! 7 ,     江苏省市场监督管理局 发　布 中 国 标 准 出 版 社 出　版淡水大型底栖无脊椎动物 监测技术规范 Technical specification for freshwater benthic macroinvertebrate monitoring 2024 -07-08 发布 2024 -08-08 实施CCS Z 12 DB32/T 4815 —2024ICS 13.060.70DB32/T 4815 —2024 前言…………………………………………………………………………………………………………… Ⅲ 1 范围………………………………………………………………………………………………………… 1 2 规范性引用文件 …………………………………………………………………………………………… 1 3 术语和定义 ………………………………………………………………………………………………… 1 4 试剂和材料 ………………………………………………………………………………………………… 2 5 仪器和设备 ………………………………………………………………………………………………… 2 6 监测步骤 …………………………………………………………………………………………………… 3 7 质量保证和质量控制 ……………………………………………………………………………………… 9 附录 A （规范性）采样器及其适用条件和使用方法 ……………………………………………………… 11 附录 B （资料性）记录表…………………………………………………………………………………… 17 附录 C （规范性）分样挑拣方法 …………………………………………………………………………… 22 附录 D （规范性）物种分类鉴定基本要求 ………………………………………………………………… 23目 　次 ⅠDB32/T 4815 —2024 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则　第 1部分：标准化文件的结构和起草规则 》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由江苏省生态环境厅提出并归口 。 本文件起草单位 ：江苏省常州环境监测中心 、江苏省环境监测中心 。 本文件主要起草人 ：张翔、沈伟、陈桥、潘晨、吕学研、蔡琨、徐东炯、张咏、李继影、沈丽娟、叶晟、 陆慧慧、张奇磊、张燕波。 ⅢDB32/T 4815 —2024 淡水大型底栖无脊椎动物 监测技术规范 1 范围 本文件规定了淡水大型底栖无脊椎动物监测的试剂和材料 、仪器和设备 、监测步骤 、质量保证和质量 控制的要求 。 本文件适用于湖泊 、水库、河流等水体中淡水大型底栖无脊椎动物的监测 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本 文件。 HJ 91.2　地表水环境质量监测技术规范 HJ 710.8　生物多样性观测技术导则　淡水底栖大型无脊椎动物 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 3.1 淡水大型底栖无脊椎动物 freshwater benthic macroinvertebrate 生活史全部或至少一个时期栖息于内陆淡水 （包括流水与静水 ）水体的水底表面或底部基质中且个 体不能通过 425 μm网筛的无脊椎动物 ，它们具有相对稳定的生活环境 ，移动能力差 。 注： 淡水中常见的大型底栖无脊椎动物主要包括水生的软体动物 （Mollusca ）、环节动物 （Annelida ）、节肢动物 （Ar⁃ thropoda） 、扁形动物 （Platyhelminthes ） 、线形动物 （Nematomorpha ） 、纽形动物 （Nemertea ）等。 3.2 分类单元 taxon 物种分类工作中的客观操作单位 ，有特定的名称和分类特征 ，主要包括门 （Phylum） 、纲（Class） 、目 （Order）、科（Family）、属（Genus）、种（Species）等，此外，还包括亚纲 （Subclass）、亚目（Suborder ）、亚科 （Subfamily ） 、族（Tribe） 、亚种（Subspecies ）等辅助分类等级 。 3.3 密度 density 单位面积内某分类单元或全部淡水大型底栖无脊椎动物的个体数量 。 注： 单位为个每平方米 （个/m2） 。 3.4 生物量 biomass 单位面积内某分类单元或全部淡水大型底栖无脊椎动物的湿重 。 注： 其中软体动物为带壳湿重 ，单位为克每平方米 （g/m2） 。 