SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0669—2011 代替SN0669—1997 出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测方法 杯碟法 Determination of gentamycin residues in meats and meat products for export- Cylinderplatemethod 行业标准信息服务平台 2011-02-25发布 2011-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0669—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准与SN0669—1997相比，主要技术变化如下： 将原标准由定量检测方法变更为定性检测方法； 将原标准名称《出口肉及肉制品中庆大霉素残留量检验方法杯碟法》修订为《出口肉及肉制 品中庆大霉素残留检测方法杯碟法》； 重新核实了原标准的检测低限，由0.1mg/kg修订为0.05mg/kg。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中国海洋大学。 本标准主要起草人：刘云国、林洪、刘帅帅、贾俊涛、雷质文、林黎明、李正义、马维兴、唐静、张健、 房保海、祝素珍、赵丽青、姜英辉、马云、韩青、李明哲、颜显辉。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN0669—1997。 行业标准信息服务平台 I SN/T0669—2011 出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测方法 杯碟法 1范围 本标规定了出口肉及肉制品中庆天霉素残留检测的杯碟方法。 本标准适用于出口鸡肉中庆大霉素残留的筛选检测，阳性结果应用其他方法进行确认。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3试样制备与保存 3.1试样制备 将代表性样品中的可食部分放人绞碎机中绞碎。充分混匀，用四分法缩分至不少于500g，作为试 样。装人清洁容器内，加封后，标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含 行业标准信息 量的变化。 3.2试样保存 将试样于一18℃以下冷冻保存。 4原理 用磷酸盐缓冲液（pH8.0士0.1)提取试样中的庆大霉素残留物，离心后取上清液作为样液，以表皮 5仪器和设备 5.1培养皿：内径90mm、底部平整光滑的玻璃皿或塑料皿，配陶瓦盖，或玻璃盖内嵌人干燥的滤纸 5.2牛津杯：不锈钢圆筒，外径8.0mm士0.1mm，内径6.0mm士0.1mm，高10.0mm士0.1mm。 5.3克氏瓶：800mL。 5.4游标卡尺：测量范围0mm~200mm，精度0.02mm。 5.5均质器：转速不低于8000r/min。 5.6离心机：转速不低于4000r/min。 5.7恒温水浴锅：0℃~100℃，精度±1℃。 5.8恒温培养箱：36℃士1℃，搁板应保持水平。 1 SN/T 0669—2011 5.9高压灭菌锅。 5.10半对数坐标纸。 5.11 旋转蒸发器。 5.12可调移动器：10μL~100μL，100μL～1000μL。 6试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水为蒸馏水、去离子水，试验用水应符合GB/T6682 的规定。 6.1试验菌种 表皮葡萄球菌（Staphylococcusepidermidis），菌号CMCC12228。 6.2培养基 6.2.1增菌用液体培养及见A1。 6.2.2保存及传代用液体培养及见A.2。 6.2.3检定用液体培养及见A.3。 6.3 硫酸庆大霉素标准品 已知纯度标准品，密封避光，防潮，4℃保存。 6.4 磷酸盐缓冲液（pH8.0土0.1) 称取13.3g磷酸二氢钾及6.2g氢氧化钾，溶解于1000mL水中，于121℃灭菌15min。 6.5庆大霉素标准储备液 准确称取适量的硫酸庆大霉素标准品，用磷酸盐缓冲液配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液 保存于4℃冰箱中，可使用1个月。 6.6庆大霉素标准工作液 思服务平台 取一定量庆大霉素标准储备液，用磷酸盐缓冲液稀释成浓度为0.05ug/mL的庆大霉素标准工作 液，应当日配制。 6.7生理盐水 称取8.5g氯化钠，溶解于1000mL水中，分装后，于121℃灭菌15min 7检测方法 7.1样液制备 称取10g试样，置于均质杯中，加人10mL磷酸盐缓冲液，8000r/min均质3min后，室温放置 60min，移人离心管中4000r/min离心15min，取上清液于作为待测样液。 7.2菌悬液制备 将试验菌种接种于装有培养基I的试管中，于36℃土1℃培养24h士1h。移1mL菌液于盛有适 2