SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0172—2010 代替SN/T0172—1992 进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法 Determination of Staphylococcus aureus in foods for import and export 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0172—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN0172一1992《出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》。 本标准与SN0172一1992相比，主要技术变化如下： 将原标准名称《出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》修订为《进出口食品中金黄色葡萄球菌 检验方法》。 将原标准的范围修订为：“本标准适用于进出口食品中金黄色葡萄球菌检验”； 及时间。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：赵宏、高旗利、雷质文、张海滨、张宏伟、魏亚东、赵良娟、侯丽萍、张曼、李正义、 唐静、张健、马维兴。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN0172—1992。 行业标准信息服务平台 I SN/T 0172—2010 进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法 1范围 本标准规定了进出口食品中金黄色葡萄球菌的检验方法。 本标准适用于进出口食品中金黄色葡萄球菌的检验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南 3检验方法 3.1培养基和试剂 3.1.1普通肉汤培养基：见附录A第A.1章。 3. 1.2 胰蛋白陈大豆肉汤：见附录A第A,2章。 3.1.3Baird-Parker培养基（BP）：见附录A第A,3章。 3.1.4甲苯胺蓝-DNA琼脂：见附录A第A，4章。 3. 1.5 生理盐水：见附录A第A.5章。 3. 1.6 3.2设备与材料 3.2.1供常规平板计数用的基本设备与材料。 3.2.2L形玻璃棒。 3.2.3 pH计。 3.2.4天平：精确至0.1g。 3.2.5均质器或拍击式均质器。 3.2.6无菌均质杯或均质袋（NascoWHIRL-PAK24OZ./710mL或相当者）。 3.3检样制备 3.3.1固体或半固体食品以无菌操作称取25g样品，放人装有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质杯 （无菌均质袋）内，于8000r/min均质1min～2min或用拍打式均质器以每秒6次~9次挤压、拍击 1min，制成1：10样品匀液。 预置适当数量的玻璃珠），经充分振摇制成1：10样品匀液。 3.3.3供计数检验时，可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。 1 SN/T 0172—2010 3.4操作步骤 3.4.1最可能数（MPN）测定法 3.4.1.1适用于检测认为带有大量竞争菌的食品及其原料和含少量金黄色葡萄球菌的食品。 陈大豆肉汤。样品的最高稀释度应达到能获得阴性终点，置36℃土1℃培养48h。 36℃1℃培养45h48h。 通肉汤培养基中，置36℃土1℃培养20h～24h。 3.4.1.5取肉汤培养物0.3mL同0.5mL凝固酶试验兔血浆于8mmX100mm试管内充分混合，置 36℃士1℃培养，定时观察是否有凝块形成，至少观察6h，以内容物完全凝固，使试管倒置或倾斜时不 流动者为阳性。试验中需同时做已知阳性和阴性对照。对典型或可疑结果进行革兰氏染色，镜检和其 他辅助试验[如：耐热核酸酶试验（参见附录C）加以证实。 3.4.2平板表面计数法 板上（如：0.4mL0.3mL0.3mL)。 3.4.2.3以L形玻璃棒将接种物涂布于琼脂表面，避免涂到平板边缘，将平板正置直至接种物被培养 基吸收，将平板翻转，36℃士1℃培养45h~48h。 3.4.2.4挑选有20个～200个菌落的平板进行计数。如果有数种菌落皆类似金黄色葡萄球菌，则分 落数大于200，其中有些菌落具典型金黄色葡萄球菌的外观，同时在其高倍稀释度未出现典型菌落者， 亦可用这些平板进行金黄色葡萄球菌计数但不能把非典型菌落计算在内。 3.4.2.5从可计数的各类型菌落中至少各选取2个以上典型或可疑菌落进行凝固酶试验。 3.4.3定性检测法 2 h。 3.4.3.2再加入20mL含20%氯化钠的单料胰蛋白大豆肉汤，36℃±1℃培养24h土2h。 3.4.3.3取上述培养物0.2mL，分别涂布于2个表面干燥的BP琼脂平板上，36℃±1℃培养46h土 2 h。 3.4.3.4从每个平板上至少挑取2个以上典型或可疑金黄色葡萄球菌菌落进行凝固酶试验。 3.5结果的计算与报告 3.5.1最可能数（MPN）法的估算与报告 3.5.1.1计算每个稀释样液得到的阳性反应管数。 3.5.1.2若一管次培养物中所挑选的典型菌落中有一个为凝固酶阳性，则该供试培养物的管应视为 阳性。 3.5.1.3根据所确认的阳性管数，用最可能数（MPN）表（见附录D）估算并报告每克或每毫升试样的 金黄色葡萄球菌最可能数。以MPN/g或MPN/mL报告。 2