ICS 67.050 SN C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5142—2019 进出口动物源性食品中粘菌素残留量的 测定 液相色谱串联质谱法 Determination of colistin residue in foodstuffs of animal origin for import and exportLC-MS/MS method 2019-10-25发布 2020-05-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T5142—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则编写。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国石家庄海关。 本标准主要起草人：侯霞、王凤池、赵雁冰、阙宝东、刘晓茂、艾连峰、徐文科。 业标准信息服务平台 SN/T5142—2019 进出口动物源性食品中粘菌素残留量的 测定液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了动物源性食品中粘菌素A和粘菌素B残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于进出口鸡肉、鸡肝、猪肾、扇贝、鸡蛋、牛奶等动物源性食品中粘菌素残量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 3方法提要 经WCX固相萃取柱净化，液相色谱-串联 质谱（ESI十）检测，外标法定量。 4试剂和材料 标准信息服 4.1甲醇：色谱纯。 4.2乙腈：色谱纯。 4.3 甲酸：色谱纯。 4.4乙酸：色谱纯。 4.5氨水。 4.6 三氯乙酸。 4.710%（W/V）三氯乙酸溶液：取10.00g三氯乙酸（4.6），用水溶解，定容至100mL 4.810%三氯乙酸溶液-乙腈（3+7,V/V）：取30mL10%三氯乙酸溶液（4.7）和70mL乙腈（4.2），混 匀，现用现配。 4.9甲酸-甲醇（1+4V/V）：取20mL甲酸（4.3），加人80mL甲醇（4.1），混勾。 4.10甲酸溶液（0.2十99.8，V/V）：取0.2mL甲酸（4.3），加入99.8mL水，混匀。 4.11标准物质：粘菌素，CASNo.1264-72-8，纯度为78.3%，标准品信息见附录A表A.1。 4.12标准贮备溶液：1.0mg/mL。根据纯度进行折算后称取适量的粘菌素标准物质（4.11），用甲酸溶 液（4.10）溶解并配制成1.0mg/mL的标准贮备液。0℃~4℃冷藏避光保存。 4.13粘菌素中间标准工作溶液：100μg/mL。吸取适量粘菌素标准贮备溶液（4.12），用甲酸溶液 （4.10）稀释成100μg/mL的标准工作溶液，0℃～4℃冷藏避光保存。 4.14基质标准工作溶液：吸取适量粘菌素中间标准溶液（4.13），用相应基质的空白样品提取液配成合 适浓度的基质标准工作溶液，使用前配制。 1 SN/T 5142—2019 处理，保持柱体湿润。 4.16微孔滤膜：0.22μm，有机相型 5仪器 5.1 液相色谱-串联四极杆质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2分析天平：感量分别为0.01mg和0.01g。 5.3涡旋混匀器。 5.4离心机：转速不低于5000r/min。 5.5均质器：转速不低于10000r/min。 5.6 固相萃取装置。 5.7 真空泵：真空度大于80kPa。 组织捣碎机。 5.9 氮吹仪。 5.10 聚丙烯离心管：100mL，具塞。 5.11 试管：10mL，玻璃。 5.12 振荡器。 试样的制备与保存 6.1通则 出版文本为准 6.2动物组织、内脏 取有代表性样品约0.5kg，用组织捣碎机充分捣碎混匀分成两份，装人洁净容器作为试样，密封，标 明标记。将试样置于-18℃冷冻保存。 6.3蛋 取有代表性样品约0.5kg，去壳后用组织捣碎机充分绞碎混匀分成两份，装人洁净容器作为试样， 服务。 密封，标明标记。将试样置于0℃～4℃冷藏保存。 6.4牛奶 取适量新鲜或冷藏的样品约500mL，充分混匀分成两份，装入洁净容器作为试样，密封，标明标记 将试样置于0℃～4℃冷藏保存。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1 动物组织、内脏 称取试样2g（精确到0.01g），置于100mL聚丙烯离心管（5.10）中，加人10mL10%三氯乙酸水 溶液-乙睛（4.8），10000r/min均质2min后，5000r/min离心5min。转移上清液至另一离心管中，残 2