SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1035—2011 代替SN/T1035—2002 进出口食品中产毒青霉属、 曲霉属及其毒素的检测方法 Determination of Penicillium chrysogenum Aspergillus and related toxin infoodstuff forimport and export 行业标准信息服务平台 2011-02-25发布 2011-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1035—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1035一2002《进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法》。 本标准与SN/T1035一2002相比，主要技术变化如下： 将中文名称改为《进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法》。 增加了附录B培养基与试剂。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国齐齐哈尔出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：刘伟、张宏伟、马旭、侯丽萍、张海英、蔡国瑞、贺艳、庞春贤、曲鹏。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T1035—2002。 行业标准信息服务平台 SN/T 1035—2011 进出口食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检测方法 1范围 本标准规定了食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检验方法。 本标准适用于食品中产毒青霉属、曲霉属及其毒素的检验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T1538（所有部分）培养基制备指南 3试样的制备和保存 3.1试样制备 从原始样品中取出部分有代表性的样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混匀。用四分法缩分出不 少于500g，作为试样。装入清洁容器内，加封并表明标记 3.2试样保存 将试样于一18℃以下冷冻保存。 在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 4 测定方法 4.1方法提要 以无菌操作称取有代表性的样品，然后进行微生物培养，按照GB/T4789.16中检索表进行镜检、 鉴定，对可疑的真菌进行产毒培养，用标准菌株检测培养液是否存在毒素，从而得到定性的结果。检验 流程参见附录A。 4.2材料和设备 4.2.1试管：直径17mm，长170mm。 4.2.2 吸管：1.0mL和10mL 4.2.3离心机：3000g。 4.2.4振荡器。 4.2.5培养皿：内径90mm。 4.2.6载玻片和盖玻片。 4.2.7U形玻璃棒。 SN/T 1035—2011 4.2.8定性滤纸。 4.2.9牛津杯：外径8.0mm±0.1mm，内径6.0mm±0.1mm，高10.0mm±0.1mm。 4.2.10毛细管。 4.2.11游标卡尺。 4.2.12显微镜。 4.2.13标准菌株：巨大芽孢杆菌（Bacillusmegatherium）。 4.2.14标准产毒真菌菌株：纯绿青霉（Penicilliumviridicatum）、桔青霉（Penicilliumcitrinum）、寄 生曲霉（AsperigillusParasiticus）杂色曲霉（Asperigillusversicolor）。 4.3培养基和试剂 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 4.3.1肉汤培养基：参见B.2。 4.3.2孟加拉红培养基：参见B.3。 4.3.3察氏培养基：参见B.4。 4.3.4产毒培养基：参见B.5。 4.3.5营养琼脂培养基：参见B.6。 4.3.620%甘油水溶液。 4.4细菌菌种培养和芽孢悬浮液的制备 4.4.1菌种培养 将装有菌种的安瓶上部消毒后敲碎，加入少量肉汤培养基，使其溶解并移至肉汤管中混匀，置于 37℃土1℃培养6h再转接至另一肉汤管中37℃土1℃培养18h。将培养物接种于营养琼脂斜面， 37℃士1℃培养1周，镜检，芽孢数达85%以上时便可制备芽孢混悬液。 4.4.2芽孢混悬液的制备 用适量灭菌生理盐水冲洗菌苔，然后将该菌液移至离心管中，充分摇匀后于3000g离心30min，弃 去上清液，再加入同样量的灭菌生理盐水，摇匀后65℃水浴中加热30min，然后于1000g离心5min， 世息服务平 取上清液并转人灭菌试管中，即为芽孢悬浮液，稀释并测定浓度，置于冰箱中4℃保存。 4.5检验步骤 4.5.1接种培养 4.5.1.1样品制备 精确称取25g（或吸取25mL）有代表性的样品，放人装有225mL无菌水的三角瓶或广口瓶中，振 荡30min，然后10倍递增稀释至所需要的浓度。 4.5.1.2分离培养 用灭菌吸管吸取1mL样品液放入平血内，加人15mL～20mL溶化并冷却到55℃土1℃的孟加拉 红琼脂充分混匀，置25℃~28℃培养箱中培养3d~5d。 4.5.1.3选择培养（点种法） 挑取孟加拉红培养基上生长的可疑菌落转接于察氏培养基上（从一个菌落挑取分别接种一点或三 2