ICS 11.020 CCS C 05 WS 中华人民共和国 卫生行业标准 WS/T 822—2023 蚤类密度监测方法标准 Standard of surveillance methods for flea density 2023-06-16发布 2023-12-01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 WS/T 822 —2023 I 前言 本标准由国家卫生健康标准委员会卫生有害生物防制标准专业委员会负责技术审查和技术咨询， 由中国疾病预防控制中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委规划发展与信息化 司负责业务管 理、法规司负责统筹管理。 本标准起草单位： 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心、 云南省地方病防治所、北京市疾病预防控制中心 。 本标准主要起草人： 鲁亮、樊玉娟、高子厚、佟颖、夏连续、李贵昌、黎唯 、李静、邵宗体。 WS/T 822 —2023 1 蚤类密度监测方法标准 1 范围 本标准规定了蚤类成虫密度监测方法，包括探洞法、梳检法、检巢法和粘捕法。 本标准适用于蚤类密度和蚤种的监测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本 标准必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本 标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 标准。 GB/T 24689.4 植物保护机械 诱虫板 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 蚤类 fleas 是昆虫纲（ Insecta）蚤目（ Siphonaptera ）的种类，为完全变态昆虫，分卵、幼虫、蛹和成虫四 个虫期。 3.2 蚤密度 flea density 单位宿主体表或单位时间空间内监测到的蚤成虫数量。 3.3 染蚤率 infested rate of flea 有蚤动物或环境（洞干、窝巢和粘虫纸）数占调查动物或环境总数的百分比。 3.4 蚤指数 flea index 监测动物或环境（洞干、窝巢和粘虫纸）所获得的蚤成虫数量的平均值 。 3.5 游离蚤 off-host flea 在人或动物居住和活动的环境或建筑物中新羽化的，或离开宿主动物体表在地面活动的蚤类成虫。 3.6 有效粘虫纸 valid glue board 监测过程中粘到蚤，或未损坏、未移动且未粘到蚤的粘虫纸。 4 监测方法 4.1 探洞法 4.1.1 适用范围 适用于草原和荒漠草原生境中旱獭、黄鼠和沙鼠等洞口较大的鼠类洞干中的 蚤密度和种类 监测。 4.1.2 器材 手持卫星定位仪、探蚤棒（见附 录A中图 A.1）、纯白摇粒绒布、眼科镊、冻存管、 20万分之一龙胆 紫2%氯化钠溶液、 75%酒精和普通生物显微镜等。 WS/T 822 —2023 2 4.1.3 操作步骤 监测工作开始前，先用手持卫星定位仪获得现场的海拔和经纬度数据，记录监测地点地址信息和所 处生境。探 蚤前先将纯白摇粒绒布 （1 m×1 m）铺于洞口一侧 ，再将探蚤棒缠 有纯白摇粒绒布 的一端伸 入洞干，轻轻抖动探蚤棒 1 min以吸引和 粘附跳蚤，然后在铺 纯白摇粒绒布 的一侧抽 出探蚤棒，在纯白 摇粒绒布上 检查粘于探蚤棒及掉落在 纯白摇粒绒布 上的跳蚤 ，用眼科镊将蚤收集于冻存管中（探洞法操 作示意图见附 录A中的图 A.2）。探洞干深度超过 1.2 m(旱獭 )或0.5 m（黄鼠和沙鼠）为有效洞。每个 洞 干探蚤 3次（3次采集蚤总数计为一个洞的蚤数） 。1个洞的蚤类 应放于同一冻存管中并编号。用于鼠疫 菌培养的蚤类标本可用 20万分之一龙胆紫 2%氯化钠溶液保存， 用于分类鉴定和标本制作的蚤类标本可 用75%酒精保存。记录每次探洞结果于监测记录表（ 蚤类探洞法 监测记录表见附录 B中的表 B.1）。蚤类 带回实验室利用普通生物显微镜进行检视分类，确定蚤的种类，记录并汇总探洞干总 数、有效洞干数、 采集的蚤总数、有 蚤洞干数、无蚤洞干数、每个洞干蚤种、每种 蚤的雌雄数量等信息于监测汇总表 (蚤 类探洞法 监测汇总表见附录 B中的表 B.2)。 4.1.4 蚤密度计算方法 洞干染蚤率按公式（ 1）计算： 𝑅𝑏=𝑁𝑏𝑓 𝑁𝑏×100% ································ ···················· (1) 式中： Rb——洞干染蚤率； Nbf——有蚤洞干数，单位为 洞； Nb——所探有效 洞干总数，单位为 洞。 