SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 01222011 代替SN0122—1992 进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验 方法 液相色谱-柱后衍生荧光检测法 Determination of carbaryl residues in meat and meat products for import and export-HPLC-fluoresce detector with post column derivation 行业标准信息服务平台 2011-02-25发布 2011-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0122—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN0122一1992《出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验方法》。 本标准与SN0122一1992相比，主要技术变化如下： 样品净化方法采用全自动凝胶渗透色谱净化方法替代原有的液液分配法； 测定采用柱后衍生液相色谱-荧光检测法。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：葛宝坤、赵孔祥、陈其勇、陈旭艳。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN0122—1992。 行业标准信息服务平台 SN/T 0122—2011 进出口肉及肉制品中甲萘威残留量检验 方法液相色谱-柱后衍生荧光检测法 1范围 本标准规定了进出口肉及肉制品中甲茶威残留量的液相色谱-柱后衍生荧光检测法。 本标准适用于进出口牛肉、鸡肉、虾肉、鱼肉及火腿罐头中甲萘威残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3制样 3.1肉 将所取全部样品，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装入清洁容器内，密封并标 明标记。 3.2罐头 将所取全部样品整罐倒出，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装人清洁容器密 标准信： 封并标明标记。 4试样保存 服务平 试样应于一18℃以下保存。在抽样和制样的操作中，应防止样品受到污染或发生含量的变化，以 保证实验样品能代表总体样本。 5原理 用丙酮-石油醚混合溶液提取样品中的甲萘威残留物，经凝胶层析柱净化后，浓缩，高效液相色谱分 离，经柱后衍生后，用荧光检测器检测，外标法定量 6试剂和材料 本标准所用试剂和水在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂，有机试剂为色谱纯和GB/T6682 中规定的三级水。 6.1乙腈。 6.2乙酸乙酯。 1 SN/T 0122—2011 6.3环已烷。 6.4丙酮。 6.5石油醚：沸程30℃~60℃。 6.6无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，于密封瓶中备用。 6.7氯化钠。 6.8柱后衍生试剂。 6.8.1氢氧化钠溶液（0.2%，质量浓度）。 6.8.2邻苯二甲醛（O-Phthaladehyde，OPA）。 6.8.3邻苯二甲醛稀释液：硼砂溶液（0.4%，质量浓度）。 6.8.4巯基乙醇（Thiofluor)。 6.8.5邻苯二甲醛试液的配制：溶剂储罐中注人945mLOPA稀释剂，用情性气体（氮气）吹扫至少 10min，100mgOPA固体溶解于约10mL的色谱纯甲醇中，将OPA溶液加人除氧的OPA稀释剂中， 溶解2g疏基乙醇固体于5mLOPA稀释剂中，加人到储罐中，盖上瓶盖，打开气流，再不断的吹扫几分 钟，关闭排气阀，轻轻地搅动溶剂以使其完全混合。 6.9乙酸乙酯-环己烷混合溶液（1十1，体积比）。 6.100.45um尼龙滤膜。 6.11甲茶威：分子式C12HiNO2，CAS编号63-25-2，纯度大于99.5%。 6个月。 6.13甲萘威标准工作液：取一定量的标准储备液，用乙睛稀释至适当浓度，4℃冰箱保存，有效期为 1 周。 7仪器和设备 7.1液相色谱仪：配有荧光检测器和柱后衍生单元。 7.2全自动凝胶色谱仪（配有馏分收集浓缩器）。 7.3旋转蒸发装置。 7.4氮吹仪。 7.5组织匀浆机。 7.6振荡器。 83 分析步骤 8.1提取及净化 8.1.1样品的提取 称取试样20g（精确到0.01g），于100mL具塞三角瓶中，加水6mL（视样品水分含量加水使总水 量约20g，肉通常在70%左右，加水6mL）加40mL丙酮，匀浆1min，加氯化钠6g，充分摇匀，再加 30mL石油醚，振摇30min。取35mL有机层上清液，经无水硫酸钠滤于旋转蒸发瓶中，浓缩至约 1mL，加2mL乙酸乙酯-环已烷（6.9）溶液再浓缩，如此重复3次。乙酸乙酯-环已烷（6.9）定容为 5mL，0.45um滤膜过滤，待净化。 8.1.2样品的凝胶色谱（GPC)净化 8.1.2.1凝胶色谱净化条件 8.1.2.1.1净化柱：400mmX30mm,BioBeadsS-X3，或相当者。 2