ICS 13.060.01 CCS Z 17 T/PSC 1.6—2022 船舶压载水检测方法 第6部分：生物毒性 Determination for ballast water of ships—Part 6 :Biological toxicity assay 2022 - 01 - 01发布 2022 - 07 - 01实施 中国太平洋学会 发布 全国团体标准信息平台 T/PSC 1.6 —2022 I 目次 前言 ................................ ................................ .............. II 1 范围 ................................ ................................ ................ 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ...... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ .......... 1 4 方法原理 ................................ ................................ ............ 1 5 试剂和材料 ................................ ................................ .......... 1 6 仪器和设备 ................................ ................................ .......... 2 7 样品检测 ................................ ................................ ............ 2 8 数据记录计算与处理 ................................ ................................ .. 3 9 毒性水平评价 ................................ ................................ ........ 4 10 质量控制 ................................ ................................ ........... 4 附录A （资料性） 压载水生物毒性样品信息及预处理记录 ................................ 5 附录B （资料性） 参比毒物生物毒性检测记录 ................................ .......... 6 附录C （资料性） 生物毒性检测结果记录 ................................ .............. 7 附录D （规范性） 压载水样品生物毒性风险等级分级 ................................ .... 8 参 考 文 献 ................................ ................................ ........... 9 全国团体标准信息平台 T/PSC 1.6 —2022 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是 T/PSC 1—2021《船舶压载水检测方法》的第 6部分。T/PSC 1—2021已经发布了以下部分： —— 船舶压载水检测方法 第1部分：大于等于 50 μm活体生物； —— 船舶压载水检测方法 第2部分：大于等于 10 μm且小于50 μm活体生物； —— 船舶压载水检测方法 第3部分：大肠埃希氏菌； —— 船舶压载水检测方法 第4部分：肠道球菌； —— 船舶压载水检测方法 第5部分：霍乱弧菌。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中国太平洋学会东海环境分会提出。 本文件由中国太平洋学会归口。 本文件起草单位：国家海洋局东海环境监测中心、上海海洋大学、国家海洋局东海标准计量中心。 本文件主要起草人：袁一鸣、张昊飞、何彦龙、王腾、邓邦平、季晓、葛春盈。 全国团体标准信息平台 T/PSC 1.6 —2022 1 船舶压载水检测方法 第6部分：生物毒性 1 范围 本文件规定了船舶压载水生物急性毒性的检测方法。 本文件适用于船舶压载水生物急性毒性的检测。 红色、棕色或黑色的水样，在不经稀释的情况下发光抑制率不小于 80%时，该水样不适用于本文件。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T 14914.2 海洋观测规范 第2部分：海滨观测 GB 17378.4 海洋监测规范 第4部分：海水分析 HJ 506 水质 溶解氧的测定 电化学探头法 IMO MEPC.300(72) ：2018 压载水管理系统认可规则（ Code for approval of ballast water management systems (BWMS CODE) ） IMO BWM.2/Circ.42 ：2015 压载水取样和分析试用指南（ G2导则）（ Guidance on ballast water sampling and analysis for trial use in accordance with the BWM Convention and Guidelines(G2) ） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 文件。 3.1 抑制率inhibition rate 水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后，发光细菌的发光量所降低的百分比，用 H表示。 3.2 半数抑制浓度 half inhibition concentration 水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后，发光细菌的发光量减少 50%的浓度。 注： 参比毒物或化合物浓度以 mg/L为单位来表征，环境水样以样品液的百分浓度为单位来表征。 4 方法原理 水样在一定的时间和条件下与发光细菌费歇尔 弧菌接触后，发光细菌的发光强度变化与水样中毒 性组分总浓度呈负相关关系，通过生物发光光度计测定水样与发光细菌接触 15min后的发光抑制率来表 征水样的急性毒性水平。 5 试剂和材料 5.1 小支费歇尔弧菌冻干粉，市售。 5.2 稀释液（ Diluent），2%氯化钠无毒溶液，市售。 5.3 七水硫酸锌（ ZnSO 4·7H2O），置于干燥器中 24h以上。 5.4 氯化钠（ NaCl）。 全国团体标准信息平台 T/PSC 1.6 —2022 2 5.5 氢氧化钠溶液（ 1 mol/L），将40 g氢氧化钠粉末用水定容到 1 L的容量瓶中。 5.6 盐酸溶液（ 1 mol/L），将86 mL浓度为36%的浓盐酸用蒸馏水定容到 1 L的容量瓶中。 5.7 硫酸锌贮备液（ 0.16 g/L ）。准确称取 0.016 g七水硫酸锌（ ZnSO 4·7H2O）（5.3）于50 mL烧杯 中，用少量稀释液（ 5.2）溶解后，全量转入 100 mL容量瓶中，用稀释液（ 5.2）定容至标线，混匀， 冷藏保存。 5.8 硫酸锌使用液。移取 1 mL硫酸锌贮备溶液（ 5.7），用稀释液（ 5.2）定容至 10 mL比色管，配制 浓度为16 mg/L 硫酸锌使用液；再移取 5 mL浓度为16 mg/L 的硫酸锌使用液，用稀释液定容至 10 mL 比色管，配制浓度为 8 mg/L的硫酸锌使用液；以此类推，逐级稀释配制成浓度为 4 mg/L、2 mg/L、1 mg/L的硫酸锌使用液。 6 仪器和设备 6.1 生物毒性快速检测仪。 6.2 测试管，玻璃，内 径约11.5 mm，高度约 50 mm，可标记为以下三种： a) 复苏管； b) 样品管； c) 反应管。 6.3 pH计，精确到 0.01。 6.4 盐度计，精确到 0.001。 6.5 浊度计，精确到 0.1 NTU。 6.6 溶解氧测量仪，精确到 0.1 mg/L。 6.7 移液器，精确到 100 μL、1 mL。 6.8 电子天平，精确到 0.001g，。 6.9 离心机。 6.10 聚四氟乙烯取样瓶，带盖。 6.11 本方法所用仪器设备均应经过计量检定校准，且在有效期内。 7 样品检测 7.1 样品采集 根据IMO MEPC.300(