 12个月。或采用市售标准溶液 ； GA/T × × × × —× × × × 2 2） 0.1mg/mL 混合标准工作溶液： 移取 1.0mg /mL的毒死蜱、甲基对硫磷、对 硫磷、甲拌磷和 乐果标准物质溶液各 1.0mL，用甲醇定容至 10mL，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存， 有效期 6个月。实验中所用其它浓度的混合标准工作溶液均由 1.0mg/mL 标准物质溶液用 甲醇稀释得到 。 注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。 5.2 材料 材料包括： a) 具盖离心管 ； b) 具塞玻璃试管 ； c) 颗粒状硅藻土； d) 中性三氧化二铝（ 100µm～200µm） ：市售试剂在 350℃下加热 15h，冷却后备用 。 6 仪器和设备 仪器和设备包括 ： a) 气相色谱 -质谱仪：配有电子轰击源（ EI）； b) 气相色谱仪：配有火焰光度检测器 （FPD）； c) 快速溶剂萃取仪：配 有10mL萃取池； d) 电子天平； e) 浓缩器； f) 离心机。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 7.1.1.1 快速溶剂萃取 移取血液等液体检材样品 1.0mL～3.0mL，或称取铰碎的肝脏等固体检材样品 1.0g～3.0g于具盖离心 管中，加2g硅藻土搅拌均匀 ，转移至底部装有 2g中性三氧化二铝的萃取池中，按照 7.1.2.1.1条件进行操 作。萃取完毕后 ，转移萃取液至试管中，8000r/min 离心 5min，取有机相，置于浓缩器上 40℃浓缩至干， 残留物用甲醇 100μL溶解，作为检 材样品提取 液供仪器分析。 7.1.1.2 质控样品制备 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份，一份作为空白样品，一 份添加毒死蜱、 甲基对硫磷、 对硫磷、 甲拌磷和乐果 标准物质， 作为添加样品 （添加样品浓度为 0.5µg/mL）， 与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器检测。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 仪器条件 7.1.2.1.1 快速溶剂萃取 条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品实际 情况进行调整 : GA/T × × × × —× × × × 3 a) 系统压力： 1500psi； b) 萃取池温度： 100℃； c) 静态萃取时间： 5min； d) 静态萃取次数： 2次； e) 溶剂冲洗体积 ：萃取池体 积的 60%； f) 氮气吹扫时间： 90s； g) 萃取溶剂体积比：乙酸乙酯 /丙酮混合溶剂 (体积比 1:1)或二氯甲烷 /丙酮混合溶剂 (体积比 1:1)。 7.1.2.1.2 气相色谱 -质谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品实际 情况进行调整： a) 色谱柱： DB-5MS柱（30mm×0.25mm×0.25μm ）或等效色谱柱； 注： DB-5MS柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品 的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 80℃保持 2min，以30℃ /min速率升至280℃，保持 15min； c) 进样口温度： 280℃； d) 载气：高纯 氦； e) 柱流速：1.0mL/min； f) 进样方式：分流进样，分流比： 10:1； g) 离子源温度： 200℃； h) 扫描方式： 全扫描（ SCAN），质量扫描范围 40amu~ 550amu； i) 溶剂延迟： 3min。 j) 质谱特征离子碎片峰见表 1。 表1 检测目标物的 质谱特征离子碎片峰 检测目标物名称 质谱特征 离子碎片 峰 甲拌磷 m/z 75*、m/z 260、m/z 121 乐果 m/z 87*、m/z 125、m/z 229 甲基对硫磷 m/z 109*、m/z 263、m/z 125 毒死蜱 m/z 351*、m/z 314、m/z 286 对硫磷 m/z 291*、m/z 263、m/z 139 注：*为定量离子 。 7.1.2.2 进样 分别吸取检材、空白和添加样品提取液 及标准工作溶液，按 7.1.2.1的分析条件进样分析。 7.2 定量分析 7.2.1 样品提取 移取血液等液体检材样品 1.0mL～3.0mL，或称取铰碎的 肝脏等固体检材样品 1.0g～3.0g两份，按 7.1.1进行操作。 另取等量 相似基质的空白样品 三份，其中两份分别添加 毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷、甲拌磷、乐 果标准物质作为添加样品 （添加样品中目标物 含量应为检材 样品中目标物含量的 (100±50)%），另一份 作为空白样品，与检材 样品平行 操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器检测。 GA/T × × × × —× × × × 4 7.2.2 仪器检测 7.2.2.1 仪器条件 7.2.2.1.1 快速溶剂萃取条件 按7.1.2.1 .1规定的条件分析。 7.2.2.1.2 气相色谱 -质谱条件 按7.1.2.1 .2规定的条件分析。 7.2.2.1.3 气相色谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品 等实际情况进行调整： a) 检测器：火焰光度检测器（ FPD）； b) 色谱柱： DB-5柱（ 30mm×0.25mm×0.25μm）或等效色谱柱； 注： DB-5柱是 Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认 可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 c) 色谱柱温程： 80℃保持 1min，以 8℃/min速率升至 280℃，保持 1m