ICS 67.050 Z 备案号： 全联农业产业商会标 准 T/CAICC-03-2021 蔬菜水果中毒死蜱的快速检测 胶体金免疫层析法 Rapid detection of c hlorpyrifos in vegetables and fruits — Colloidal gold immunochromatography 2021-12-31发布 2022-01-01实施 全联农业产业商会 发布 全国团体标准信息平台 I 目 次 前 言................................ ................................ ................................ ................................ ............................ II 1 范围 ................................ ................................ ................................ ................................ ............................... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ................................ ................................ ........... 1 3 原理 ................................ ................................ ................................ ................................ ............................... 1 4 试剂与材料 ................................ ................................ ................................ ................................ ................... 1 5 仪器与设备 ................................ ................................ ................................ ................................ ................... 2 6 分析步骤 ................................ ................................ ................................ ................................ ....................... 2 7 结果判定 ................................ ................................ ................................ ................................ ....................... 2 8 结果确认 ................................ ................................ ................................ ................................ ....................... 3 9 性能指标 ................................ ................................ ................................ ................................ ....................... 3 10 其他 ................................ ................................ ................................ ................................ ............................. 4 附录 A（规范性附录） 快速检测方法性能指标计算 ................................ ................................ ................. 5 全国团体标准信息平台 II 前 言 本文件按照 GB/T1.1—2020《标准化工作导则第 1部分：标准化文件的结构和起草规则 》 的规定起草。 本文件由 全联农业产业商会提出。 本文件起草单位： 全联农业产业商会、北京勤邦生物技术有限公司、西北大学食品科学 与工程学院、江西省农产品质量安全检测中心。 本文件主要起草人： 郭树、吴小胜、王春花、惠光朋、魏力杰、董硕、牛晨、杨琳芬、 吴明庆。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 1 蔬菜水果中毒死蜱的快速检测 胶体金免疫层析法 1 范围 本方法规定了蔬菜水果中毒死蜱的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于抱子甘蓝、豇豆、韭菜、苹果等蔬菜水果中毒死蜱的快速测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括 所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 食药监办科 [2017]43号食品快速检测方法评价技术规范 3 原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理。 样品中的 毒死蜱经提取后 与胶体金标记的特异性抗 体结合，抑制 了抗体和试纸条中检测线（ T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的 变化。通过检测线与 质控线（ C线）颜色深浅比较，对样品中 毒死蜱进行定性判定。 4 试剂与材料 4.1 试剂 除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验室用水应符合 GB/T 6682 中二级水的要求。 4.1.1 甲醇（CH 3OH）。 4.1.2 提取液： 由胶体金 免疫层析试纸条 配套提供，或按照其说明书配制 。 4.1.3 参考物质：毒死蜱参考物质的中文名称、英文名称、 CAS登录号、分子式、相对分 子质量见表 1，纯度≥98%。 表1 毒死蜱参考物质的中文名称、英文名称、 CAS登录号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 毒死蜱 Chlorpyrifos 2921 -88-2 C9H11Cl3NO 3PS 350.6 注：或等同可溯源物质。 4.2 溶液配制 4.2.1 毒死蜱标准储备液（ 100 μg/mL）：准确称取毒死蜱参考物质（ 4.1.3）1 mg，置于 10 mL容量瓶中，用甲醇（ 4.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 100 μg/mL的毒死 蜱标准储备液。 4℃避光保存，有效期 6个月。 全国团体标准信息平台 2 4.2.2 毒死蜱标准工作液（ 1 μg/mL）：精密移取 毒死蜱标准储备液（100 μg/mL）（4.2.1） 0.1 mL，置于 10 mL容量瓶中，用 甲醇（ 4.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为 1 μg/mL的 毒死蜱标准工作液。临用新配 。 4.3 材料 毒死蜱胶体金免疫层析试纸条，适用基质为蔬菜水果。需在阴凉、干燥、避光条件下保 存。 4.3.1 金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。 4.3.2 检测卡。 5 仪器与设备 5.1 电子天平：感量为 0.01 g。 5.2 移液器： 10 μL~200 μL 、100 μL~1000 μL 。 6 分析步骤 6.1 试样制备 选取新鲜样品，擦去表面泥土，剪成 1 cm左右见方碎片，备用。 6.2 试样提取 称取 2 g试样 （精确至 0.05 g） 放入离心管中， 加入 6 mL提取液 （ 4.1.2） ， 上下振荡 1 min， 静置 5 min，上清液即为样品待测液。 6.3 测定步骤 吸取 100 μL样品待测液于金标微孔 （ 4.3.1） 中， 抽吸 2~3次使混合均匀， 室温温育 3 min， 吸取 100 μL混匀液加入检测卡的加样孔中，室温反应 10 min后进行结果判定。 注1：测定步骤建议按照 试纸条说明书。 注