ICS65.020 SSCB15T/WFSC 团 体 标 准 T/WFSC011-2022 一种烟粉虱生物型快速检测技术规程 AtechnicalspecificationforrapiddetectionofBemisiatabacibiotypes 2022-03-11发布 2022-03-21实施 潍坊市蔬菜协会发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/WFSC011-2022 I目  次 目 次......................................................................................................................................................................I 前言.....................................................................................................................................................................II 1范围.....................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件.................................................................................................................................................1 3术语和定义.........................................................................................................................................................1 4原理.....................................................................................................................................................................1 5仪器设备及试剂.................................................................................................................................................2 5.1仪器设备.....................................................................................................................................................2 5.2试剂.............................................................................................................................................................2 5.3溶液配制.....................................................................................................................................................2 6方法步骤.............................................................................................................................................................2 6.1采样.............................................................................................................................................................2 6.2烟粉虱总DNA的提取..............................................................................................................................2 6.3mtCOI基因片段PCR扩增.......................................................................................................................2 6.4限制性内切酶.............................................................................................................................................3 6.5电泳检测.....................................................................................................................................................3 6.6结果判定.....................................................................................................................................................3 附录A.............................................................................................................................................................5 附录B.............................................................................................................................................................6 全国团体标准信息平台 T/WFSC011-2022 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规则起 草。 本文件由件由潍坊市蔬菜协会提出、归口并组织实施。 本文件起草单位：中国农业科学院国家南繁研究院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、三亚市热带 农业科学院、潍坊学院、山东省寿光蔬菜产业集团有限公司、潍坊科技学院、全国蔬菜质量标准中心。 本文件主要起草人：谢文、吴明月、国家进、梁鹏、张友军、王少丽、赵静、杨鑫、林桂玉、田素 波、王冠杰、亓烨、胡永军、辛晓菲、魏宏、王鲲霆、吕金浮、李金堂、丁俊洋、代惠洁、马晓梅、夏 海波。 全国团体标准信息平台 T/WFSC011-2022 1一种烟粉虱生物型快速检测技术规程 1范围 本文件规定了烟粉虱的总RNA提取、mtCOI基因片段PCR扩增、限制性内切酶及酶切条件、电泳检测 及结果判定的方法和操作规程。 本文件适用于MED、MEAM1、Asia1、AsiaⅡ1、AsiaⅡ6、AsiaⅡ7等烟粉虱的生物型鉴定。 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 烟粉虱Bemisiatabaci 烟粉虱隶属半翅目粉虱科小粉虱属，是一种入侵性、破坏性极强的世界性农业害虫。在我国烟粉虱 生物型种类超过10种，其中MEAM1和MED两种烟粉虱危害最重。MEAM1起源于中东和小亚细亚地区的B型烟 粉虱，称为“中东-小亚细亚1”隐种；MED起源于地中海北非地区，称为“地中”隐种；AsiaI、Asia Ⅱ6、AsiaⅡ7和AsiaⅡ1均为亚洲土著烟粉虱。 3.2 生物型Biotype 生物型是指基因型相同的个体总称，即纯系或无性繁殖系。在种群内或种群间表现有不同生理生态 特性的