洞干蚤指数按公式（ 2）计算： 𝐼𝑏=𝑁𝑓 𝑁𝑏 ································ ································ ··············· (2) 式中： Ib——洞干蚤指数，单位为只每 洞（只/洞）； Nf——采集到的 蚤总数，单位为只； Nb——所探有效 洞干总数，单位为 洞。 洞干分种蚤指数按公式（ 3）计算： 𝐷𝐼𝑏=𝑁𝑑𝑓 𝑁𝑏 ································ ································ ············· (3) 式中： DIb——洞干某种蚤指数， 单位为只每 洞（只/洞）； Ndf——采集到的某种蚤数，单位为只； Nb——所探有效洞干总 数，单位为 洞。 4.2 梳检法 4.2.1 适用范围 适用于啮齿动物等中小型兽类体表 的蚤密度和种类监测 。 4.2.2 器材 手持卫星定位仪、鼠夹或鼠笼、鼠袋、白色搪瓷方盘、眼科镊、牙刷、梳子、冻存管、乙醚、 20万 分之一龙胆紫 2%氯化钠溶液、 75%酒精和普通生物显微镜 。 4.2.3 操作步骤 监测工作开始前，先用手持卫星定位仪获得现场的海拔和经纬度数据，记录监测地点地址信息和所 处生境。使用鼠夹或鼠笼捕捉鼠类或其它小型兽类。捕获小兽后，尽快将单只小兽置于鼠袋中，系紧袋WS/T 822 —2023 3 口，带回 实验室。将鼠袋置于密闭容器中，用适量乙醚麻醉 10 min以处死小兽及其体表各种寄生虫 。然 后在白色搪瓷方盘 中用牙刷和梳子逐个梳检小兽体表和鼠袋内的蚤类，用眼科镊将蚤收集于冻存管中。 一只小兽 体表的蚤存放于同一冻存管中并编号。用于鼠疫菌培养的蚤类标本可用 20万分之一龙胆紫 2% 氯化钠溶液保存，用于分类鉴定和标本制作的蚤类标本可用 75%酒精保存。利用 普通生物显微镜 检视后 确定蚤的种类，记录每只小兽的种类，体表的蚤种、每种 蚤的雌雄数量等信息 于监测汇总表 (蚤类梳检 法监测汇总表见 附录 B中的表 B.3)。 4.2.4 蚤密度计算方法 体表染蚤率按公式（ 4）计算： 𝑅𝑠=𝑁𝑝𝑓 𝑁𝑠𝑚×100% ································ ································ ······ (4) 式中： Rs——体表染蚤率； Npf——有蚤小兽数， 单位为只； Nsm——捕获小兽总数， 单位为只。 体表蚤指数按公式（ 5）计算： 𝐼𝑠=𝑁𝑓 𝑁𝑠𝑚 ································ ································ ·············· (5) 式中： Is——体表蚤指数，单位为只每 小兽（只/小兽）； Nf——采集到的 蚤总数，单位为只； Nsm——捕获小兽总数， 单位为只。 体表分种蚤指数按公式（ 6）计算： 𝐷𝐼𝑠=𝑁𝑑𝑓 𝑁𝑠𝑚 ································ ································ ············· (6) 式中： DIs——体表某种蚤指数， 单位为只每 小兽（只/小兽）； Ndf——采集到的某种蚤数，单位为只； Nsm——捕获小兽总数 ，单位为 只。 4.3 检巢法 4.3.1 适用范围 适用于自然界外环境 中鼠巢内的蚤密度和 蚤种类监测 。 4.3.2 器材 手持卫星定位仪、长柄铲、 鼠袋、白色搪瓷方盘 、眼科镊、冻存管、乙醚、 20万分之一龙胆 紫2%氯 化钠溶液、 75%酒精和普通生物显微镜 等。 4.3.3 操作步骤 监测工作开始前，先用手持卫星定位仪获得现场的海拔和经纬度数据，记录监测地点地址信息和所 处生境。挖开鼠类洞穴，找到窝巢，收集窝巢的 草屑、动物毛 ，以及底层 浮土等装入鼠袋内，带回实验 室。现场记录鼠洞编号、经纬度和海拔数据、可能的动物种类等数据于监测记录表（ 蚤类检巢法 监测记 录表见附 录B中的表 B.4）。在实验室将布袋置于密闭容器中，用适量乙醚麻醉 10 min以处死蚤类， 然后 将鼠巢材料置于白色搪瓷方盘内检查 和收集巢蚤，用眼科镊将蚤收集于冻存管中。一个 巢穴的蚤类装入 同一冻存管并编号。用于鼠疫菌培养的蚤类标本可用 20万分之一龙胆紫 2%氯化钠溶液保存，用于分类 鉴定和标本制作的蚤类标本可用 75%酒精保存。用普通生物显微镜对蚤类进行检视确定蚤的种类，记录 每个窝巢中蚤种、每种 蚤的雌雄数量等