ICS11.020 CCSC50 WS 中华人民共和国卫生行业标准 WS/T491—2024 代替WS/T491—2016 梅毒非特异性抗体检测指南 Guidelineofnon-treponemaltestsforsyphilis 2024-05-09发布 2024-11-01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会  发布WS/T491—2024 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4缩略语..............................................................................1 5检测原理与方法......................................................................2 6标本采集和处理......................................................................2 7仪器和器材..........................................................................3 8实验操作步骤........................................................................5 9结果描述和表示......................................................................7 10质量控制...........................................................................8 11临床意义..........................................................................10 12局限性............................................................................12 附录A（规范性）抗干扰性能初步评估...................................................13 附录B（规范性）抗干扰性能评估—验证厂家声明.........................................14 附录C（规范性）水平旋转仪关键技术参数...............................................15 参考文献..............................................................................16WS/T491—2024 II前言 本标准为推荐性标准。 本标准代替WS/T491—2016《梅毒非特异性抗体检测操作指南》。与WS/T491—2016相比，除结构 调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： ——增加了规范性引用文件（见第2章）； ——增加了术语和定义中“前带现象”和“贾-赫反应”（见3.1和3.2）； ——增加了水平旋转仪中“固定反应程序”（见7.1.1.3）； ——增加了实验操作步骤中“脑脊液标本的检测”（见8.3.4和8.3.5）； ——增加了报告格式概述、质量控制概述（见9.3和10）； ——增加了临床意义中“检测策略”（见11.1）； ——增加了附录C水平旋转仪关键技术参数等（见附录C）； ——更改了标本采集和标本处理的部分条款（见第6章，见2016年版的第7章）； ——删除了缩略语中转速条款（见2016年版的第4章）。 本标准由国家卫生健康标准委员会临床检验标准专业委员会负责技术审查和技术咨询，由国家卫生 健康委医疗管理服务指导中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委员会医政司负责业务管理、法 规司负责统筹管理。 本标准起草单位：上海市皮肤病医院、复旦大学附属中山医院、厦门大学附属中山医院、华中科技 大学同济医学院附属同济医院、上海市临床检验中心、四川大学华西医院、中国人民解放军空军军医大 学附属第一医院、中国疾病预防控制中心性病控制中心、北京大学第一医院、中国医科大学附属第一医 院。 本标准主要起草人：顾伟鸣、郭玮、杨天赐、孙自镛、王庆忠、陶传敏、刘家云、尹跃平、冯珍如、 赵敏。 本标准于2016年首次发布，本次为第一次修订。WS/T491—2024 1梅毒非特异性抗体检测指南 1范围 本标准规定了梅毒非特异性抗体检测的技术要求。 本标准适用于开展梅毒非特异性抗体检测的相关机构。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 标准。 GB/T22576.1—2018医学实验室质量和能力的要求第1部分：通用要求 GB/T22576.5医学实验室质量和能力的要求第5部分：临床免疫学检验领域的要求 WS/T661静脉血液标本采集指南 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 3.1 前带现象prozonephenomenon 前带现象是一种抗原-抗体免疫反应现象。患者血清中存在高浓度的抗体时，检测时血清标本中 的抗体量显著多于抗原量，抗原抗体量的比例不合适，所形成的免疫复合物反而减少，不出现凝集或者 凝集反应减弱的假阴性。当血清稀释后再检测呈现高滴度阳性结果的现象。 注1：部分现症患者的梅毒非特异性抗体检测可发生前带现象。梅毒患者有特征性的临床表现，其血清标本的定 性实验可显示阴性反应或弱凝集反应，血清经过梯度倍比稀释后，半定量实验的凝集反应由弱到强，再 逐步减弱。 注2：1％～2％二期梅毒、0.5％～1％一期梅毒、少数晚期梅毒患者的梅毒非特异性实验可出现前带现象。 3.2 贾-赫反应Jarisch-Herxheimerreaction 贾-赫反应指在第一次抗梅毒治疗后24h内，其症状反应加重。这是由于抗梅毒药物杀灭了梅毒螺 旋体，而释放大量异种蛋白及内毒素，被患者吸收后在病损处或体内发生加剧症状的反应。 注：存在前带现象的患者，在首次治疗时更容易发生贾-赫反应。导致医疗风险。 3.3 血清固定serofast 血清固定指患者经过规范抗梅毒治疗和一定时间的随访，其梅毒非特异性抗体水平维持在相对 恒定的低滴度状态。 注1：判断血清固定应具备3个要素：1.流行病学病史和临床表现排除复发、再感染；2.经过抗梅毒治疗后，连续2 个随访周期（≥6月），患者血清抗体波动在±1滴度范围之内的低滴度水平（一般滴度≤1:8）。即变化趋势 不明显；3.无实验室的技术性和方法学误差。 注2：晚期梅毒患者的血清固定发生率达35.2％至44.4％。个别患者可终生血清固定。 4缩略语 下列缩略语适用于本标准。WS/T491—2024 2VDRL：性病研究实验室实验（VenerealDiseaseResearchLaboratorytest） RPR：快速血浆反应素环状卡片实验（RapidPlasmaReaginCircleCardtest） EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamineTetraaceticAcid） TRUST：甲苯胺红不加热血清实验（ToluidineRedUnheatedSerumtest） RCF：相对离心率（RelativeCentrifugalForce） CSF：脑脊液（CerebrospinalFluid） r/min：每分钟转速（RevolutionsPerMinute） s/min：每分钟秒（SecondsPerMinute） SOP:标准操作程序（StandardOperatingProcedure） 5检测原理与方法 5.1原理 宿主感染梅毒螺旋体后，被损害的宿主细胞及梅毒螺旋体本身释放的类脂物质，引起宿主产生IgM 和IgG等抗类脂质抗体。这类抗体在体外与含心磷脂、卵磷脂和胆固醇的抗原溶液发生反应，产生絮状 凝集现象，凝集的强弱程度与抗体浓度成正相关，在一定程度上反映梅毒螺旋体感染宿主的免疫活动状 态。 5.2方法 5.2.1VDRL 商品化试剂盒包含VDRL抗原、VDRL缓冲液和说明书。 VDRL抗原是含有心磷脂、卵磷脂和胆固醇的无水乙醇溶液。VDRL缓冲液含氯化钠、40％甲醛（中性） 水溶液、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾的磷酸盐溶液，pH=6.0±0.1。用缓冲液新鲜配制的VDRL抗原工作液 与标本中的抗体发生反应，在显微镜下可观察到絮状凝集。 5.2.2RPR 商品化试剂盒包含抗原、阴性对照品、阳性对照品、抗原滴针、反应板和说明