ICS 11.080 CCS C 59 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫生行 业 标 准 WS/T 10016—2024 消毒剂与抗抑菌剂中激素的检测方法 Analytical method for hormones in disinfectant and antibacterial and bacter iostatic agents 2024 - 10 - 11发布 2025 - 03 - 01实施 国家疾病预防控制局 发布 WS/T 10016—2024 I 目次 前言 ................................ ................................ ................ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 检测方法 ................................ ................................ .......... 1 5 其它激素类药物的检测方法 ................................ .......................... 5 附录A（资料性） 标准品相关信息 ................................ ...................... 6 附录B（资料性） 超高效液相色谱梯度洗脱程序 ................................ .......... 7 附录C（资料性） 质谱参考条件 ................................ ........................ 8 附录D（资料性） 标准图谱 ................................ ............................ 9 附录E（规范性） 方法检出限、定量限及定量内标的选定 ................................ . 11 WS/T 10016—2024 Ⅱ 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由国家疾病预防控制标准委员会消毒标准专业委员会提出，国家疾病预防控制局归口。 本文件起草单位：江苏省疾病预防控制中心、南京医科大学、无锡市疾病预防控制中心、南宁市疾 病预防控制中心、 国家食品安全风险评估中心 。 本文件主要起草人：徐燕、朱峰、吴晓松、夏彦恺、吉文亮、李放、孙宏、孟元华、范云燕、陈达 炜。 WS/T 10016—2024 1 消毒剂与抗 抑菌剂中激素的检测方法 1 范围 本文件规定了消毒剂与 抗抑菌剂 中激素的检测方法。 本文件适用于液体、凝胶剂型消毒剂 及液体、凝胶、膏 剂、霜剂剂型抗抑菌剂 中泼尼松、倍他米松、 地塞米松、曲安奈德、氢化可的松醋酸酯、泼尼松醋酸酯、可的松醋酸酯、地塞米松醋酸酯、氟轻松醋 酸酯、氯倍他索丙酸酯、异氟泼尼松 11种糖皮质激素 及其它激素 的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本 文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用 于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 WS/T 466—2014 消毒专业名词术语 中华人民共和国药典 化妆品安全技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 消毒剂 disinfectant 采用一种或多种化学或生物的杀微生物因子制成的用于消毒的制剂。 [来源：WS/T 466 —2014,3.40] 3.2 抗抑菌剂 antibacterial and bacteriostatic agents 抗菌剂和抑菌剂的总称。抗菌剂指能够灭杀微生物或抑制其生长和繁殖的制剂；抑菌剂指对细菌的 生长繁殖有抑制作用，但不能将其杀死的制剂。 [来源：WS/T 466 —2014,3.15,3.44 ] 4 检测方法 4.1 原理 WS/T 10016—2024 2 试样经水分散，用乙腈从分散液中提取激素类药物，用亚铁氰化钾和乙酸锌从提取液中沉淀大分子 基质，膏 剂、霜剂类基质用 增强型脂质 去除净化填料进一步去除脂质，加入盐析剂涡旋离心，上清液经 基质固相分散剂净化，用超高效液相色谱 -串联质谱仪测定，内标法定量。 4.2 试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，实验用水为 GB/T 6682 规定的一级水。 4.2.1 试剂 4.2.1.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 4.2.1.2 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 4.2.1.3 亚铁氰化 钾（K4Fe(CN) 6·3H 2O）。 4.2.1.4 乙酸锌（C4H6O4Zn·2H 2O）。 4.2.1.5 盐析剂（含1 g氯化钠和 4 g硫酸钠）。 4.2.1.6 基质固相分散净化管（含 20 mg石墨化炭黑 、100 mg十八烷基吸附剂 、100 mg乙二胺-N-丙 基硅烷和150 mg硫酸镁）。 4.2.1.7 增强型脂质 去除净化填 料（Enhanced matrix removal ；EMR）。 4.2.2 试剂配制 4.2.2.1 10%亚铁氰化钾溶液：称取 115 g亚铁氰化钾，用水溶解定容至 1 L。 4.2.2.2 20%乙酸锌溶液：称取 239 g乙酸锌，用水溶解定容至 1 L。 4.2.2.3 乙腈水溶液： 取乙腈200 mL，加水800 mL，混匀。 4.2.3 标准品 11种激素标准物质和 9种同位素内标纯度均大于 96.3%或经国家认证并授予标准物质证书的标准物 质，相关信息见附录 A。 4.2.4 标准溶液配制 4.2.4.1 标准储备液 （约1.0 mg/mL ）：分别准确称取 11种激素标准物质约 10.0 mg于10 mL容量瓶 中，用甲醇溶解并定至刻度，配成浓度约为 1.0 mg/mL 的标准储备液，在 -18 ℃下冷冻保存，有效期为 3个月。 4.2.4.2 混合标准中间液 （10 μg/mL ）：分别准确吸取适量各单一标准储备液于 25 mL容量瓶中，用 甲醇稀释并定容至刻度， 配制成浓度为 10 μg/mL 的混合标准中间液， 冷藏避光保存， 有效期为 1个月。 4.2.4.3 内标化合物标准储备液 （约1.0 mg/mL ）：分别称取 9种同位素内标化合物约 10.0 mg于10 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配成浓度约为 1.0 mg/mL 的内标储备液，在 -18 ℃下冷冻保存， 有效期为 6个月。 4.2.4.4 混合内标化合物标准中间液：分别吸取适量单一内标储备 液于10 mL容量瓶中，用甲醇稀释 并定容至刻度，配制成 1.0 μg/mL 的混合内标中间液，冷藏避光保存，有效期为 3个月。 4.2.4.5 混合标准溶液：用乙腈水溶液将 激素类药物标准中间液配制成混合标准系列溶液，如 标准系 列中各目标物的质量浓度分别为 1 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL， 标准系列中 各内标化合物的 质量浓度 均为10 ng/mL，超高效液相色谱 -串联质谱仪测定 。临用现配。 WS/T 10016—2024 3 4.2.5 材料 有机系滤膜：孔径 为0.22 μm 。 4.3 仪器和设备 4.3.1 超高效液相色谱 -串联质谱仪：带电喷雾离子 源（ESI源）。 4.3.2 分析天平：感量为0.1 mg。 4.3.3 离心机：转 速≥12000 r/min 。 4.3.4 涡旋混合器。 4.4 分析步骤 4.4.1 样品前处理 4.4.1.1 液体剂型和凝胶剂型 称取1.000 g（精确至 1 mg）混合均匀的样品，置于 50 mL离心管中，先加入 50.0 μL混合内标化合 物标准中间液，再分别加入 5.0 mL水和10.0 mL乙腈，涡旋提取 10 min，加入10%亚铁氰化钾 和20%的乙 酸锌各0.20 mL，涡旋5 min，加入盐析剂，涡旋 5 min，10000 r/min 离心5 min，取1.5 mL上清液转移 至基质分散固相净化管中，涡旋 1 min，12000 r/min 离心5 min，取0.80 mL上清液吹干，最后用 0.40 mL 乙腈水溶液复溶，上机检测 。 4.4.1.2 膏剂和霜剂剂型 称取1.000 g（精确至 1