1DB32/T 4815 —2024 3.5 可涉水河流 wadeable river 在不借助工具的条件下 ，可徒步蹚水而行的河流 。 注： 具体分为涉水可过河流和涉水不可过河流 。其中，涉水可过河流具有水深较浅 、河床稳定 、河道淤积程度较轻等 特点，可徒步蹚水而过 ，如山地丘陵地区的溪流 ；涉水不可过河流具有沿岸带水深较浅 、河岸稳定 、岸坡平缓 、淤积 程度较轻等特点 ，但主河道水深较深或淤积严重 ，仅可沿岸蹚水而行 ，不可蹚水而过 ，如岸坡较平缓或漫滩较发育 的自然河道 。 3.6 不可涉水河流 non⁃wadeable river 在不借助工具的条件下添加 ，不可蹚水而行的河流 ，具有水深较深 、岸坡较陡等特点 。 注： 如深 U形河流、驳岸直立硬质化的河流 。 4 试剂和材料 4.1 本文件所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂 、蒸馏水或同等纯度的水 。 4.2 甲醛溶液 ：φ（HCHO）=37%~ 40%。 4.3 甲醛溶液 ：φ（HCHO）≈5%。 4.4 无水乙醇 ：ρ（C2H5OH）=0.79 g/mL。 4.5 乙醇溶液 ：φ（C2H5OH）=75%。 4.6 丙三醇。 4.7 加拿大树胶 。 4.8 普氏（Puris）胶：将8 g阿拉伯胶和 10 mL蒸馏水加入烧杯中 ，并将其置于 80 ℃恒温水浴 ，用玻璃棒 搅动，待胶溶后 ，依次加入 30 g水合氯醛 、7 mL甘油和 3 mL冰乙酸，继续用玻璃棒搅拌均匀 ，最后以薄 棉过滤即成 。 5 仪器和设备 5.1 采样器：根据生境条件选择合适的采样器 ，各采样器规格及其适用条件见附录 A。 5.2 体视显微镜 ：物镜变倍比 ≥5∶1，目镜 10×或15×。 5.3 生物显微镜 ：物镜 10×、20×、40×，目镜 10×或15×。 5.4 电子天平 ：最大称量 220 g，分度值 0.000 1 g；最大称量 500 g，分度值 0.001 g；最大称量 3 000 g，分 度值 0.01 g。 5.5 洗样筛：筛网孔径 425 μm，筛网材质为钢制 、尼龙制或其他不易破损的材料 。 5.6 洗样盆。 5.7 便携式冷藏箱 。 5.8 塑料自封袋或广口塑料瓶 。 5.9 网格托盘 ：30 cm× 36 cm，划30个网格（每格 6 cm× 6 cm） 。 5.10 搪瓷盘。 5.11 镊子。 5.12 细口吸管 。 5.13 标本瓶或标本盒 ：具盖。 5.14 放大镜。 5.15 培养皿。 2DB32/T 4815 —2024 5.16 吸水纸。 5.17 现场设备 ：手持式全球定位系统 、卷尺、测距仪、计时器、照相机、记号笔、防水签字笔等 ，直流潜水 泵（12 V） 、蓄电池（12 V，≥40 Ah） 、桶、铁锹等，具备条件的可配备无人机 。 5.18 防护工具 ：救生衣、防水裤、防水服、防晒服、防寒服、高筒胶鞋 、橡胶手套 、帽子、急救包等 。 5.19 生物实验室常用设备和器材 。 6 监测步骤 6.1 监测流程 大型底栖无脊椎动物监测流程应符合 HJ 710.8中科学性 、可操作性 、持续性、保护性、安全性及方法 适用性等原则要求 ，监测流程见图 1。 图1　监测流程图 6.2 监测方案制定 6.2.1 监测点位的布设 6.2.1.1 根据监测目的 ，结合水体及其周围环境的自然生态条件和人类干扰的空间特性 ，布设有代表性 的监测点位 。 6.2.1.2 湖泊和水库可在沿岸带 、湾区、敞水区、河口区等区域 ，河流可在上游河段 、中游河段 、下游河段 、 支流汇入口上下游 、排污口上下游 、城镇上下游等区域布设监测点位 。 6.2.1.3 不同规模湖泊 、水库和河流的监测点位布设数量见表 1，同时可结合实际 ，在前期摸底监测的基 础上对点位进行适当优化调整 ，以满足实际需求 。 3DB32/T 4815 —2024 表1　不同规模水体监测点位参考布设数量 水体类型 湖泊、水库 河流水体规模 <50 km2 50 km2~< 500 km2 500 km2~< 1 000 km2 1 000 km2~< 2 000 km2 ≥2 000 km2 —点位数量 3 个~< 10 个 10 个~< 15 个 15 个~< 20 个 20 个~< 30 个 30 个~50 个 当河流生境 （不同底质 、水生植物和水文条件等 ）及沿线土地利用类型较单一时 ， 按等距分段 （涉水可过河流和涉水不可过河流每段分别不超过 10 km和50 km） ； 当河流生境或沿线土地利用类型存在明显差异时 ，按主要差异因子的分布情况 进行分段 （如土地利用类型差异较大时 ，可将河流划分为林地段 、农田段、城市段 等） ，每段布设不少于 2个监测