SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0751—2010 代替SN/T0751—1999 进出口食品中嗜水气单胞菌检验方法 Determination of Aeromonas hydrophila in foodsfor import and expor 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0751—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T0751一1999《出口食品中嗜水气单细胞菌检验方法》。 本标准与SN/T0751一1999相比，主要技术变化如下： 标准要素进行了调整，增加了“规范性引用文件”“术语和定义”和“要求”，删除了“抽样和制 样”相关内容； 检测方法的检测试验依据GB/T18652一2002《致病性嗜水气单胞菌检验方法》和《伯杰氏系 统细菌学手册》（1994年第九版）作了修改。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：王静、张琳、孙肖红、杨宇、胡孔新、张顺合、张乐。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T0751—1999。 行业标准信息服务平台 I SN/T 0751—2010 进出口食品中嗜水气单胞菌检验方法 1范围 本标准规定了进出口食品中嗜水气单胞菌的检验方法。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18652致病性嗜水气单胞菌检验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 嗜水气单胞菌Aeromonashydrophila 嗜水气单胞菌为细胞短杆状，两端圆形，至球菌状，直径1.0um～4.4μm；单个、成队或成链；以极 生鞭毛运动，一般单鞭毛；革兰氏阴性，氧化酶阳性。嗜水气单胞菌能导致鱼、鳖、牛蛙及蚌等水生动物 的败血症及局部感染，人类也可因嗜水气单胞菌感染而发生腹泻、食物中毒、继发感染。 3.2 水产品seafood 淡水或海水中的鱼类、甲壳类、软体动物类、藻类和其他的水生生物。 准信息服务 3.3 水产加工品fisheryproduct 以水产品为主要原料加工制成的食品或其他产品。 4检样要求 4.1微生物检验用的样品保存时，应注意保持样品处于无污染的环境中，要低温保存，冻品保持冷冻状 态，鲜活品应尽量保持样品的原状态（7℃～10℃），从抽样至送到实验室的时间不能超过48h。 4.2在制样的操作过程中，应防止样品受到污染。 5设备和材料 5.1电子天平：感量0.1g。 5.2均质器或乳钵。 5.3生化培养箱：28℃±1℃，36℃±1℃。 5.4低倍双目生物显微镜。 SN/T 0751—2010 5.5灭菌广口瓶：500mL。 5.6灭菌三角烧瓶：250mL，500mL。 5.7灭菌吸管：1mL，10mL。 5.8灭菌平皿:15mm，90mm。 5.9灭菌小试管：95mm×5cm。 5.10接种环：直径3mm。 61 培养基和试剂 6.1碱性蛋白陈水（APW）：见附录A第A.1章。 6.2氨苄青霉素麦康凯琼脂：见附录A第A.2章。 6.3革兰氏染色液：见附录A第A.3章。 6.4氧化酶试剂：见附录A第A.4章。 6.5粘丝试验试剂：见附录A第A.5章。 6.6[ 嗜盐性试验试剂：见附录A第A.6章。 6.7 AHM鉴别培养基：见附录A第A.7章。 6.81 Kovacs试剂：见附录A第A.8章。 6.9( GCF试管：见附录A第A.9章。 6.10 赖氨酸脱羧酶肉汤：见附录A第A.10章。 6.11 氨酸脱羧酶培养基：见附录A第A.11章。 6. 12 明胶培养基：见附录A第A.12章。 6.13 糖发酵试验管：见附录A第A.13章。 行业标准信 7检验步骤 7.1检测流程 检测程序见附录B图B.1。 7.2增菌 迅速振摇，充分混匀。 7.2.2对于固体食品，无菌操作取25g样品加入装有225mL碱性蛋白陈水中，均质，28℃士1℃增菌 培养，约在6h8h有轻度混浊时，终止培养。 7.3分离培养 用接种环接取一环增菌培养液划线接种于氨芊青霉素麦康凯琼脂，于28℃士1℃培养18h～24h。 嗜水气单胞菌在氨苄青霉素麦康凯琼脂培养基上典型菌落为边缘整齐、光滑、微凸、无色或淡黄色的圆 形菌落。挑取3个～5个革兰氏染色为阴性短杆菌的菌落，接种营养琼脂平板进行纯化培养。 7.4嗜水气单胞菌的初筛试验 7.4.1氧化酶试验 用接种环挑取琼脂平板上单个菌落少许，涂布于无菌滤纸片上，滴加氧化酶试剂，10s内观察细菌 2