SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0869—2017 代替SN/T0869—2000 出口饮料中抗坏血酸的测定 Determination of ascorbic acid in beverage for export 行业标准信息服务平台 2017-05-12发布 2017-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0869—2017 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T0869—2000《进出口饮料中维生素C的测定方法》。 本标准与SN/T0869—2000相比，主要变化如下： 修改了标准名称； 一增加了高效液相色谱法作为本标准的第一法；原标准的荧光法作为第二法 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：樊祥、王传现、陈迪、张润何、张弛、张秀芹、倪昕路、韩丽、王敏、邓晓军 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T0869—2000。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 0869—2017 出口饮料中抗坏血酸的测定 1范围 本标准规定了高效液相色谱法、荧光法测定出口饮料中抗坏血酸的测定方法 本标准第一法适用于出口饮料中的L（十）-抗坏血酸总量和D（十）-抗坏血酸的测定。第二法适用 于出口饮料中L（十）-抗坏血酸总量的测定。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗坏血酸ascorbicacid 一种含有6个碳原子的酸性多羟基化合物，分L型和D型。 3.2 L（+)-抗坏血酸 L(+) ascorbic acid 左式右旋光抗坏血酸。具有强还原性，对人体具有生物活性。 3.3 D（+)-抗坏血酸 D(+)ascorbic acid 又称异抗坏血酸。具有强还原性，但对人体基本无生物活性。 3.4 L(+)-脱氢抗坏血酸 Dehydro-L(+) ascorbic acid L（+）-抗坏血酸极易被氧化为L（十）-脱氢抗坏血酸，L（十）-脱氢抗坏血酸亦可被还原为L（十）-抗 坏血酸。 3.5 L（+)-抗坏血酸总量totalascorbicacid 将试样中L（+）-脱氢抗坏血酸还原成L（十）-抗坏血酸后测得的L（十）-抗坏血酸总量。 第一法 高效液相色谱法 4方法提要 试样中的抗坏血酸用偏磷酸溶解超声提取后，L（十）-脱氢抗坏血酸经L-半胱氨酸溶液进行还原 后，以离子对试剂为流动相，经反相色谱柱分离液相色谱紫外检测器（波长245nm）测定L（十）-抗坏血 1 SN/T0869—2017 酸总量和D（十）-抗坏血酸。以色谱峰的保留时间定性，外标法定量 5试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 5.1偏磷酸（HPO，）：纯度≥38%。 5.2 磷酸三钠(NaPO412H,O)。 5.3磷酸二氢钾。 5.4磷酸：85%。 5.5L-半胱氨酸（C.H,NO,S)：优级纯。 5.6十六烷基三甲基溴化铵（C1gH42BrN)：色谱纯。 5.7甲醇：色谱纯。 5.8偏磷酸溶液（200g/L）：称取200g（精确至0.1g）偏磷酸（5.1)，溶于水并稀释至1L，此溶液保存于 4℃的环境下可保存一个月。 5.9 偏磷酸溶液（20g/L）：吸取50mL200g/L偏磷酸溶液，用水稀释至500mL 5.10 磷酸三钠溶液（100g/L）：称取100g（精确至0.1g）磷酸三钠溶于水并稀释至1L。 5.11L-半胱氨酸溶液（40g/L）：称取20gL-半胱氨酸，溶于水并稀释至500mL，临用时配制。 5.12L（+）-抗坏血酸标准品（CAS号：50-81-7）：纯度≥99%。 5.13D（+）-抗坏血酸标准品（CAS号：89-65-6）：纯度≥99%。 5.14L（+）-抗坏血酸标准储备溶液（1.000mg/mL）：准确称取L（+）-抗坏血酸标准品0.01g（精确至 0.01mg），用20g/L的偏磷酸溶液定容至10mL，该储备液在2℃～8℃避光条件下可保存一周。 5.15D（+）-抗坏血酸标准储备溶液（1.000mg/mL）：准确称取D（+）-抗坏血酸标准品0.01g（精确至 0.01mg），用20g/L的偏磷酸溶液定容至10mL，该储备液在2℃～8℃避光条件下可保存一周。 5.16抗坏血酸混合标准系列工作液：分别吸取L（+）-抗坏血酸和D（十）-抗坏血酸标准储备液0mL， 0.05mL，0.50mL，1.0mL，2.5mL，5.0mL，用20g/L的偏磷酸溶液定容至100mL。标准系列工作液 中L（+）-抗坏血酸和D（+）-抗坏血酸的浓度分别为0μg/mL、0.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、 25.0μg/mL、50.0μg/mL，避光保存，保存时间为24h。 6仪器和设备 6.1 信息服务平台 高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器或紫外检测器 6.2pH计：精度为0.01。 6.3天平：感量为0.1g、1mg、0.01mg 6.4 超声波清洗器。 6.5离心机：转速≥4000r/min。 6.6均质机。 6.7滤膜：0.45μm水相膜。 6.8 振荡器。 7 试样制备与保存 7.1 试样制备 固体或半固体样品用组织捣碎机粉碎混匀，液体样品混合均匀，混匀后样品置于密闭容器中，待称