SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4675.23—2016 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定 连续流动分析仪法 Determination of ammonium nitrogen in wine and grape juice for export- Continuous flow analysis(CFA) method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4675.23—2016 前言 SN/T4675《出口葡萄酒质量安全分析方法》共分为30个部分： SN/T 4675.1 出口葡萄酒中甘油的测定酶法； SN/T 4675.2 出口葡萄酒中2,3-丁二醇的测定气相色谱法； SN/T4675.3 出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定； -SN/T 4675.4 出口葡萄酒中乳酸的测定酶法； SN/T4675.5 出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法； -SN/T4675.6 出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定； SN/T 4675.7 出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.8 出口葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定液相色谱法； SN/T4675.9 出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.10 出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.11 出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法； SN/T4675.12 出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法； SN/T 4675.13 出口葡萄酒中2，4，6-三氯甲苯醚残留量的测定气相色谱-质谱法； SN/T4675.14 出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.15 出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法； SN/T 4675.16 出口葡萄酒中 富马酸的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.17 出口葡萄酒中 中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法； SN/T4675.18 二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法； SN/T 4675.19 出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定； SN/T 4675.20 出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法； SN/T 4675.21 出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法； SN/T 4675.22 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法； SN/T4675.23 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法； SN/T4675.24 出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法； SN/T 4675.25 出口葡萄酒颜色的测定CIE1976（L*a*b*）色空间法； SN/T 4675.26 出口葡萄酒浊度的测定散射光法； SN/T4675.27 出口葡萄酒碱性灰分的测定； SN/T 4675.28 出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数； SN/T4675.29 出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法； 出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。 SN/T4675.30 本部分为SN/T4675的第23部分 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫 局、中华人民共和国广东出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：刘萤、韩深、程甲、刘熙岩、王玥、程超、刘青、李志勇。 1 SN/T 4675.23—2016 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定 连续流动分析仪法 1范围 SN/T4675的本部分规定了出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮含量的连续流动分析仪的测定方法。 本部分适用于葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 样品与试剂在蠕动泵的推动下进入化学反应模块，在密闭的管路中连续流动，被气泡按一定间隔规 律地隔开。在碱性介质中，样品中的氨、铵离子与二氯异氰脲酸钠溶液释放出来的次氯酸根反应生成氯 胺。在40℃和亚硝基铁氰化钠存在的条件下，氯胺与水杨酸盐反应形成蓝绿色化合物，于660nm波 长处测量吸光度，外标法定量。 参考工作流程图，见图1。 泵 废液 空气 样品 进样器 透析器 空气 缓冲液 反应线圈 废液 W 检测器 AW > 水杨酸钠 三氮异氰尿酸钠 数据处理 图1连续流动分析法测定葡萄酒及葡萄汁中氨氮含量流路图 4 试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水， 4.1氯化铵（NH,CI)：优级纯，在105℃土1℃下干燥恒重后，保存在干燥器中。 4.2 乙醇(C,H,OH)。 1 SN/T 4675.23—2016 4.3 氢氧化钠（NaOH）。 4.4柠檬酸三钠（CH,O,Nas·2H2O)。 4.5水杨酸钠（NaC,H,O）。 4.6二氯异氰脲酸钠(C.Cl,N.O,Na·2HzO)。 4.7亚硝基铁氰化钠(Naz[Fe(CN),NO]·2HzO)。 4.8十二烷基聚乙二醇醚（Brij35,CssHi18O24）。 4.9乙醇溶液：12%乙醇溶液。量取120mL乙醇（4.2），用水定容至1000mL，混匀。 4.10十二烷基聚乙二醇醚（Brij35）溶液：30%Brij35溶液。称取30.0gBrij35（4.8）溶于100mL水 中，混匀。 4.11氢氧化钠溶液：5mol/L氢氧化钠溶液。称取200.0g氢氧化钠（4.3）溶于适量水中，冷却后，用水 稀释至1000mL，混匀。 4.12缓冲溶液：称取40.0g柠檬酸三钠（4.4），用水定容至1000mL，加入1mL30%Brij35（4.10）， 混匀。 4.13水杨酸钠溶液：称取34.0g水杨酸钠（4.5)及0.4g亚硝基铁氰化钠（4.7）,用水定容至1000mL， 加人1mL30%Brij35（4.10），混匀。 4.14二氯异氰脲酸钠溶液：称取2.0g二氯异氰尿酸钠（4.6），加人氢氧化钠溶液（4.11)50mL，加水定 容至1000mL，混匀。 4.15氨氮标准储备液：准确称取3.819g氯化铵（4.1）加水溶解并定容至1000mL容量瓶中，混匀。 或直接购买市售有证标准溶液p（N）=1000mg/L。 人到100mL容量瓶中，用12%乙醇-水溶液定容至刻度，混匀。酒精含量高于15%或低于8%的葡萄 酒样品的测定：10mL氨氮标准储备液（4.15）加人到100mL容量瓶中，用与样品酒精度相同的乙醇-水 溶液定容至刻度，混匀；葡萄汁样品的测定：10mL氨氮标准储备液（4.15）加人到100mL容量瓶中，用 水定容至刻度，混匀。 4.17滤膜（水系）：孔径为0.45um。 5仪器和设备 5.1 1天平：精度为0.1g,0.1mg。 5.4 移液器：100μL~1000μl,500μL~5000 6操作步骤 6.1样品前处理 气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出。 6.2测定步骤 6.2.1标准曲线的绘制 2