ICS 11.020 CCS C 50 WS 中华人民共和国 卫生行业标准 WS/T 411—2024 代替 WS/T 411—2013 抗丝状真菌药物敏感性试验 标准 肉汤稀释法 Standards for antifungal susceptibility testing of filamentous fungi —Broth dilution method 2024 - 04 - 02发布 2024 - 09 - 01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 WS/T 411 —2024 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 抗真菌药物的配制 ................................ ................................ ... 2 5 培养基的配制 ................................ ................................ ....... 6 6 肉汤稀释法操作步骤 ................................ ................................ . 6 7 结果判读与解释 ................................ ................................ ..... 8 8 质量控制 ................................ ................................ .......... 10 附录A（资料性） RPMI-1640干粉肉汤培养基配制方法 ................................ .... 12 附录B（规范性） 肉汤稀释法质控菌株 MIC范围 ................................ .......... 14 附录C（规范性） 体外微量肉汤稀释法 MIC折点 ................................ .......... 14 附录D（规范性） 丝状真菌 ECV值汇总表 ................................ ................ 16 附录E（规范性） EUCAST微量肉汤稀释法质控范围、折点和 ECOFF值 ....................... 19 参考文献 ................................ ................................ ............. 22 WS/T 411 —2024 II 前言 本标准为推荐性标准。 本标准代替 WS/T 411—2013《抗丝状真菌药物敏感性试验 —肉汤稀释法》 ，与 WS/T 411 —2013相 比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术内容变化如下： ——范围明确了不适合本行标的真菌种类（见 1）； ——增加了术语和定义中“最低有效浓度” 、 “流行病学界值” 、 “野生型” 、 “非野生型”和“拖尾生 长” （见3.2、3.8、3.9、3.10、3.12）； ——抗真菌药物储存液使用的溶剂、稀释液和检测范围表格分为非皮肤真菌和皮肤真菌，增加了艾 莎康唑、阿尼芬净、环吡酮、灰黄霉素、特比奈芬（见 4.4.1）； ——结果解释内容，按 CLSI（Clinical and Laboratory Standard Institute ）折点和流行病学 界值（CLSI表述：epidemiological cutoff value ，ECV） 解释结果； 增加了 EUCAST(The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing) 折点和流行病学界值 （EUCAST表述： epidemiological cutoff ，ECOFF）结果解释，并在附录 E列出试验条件、质控范围、折点、 ECOFF值等表格（见 7.2、附录E）； ——增加了结果报告方式， CLSI及EUCAST两种药敏方法相应的报告结果方式（见 7.3）； ——质量控制部分删除了质控频率和检测频率内容，增加： 1）按培养基和材料质控、纯度质控、 终点判读质控描述； 2） 日常使用质控菌株的复苏方法 （见 2013年版的7.5，见8.2、8.3、8.5.2）； ——更改了附录A为相关培养基配制表格，附录 B为质控菌株 MIC范围，附录 C为烟曲霉对伏立康 唑的MIC折点，附录 D为丝状真菌 ECV值汇总表等 （见附录 A、附录B、附录C、附录D，见 2013年版的附录 A、附录B、附录C、附录D）。 本标准由国家卫生健康标准委员会临床检验标准专业委员会负责技术审查和技术咨询 ,由国家卫生 健康委医疗管理服务指导中心负责协调性和格式审查 ,由国家卫生健康委员会医政司负责业务管理、法 规司负责统筹管理。 本标准起草单位：北京医院 /国家卫生健康委临床检验中心、中国医学科学院北京协和医院、首都 医科大学附属北京友谊医院、 北京大学人民医院、 北京大学第一医院、 首都医科大学附属北京同仁医院、 复旦大学附属华山医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院。 本文件主要起草人：胡继红、徐英春、苏建荣、胡云建、王辉、李若瑜、鲁辛辛、章强强、孙自镛、 艾效曼。 本标准于 2013年首次发布，本次为第一次修订。 WS/T 411 —2024 1 抗丝状真菌药物敏感性试验标准 肉汤稀释法 1 范围 本标准规定了微量和宏量肉汤稀释法检测抗丝状真菌药物最低抑菌浓度（ Minimal Inhibitory Concentration, MIC ）的参考方法。 本标准适用于引起深部真菌感染的产孢丝状真菌的药物敏感性试验，包括曲霉属某些种 （Aspergillus spp.）及种复合群、镰刀菌属某些种（ Fusarium spp.）及种复合群、根霉属某些种 （Rhizopus spp.）和毛霉目 Mucorales （接合菌纲 Zygomycetes ）、多育节荚孢霉（ Lomentospora prolificans ，原多育赛多孢霉（ Scedosporium prolificans ）和申克孢子丝菌复合群的菌丝相，以及 引起皮肤真菌感染的毛癣菌属某些种（ Trichophyton spp.）、小孢子菌属某些种（ Microsporum spp.） 和表皮癣菌属某些种（ Epidermophyton spp.）。 本标准不适用于检测双相真菌如皮炎芽生菌（ Blastomyces dermatitidis ）、荚膜组织胞浆菌 （Histoplasma capsulatum ）、粗球孢子菌属（ Coccidioides spp.）、马尔尼菲篮状菌（ Talaromyces marneffei ）及酵母样真菌的药敏试验，也不适用于检测棘白菌素类对皮肤真菌以及环吡酮、灰黄霉素 或特比萘芬类对非皮肤真菌的药敏试验。 2 规范性引用文件 本标准没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 最低抑菌浓度 minimal inhibitory concentration; MIC 肉汤稀释法中，抗真菌药物能抑制微生物生长的最低浓度。 最低有效浓度 minimal effective concentration; MEC 在最低浓度抗菌药物作用下，与生长对照孔菌丝浑浊生长相比，引起菌丝呈小而圆菌落、非融合生 长变化的最低药物浓度。本定义目前仅用于棘白菌素类抗真菌药。 折点 breakpoint 用于区分菌株为敏感、中介、耐药的最低抑菌浓度（ MIC）。 解释性分类 interpretive category 结果解释分类基于可获得的微生物特性、药代动力学 -药效学（ PK/PD）参数和临床疗效结果数据。 根据建立的折点将药敏结果进行敏感、中介、耐药解释分类。 敏感 susceptible; S 此浓度的抗真菌药物在体外试验中能抑制真菌生长， 当使用推荐剂量时， 可能获得良好的临床疗效。 WS/T 411 —2024 2 中介 intermediate; I 菌株的MIC通常可达到常规用药时