ICS 11.020 CCS C 50 WS 中华人民共和国 卫生行业标准 WS/T 421—2024 代替 WS/T 421 —2013 抗酵母样真菌药物敏感试验标准 肉汤稀释法 Standards for a ntifungal susceptibility testing of yeasts —Broth dilution method 2024 - 04 - 02发布 2024 - 09 - 01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 WS/T 421 —2024 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 抗真菌药物的配制 ................................ ................................ ... 2 5 培养基的配制 ................................ ................................ ....... 4 6 肉汤稀释法操作步骤 ................................ ................................ . 4 7 结果判读与解释 ................................ ................................ ..... 5 8 质量控制 ................................ ................................ ........... 8 附录A（资料性） RPMI-1640肉汤培养基配制方法 ................................ ........ 10 附录B（规范性） 肉汤稀释法质控菌株 MIC范围 ................................ .......... 12 附录C（规范性） 酵母样真菌药敏试验可用的折点和 /或ECV汇总表 ......................... 15 附录D（规范性） 体外微量肉汤稀释法 MIC折点和ECV ................................ .... 16 附录E（规范性） EUCAST微量肉汤稀释法质控范围、折点和 ECOFF值 ....................... 23 参考文献 ................................ ................................ ............. 28 WS/T 421 —2024 II 前言 本标准为推荐性标准。 本标准代替 WS/T 421 —2013《抗酵母样真菌药物敏感性试验 —肉汤稀释法》，与 WS/T 421 —2013 相比，除结构调整和编辑性改动外， 主要技术变化如下： ——增加了术语和定义中“流行病学界值” 、 “野生型” 、 “非野生型”和“拖尾生长” ，删除了“非 敏感” （见 3.8、3.9、3.10、3.12，2013年版的2.8）； ——抗真菌药物储存液使用的溶剂、 稀释液和检测范围表格增加了瑞扎芬净、 艾瑞芬净、 Manogepix 、 艾沙康唑、酮康唑、雷夫康唑（见 4.3.2）； ——更改了结果解释内容：按 CLSI（Clinical and Laboratory Standard Institute ）有折点的 念珠菌属、无折点的念珠菌属、暂定折点的耳念珠菌、无折点的隐球菌属及有折点和流行病学 界值（CLSI表述：epidemiological cutoff value ，ECV）的念珠菌属分别进行说明，并在附 录D分别列表；增加了对抗真菌药物的具体说明； CLSI和EUCAST的肉汤稀释法步骤基本一 致，对有差异部分在文中相应部分给予了说明，包括增加了 EUCAST(The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) 折点和流行病学界值（ EUCAST表述： epidemiological cutoff ，ECOFF）结果解释并在附录 E列出试验条件、质控范围、折点、 ECOFF 值等表格（见 7.2，2013年版的5.5）； ——增加了结果报告方式， CLSI及EUCAST两种药敏方法相应的结果报告方式（见 7.4）； ——删除了质量控制中质控频率和检测频率内容，增加了：按培养基和材料质控、纯度质控、终点 判读和质控； 日常使用质控菌株的复苏方法 （见 2013年版的7.3，见8.2、8.3、8.4、8.5.3）； ——更改了附录 A为相关培养基配制表格，附录 B为质控MIC范围，附录 C为酵母样真菌的折点和 ECV值汇总等（见附录 A、附录B、附录C，见2013年版的附录 A、附录B、附录C）。 本标准由国家卫生健康标准委员会临床检验标准专业委员会负责技术审查和技术咨询， 由国家卫生 健康委医疗管理服务指导中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委员会医政司负责业务管理、 法 规司负责统筹管理。 本标准起草单位：北京医院 /国家卫生健康委临床检验中心、北京大学人民医院、首都医科大学附 属北京友谊医院、中国医学科学院北京协和医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院、上海市东方 医院（同济大学附属东方医院）、北京大学第一医院、解放军总医院第一医学中心。 本标准主要起草人：胡继红、王辉、苏建荣、胡云建、徐英春、孙自镛、吴文娟、李若瑜、沈定霞、 骈亚亚。 本标准于 2013年首次发布，本次为第一次修订。 WS/T 421 —2024 1 抗酵母样真菌药物敏感试验标准 肉汤稀释法 1 范围 本标准规定了用经典的宏量肉汤稀释方法（ Broth Macrodilution method）检测抗酵母样真菌的最 低抑菌浓度（ Minimal Inhibitory Concentration, MIC ）的参考方法，并推荐了与本参考方法结果具 有良好一致性的微量肉汤稀释方法（ Broth Microdilution method ）。 本标准适用于引起感染的酵母样真菌（包括念珠菌属某些种 Candida spp.和隐球菌属某些种 Cryptococcus spp.）的药物敏感性试验，并推荐了某些相关抗真菌药物的肉汤稀释试验的最低抑菌浓 度（MIC）质控参考范围、折点、结果解释性分类和流行病学界值。 本标准不适用于双相真菌如皮炎芽生菌 Blastomyces dermatitidis 、荚膜组织胞浆菌 Histoplasma capsulatum 及丝状真菌的 检测。 2 规范性引用文件 本标准没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 标准。 最低抑菌浓度 minimal inhibitory concentration ; MIC 肉汤稀释法中，抗真菌药物能抑制微生物生长的最低浓度。本标准使用评分确定 MIC值。 折点 breakpoint ; BP 用于区分菌株为敏感、剂量依赖性敏感、中介、耐药的最低抑菌浓度（ MIC）或抑菌圈直径数值。 折点系综合微生物学特征、药代动力学 -药效学（ Pharmacokinetics -pharmacodynamics,PK/PD ）参 数、临床疗效数据而得出， 还可随特定的感染部位、 常规药物剂量、 给药途径及频次等的变化而不同。 解释性分类 interpretive category 结果解释性分类源于可获得的 微生物特性、 药代动力学 -药效学 （PK/PD） 参数和临床疗效结果数据。 根据建立的折点将药敏结果所得的 MIC值进行敏感、剂量依赖性敏感、中介、耐药解释分类。 敏感susceptible ; S 此浓度的抗真菌药物在体外试验中能抑制真菌生长， 当使用推荐剂量时， 可能获得良好的临床疗效。 剂量依赖性敏感 susceptible -dose dependent ; SDD 指分离株的敏感性依赖于对患者的用药方案， 即对于药敏结果在 SDD范围内的分离株，为了使血药 浓度达到临床疗效 ，采用较高剂量和 /或增加用药频率的给药方案， 使药物暴露高于常用敏感折点的剂 量。 WS/T 421 —2024 2 中介 intermedi