ICS 11.120.01 C 23 团体标准 T/CACM 1326.49—2019 海人树种子超低温保存技术规程 Technical code of practice for cryopreservation of Suriana maritima L. seeds 2019 - 10 - 17发布 2019 - 10 - 17实施 中 华 中 医 药 学 会 发布 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.49—2019 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 种子的采收及选择 ................................ ................................ .. 2 4.1 种子采收 ................................ ................................ ...... 2 4.2 种子选择 ................................ ................................ ...... 2 5 种子前处理 ................................ ................................ ........ 2 5.1 活力 ................................ ................................ .......... 2 5.2 含水量范围 ................................ ................................ .... 2 6 种子保存量 ................................ ................................ ........ 3 7 种子冷冻方式 ................................ ................................ ...... 3 8 恢复培养 ................................ ................................ .......... 3 8.1 种子解冻处理 ................................ ................................ .. 3 8.2 冻后种子活力检测 ................................ .............................. 3 8.3 萌芽成苗 ................................ ................................ ...... 3 附录A（规范性附录） BTB的配制和保存方法 及种子萌发方法 ................................ 4 参考文献 ................................ ................................ ............. 5 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.49—2019 II 前 言 本标准是药用植物顽拗性种子超低温保存系列标准之一，该系列标准结构和名称如下： —— T/CACM 1326.1 药用植物顽拗性种子超低温保存技术通 则； —— T/CACM 1326.2 白木香种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.3 降香种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.4 益智种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.5 高良姜种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.6 朱砂根种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.7 草豆蔻种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.8 化州柚种子超低温保存技术规程； —— T/CACM 1326.9 樟种子超低温保 存技术规程； —— T/CACM 1326.10 两面针种子超低温保存技术规程； ………… 。 本标准按照 GB/T 1.1 —2009《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国医学科学院药用植物研究所海南分所提出 。 本标准由 中华中医药学会归口。 本标准起草单位： 中国医学科学院药用植物研究所海南分所、 中国医学科学院药用植物研究所。 本标准主要起草人： 曾琳，魏建和，郑希龙，李榕涛，王秋玲，何明军，金钺，顾雅坤，谭红琼， 符丽。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.49—2019 1 海人树种子超低温保存技术规程 1 范围 本标准规定了海人树 （Suriana maritima L.）种子超低温保存过程中的术语和定义、种子的选择、 种子前处理、种子保存量、种子冷冻方式、恢复培养等内容。 本标准适用于海人树种子的超低温长期贮藏。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定 GB/T 3543.7 农作物种子检验规程 其他项目检验 3 术语和定义 下列术语和定义适 用于本文件。 3.1 海人树 Suriana maritima L. 为海人树科（ Surianaceae ）的单种属海人树属（ Suriana Linn.）常绿灌木或小乔木，曾归于商 陆科（Phytolaccaceae ）和苦木科（ Simaroubaceae ），在我国仅分布于西沙群岛的少数岛屿边缘的沙 地或石缝中，是急需保护的重要的海滨植物，对盐碱、干旱等极端环境有很好的适应性，是研究植物 适应珊瑚砂环境的重要物种，在海岛植被恢复中有重要应用价值。根和树皮入药，可治疗皮肤溃疡与 抑制癌细胞活性。收载于《世界药用植物速查辞典（ 2015）》。 3.2 海人树果实 Suriana maritima L. fruits 核果近球形，被毛，长约 3.5 mm，具宿存花柱 。 3.3 海人树种子 Suriana maritima L. seeds 海人树的播种材料为完整种子，需置于干燥通风处 4 至 5 天进行后熟处理，贮藏特性判断为顽 拗性种子。海人树种子褐色，近球形，有被毛 。 3.4 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.49—2019 2 种子超低温保存 seed of cryopreservation 将经过前处理的海人树种子置于液氮（ -196 ℃）中保存 。 4 种子的采收及选择 4.1 种子采收 花果期在夏秋季 ，当果实呈黄色时即可采收，去除果皮，取出种子 。 4.2 种子选择 挑选发育饱满、均匀、健康的种子，置于 4 ℃ 冰箱中保存备用（存放时间不超过 2 个月）。 5 种子前处理 5.1 活力 5.1.1 检测 海人树种子活力以种子生活力为判别标准。 按照《植物生理学实验指导》中的溴麝香草酚蓝（ BTB） 法检测海人树种子生活力。 待测种子在 30 ℃～35 ℃ 温水中浸种 2 h， 随后取吸胀种子 50 粒， 整齐地埋于备好的 1.5％ BTB 琼脂凝胶 中，注意要将胚埋入凝胶中。将培养皿置于 35 ℃ 温箱中 5 h 后观察结果。 BTB 的配制和保存方法见附录 A。 5.1.2 鉴定及要求 在光下用放大镜对染色结果进行观察鉴定。凡种胚周围出现黄色晕圈的种子为有活力的种子，否 则为无活力的种子。 待保存的海人树种子生活力应 ≥90％。 5.1.3 计算 生活力按照公式（ 1）进行计算： 式中： A——生活力； y——有活力的种子数； x——总的种子数。 5.2 含水量范围