ICS 65.020.30 CCS B 41 15 内蒙古自治区 地方 标准 DB15/T 3682—2024 规模化奶山羊场梭菌病防治技术规范 Technical specification for the prevention and treatmen t of clostridial disease in large -scale dairy goat farms 2024-09-27发布 2024-10-27实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 3682 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（ SAM/TC 19）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学、河南农业大学、乌兰察布市农林 科学研究所、内蒙古自治区质量和标准化研究院、鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心、鄂尔多斯市东胜 区动物疫病预防控制中心、锡林郭勒盟畜牧工作站、赤峰市克什克腾旗农牧局、巴彦淖尔市畜牧业服务 中心、内蒙古盛健生物科技有限责任公司。 本文件主要起草人：杨斌、宋越、菅复春、安雅雯、海尼斯格、申丹妮、苏少锋、王娜、刘博、戴 伶俐、张兴夫、毛伟、白帆、钱英红、张月梅、张帆、陈琳方、刘月、高顺平、刘艳琴、高魁、乌仁张 嘎、佰伊拉、高景鹏、党娟、李德 林、赵世华、王建光。 DB15/T 3682 —2024 1 规模化奶山羊场梭菌病防治技术 规范 1 范围 本文件规定了羊梭菌性疾病的术语和定义、诊断和防治要求。 本文件适用于内蒙古自治区区域内规模化奶山羊场、动物诊疗单位和动物疫病预防控制机构等关 于奶山羊梭菌病的诊断与防治。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 NY/T 2835 奶山羊饲养管理技术规范 NY/T 3073 家畜魏氏梭菌病诊断技术 NY/T 5030 无公害农产品 兽药使用准则 NY 5032 无公害食品 畜禽饲料和饲料添加剂使用准则 NY 5149 无公害食品 肉羊饲养兽医防疫准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 羊快疫 bradsot/braxy 病原为腐败梭菌， 以羊突然死亡， 真胃或幽门区点、 斑状或弥漫性出血为特征的急性致死性传染病。 羊猝狙 struck 病原为C型产气荚膜梭菌，以羊急性死亡、腹膜炎、溃疡性肠炎为特征的急性致死性传染病。 羊肠毒血症 enterotoxaemia 病原为D型产气荚膜梭菌，以羊急性死亡、肠黏膜脱落或溃疡，死后肾脏肿大、实质柔软、略加触 压即烂为特征的急性致死性传染病，又称“软肾病”。 DB15/T 3682 —2024 2 羊黑疫 black disease 病原为B型诺维氏梭菌，以羊突然死亡，尸体迅速腐败，皮肤呈黑色外观，肝脏出现特异性坏死灶 为特征的急性致死性传染病。 羔羊痢疾 lamb dysentery 病原为B型产气荚膜梭菌，以剧烈腹泻和小肠出血性溃疡为特征的新生羔羊急性致死性传染病。 4 诊断 羊快疫 4.1.1 流行特点 发病羊多在 6～18月龄之间，营养状况较好的羊多发。主要经消化道感染。多发于秋、 冬、早春气 候骤变、阴雨连绵之际，采食冰冻饲草或饥饿常可促使本病发生。 4.1.2 临床症状 突然发病，往往未见症状就已死亡。有的病羊死前可见疝痛、鼓气，眼结膜发红，磨牙呻吟，倒地 痉挛抽搐，口内流出带血泡沫，多于数分钟至数小时之内死亡。 4.1.3 病理剖检 4.1.3.1 尸体迅速腐败，腹部膨胀，皮下组织胶冻样。 4.1.3.2 真胃出血坏死性炎症，黏膜肿胀、充血，黏膜下层水肿，幽门及胃底部黏膜见点、斑状或弥 漫性出血，并可见溃疡和坏死灶。 4.1.3.3 肠道内充满气体或气泡，黏膜也见充血、出血。 4.1.3.4 腹腔、胸腔、心包腔大量积液，暴露于空气中易凝固。 4.1.3.5 心内、外膜可见点状出血。 4.1.3.6 胆囊多肿胀，肠道和肺脏浆膜出血。 4.1.4 实验室诊断 4.1.4.1 样品采集 4.1.4.1.1 活羊可采集直肠内粪便或肛拭子，粪便样品应选新鲜粪便至少 5 g～10 g，装入无菌容器 运送，肛拭子样品应取无菌医用棉拭子插入肛门内，旋转 2～3圈，刮取直肠黏液或粪便，装入 2 mL离 心管运送；新近病死或剖杀羊只无菌采集心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肺脏等脏器组织或肠道内容物，装 入样品保存管运送。 4.1.4.1.2 病死羊可无菌采集心脏、脾脏、肝脏、肠管等器官病变部位。 4.1.4.2 触片镜检 取病死羊心、脾、肝、肠内容物或病变部肠黏膜，革兰氏染色镜检，可见革兰氏阳性、两端钝圆、 单在或呈短链状排列的典型大杆菌。以肝切面制作触片，用瑞氏染色镜检时，除见典型的粗大杆菌外， 还可见无关节、长短不等、微弯曲的长丝状菌。其他脏器涂片有时也可发现。 DB15/T 3682 —2024 3 4.1.4.3 细菌培养 4.1.4.3.1 器材、试剂与耗材 培养箱、生物安全柜、显微镜、胰胨 -亚硫酸盐 -环丝氨酸（ TSC）琼脂培养基、液体硫乙醇酸盐培 养基（FTG）、一次性接种环、厌氧培养袋、一次性厌氧培养包、革兰氏染液。 4.1.4.3.2 细菌培养鉴定 无菌采取送检病死羊的心脏、肝脏、脾脏、肺脏等病料，接种葡萄糖 鲜血琼脂平板进行分离培养， 37 ℃厌氧培养 24 h， 形成微微隆起、 边缘厚薄不均、 有微弱溶血区的淡灰色菌落。 挑取单个菌落涂片， 革兰氏染色镜检，可见两端钝圆的革兰氏阳性粗大杆菌；挑取单个菌落接种于液体硫乙醇酸盐培养基， 37 ℃厌氧培养 24 h，培养基均匀混浊，并产生有脂肪腐败气味的气体。 4.1.4.4 PCR检测 按照NY/T 3073 执行。 注： 以上实验室诊断相关操作应按照 GB 19489 要求进行。 羊猝狙 4.2.1 流行特点 本病是由 C型产气荚膜梭菌毒素所引起，以溃疡性肠炎和腹膜炎为特征的羊的一种急性传染病。发 生于成年羊， 1～2岁羊只发病较多。常见于低洼、沼泽地区。 多发生于冬、 春季节， 主要经消化道感染。 常呈地方流行性。 4.2.2 临床症状 病程短促，常未及见到症状既突然死亡。有时发现病羊掉群、卧地，表现不安、衰弱、痉挛、眼球 突出，在数小时内死亡。 4.2.3 病理剖检 十二指肠和空肠黏膜严重充血、 糜烂， 有的区段可见大小不等的溃疡； 胸腔、 腹腔和心包大量积液， 后者暴露于空气后，可形成纤维素絮块；病羊刚死时骨骼肌表现正常，但在死后 8 h内，肌间隔积聚血 样液体，肌肉出血，有气性裂孔。 4.2.4 实验室诊断 实验室诊断按照 4.1.4执行。 羊肠毒血症 4.3.1 流行特点 本病是由 D型产气荚膜梭菌在羊肠道中大量繁殖产生毒素所引起，以腹泻、惊厥、麻痹和突然死 亡、死后肾组织软化为特征的一种急性传染病。各种品种、年龄的羊都可感染发病，多呈散发。 2～12 月龄且膘情较好的羊最易发病。在牧区，多发于春夏之交、抢青时和秋季牧草结籽后；在农区，多发于 收割抢茬季节或采食了大量谷类之后。流行具有明显的地方性。 4.3.2 临床症状 DB15/T 3682 —2024 4 4.3.2.1 抽搦型 突然发作。倒毙前，四肢出现强烈的划动，肌肉颤搐，眼球转动，磨牙，口水过多，随后头颈显著 抽缩，常于 2 h～4 h内死亡。 4.3.2.2 昏迷沉睡型 早期为步态不稳，以后卧倒，并由感觉过敏、流涎，上下颌“咯咯”作响，继而昏迷，角膜反射消 失，有的病羊发生腹泻，常在 3 h～4 h内安静地死去。 4.3.3 病理剖检 肠道（尤其小肠）黏膜充血、出血，重症病例整个肠壁呈血红色，有时出现溃疡；心包常扩大，内 含灰黄色液体和纤维素絮块，左心室的心内外膜下有点状出血；肺脏出血和水肿；胸腺出血；死后肾脏 软化如泥样。全身淋巴结肿大、出血。 4.3.4 实验室诊断 4.3.4.1 细菌分离鉴定、 PCR检测 细菌涂片镜检、 PCR检测按照 4.1.4执行。 4.3.4.2 血糖和尿糖检查 检查病死羊血液和尿液，可发现血糖明显升高，尿液葡 萄糖强阳性。 羊黑疫 4.4.1 流行特点 以2～4岁羊最易感，营养状况较好的羊多发。主要经消化道感染。多发于春、夏季节肝片吸虫流行 的低洼牧场。 4.4.2 临床症状 与羊快疫、羊肠毒血症相似，病程极短，多数未见症状突然死亡。少数病程可延长至 1 d～2 d，病 羊精神沉郁，食欲废绝，反刍停止，离群或呆立不动，呼吸急促，体温可升至 41 ℃～42 ℃，后期，病 羊倒地磨牙，呈俯卧姿势昏迷死亡。 4.4.3 病理剖检 病死羊皮下静脉显著