ICS 65.020.30 CCS B 41 15 内蒙古自治区 地方 标准 DB15/T 3681—2024 规模化奶山羊场球虫病防治技术规范 Technical specification for prevention and control of coccidiosis in large-scale dairy goat far ms 2024-09-27发布 2024-10-27实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 3681 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（ SAM/TC 19）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学、河南农业大学、内蒙古盛健生物 技术有限公司、乌兰察布市农林科学研究所、鄂尔多斯市东胜区动物疫病预防控制中心、内蒙古自治区 质量和标准化研究院、 鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心、 锡林郭勒盟畜牧工作站、 克什克腾旗农牧局、 巴彦淖尔市畜牧业服务中心。 本文件主要起草人：杨斌、宋越、菅复春、安雅雯、海尼斯格、申丹妮、王娜、苏少锋、刘博、戴 伶俐、高娃、张兴夫、毛伟、白帆、钱英红、张月梅、张帆、陈琳方、刘月、高顺平、刘艳琴，高魁、 乌仁张嘎、佰伊拉、高景鹏、党娟、李德林、 赵世华、王建光。 DB15/T 3681 —2024 1 规模化奶山羊场球虫病防治技术 规范 1 范围 本文件规定了规模化奶山羊场球虫病的诊断和防治措施。 本文件适用于内蒙古自治区境内规模化奶山羊场球虫病的诊断和防治。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 奶山羊球虫病 dairy goat coccidiosis 由艾美耳科艾美耳属的阿普艾美耳球虫（ E.apsheronica ）、阿氏艾美耳球虫（ E.arloingi ）、艾 丽 艾美耳 球虫（ E.alijevi ） 、克氏 艾美耳球 虫（ E.christenseni ） 、妮氏 艾美耳 球虫 （E.ninakohlyakimovae ）、家山羊艾美耳球虫（ E.hirci）等寄生于奶山羊肠道所引起的一种肠道原虫 病。 每克粪便卵囊数 oocyst per gram （OPG） 一种用于评估动物肠道中球虫感染强度的指标。 休药期 withdrawl time 动物从停止给药到许可屠宰或动物的乳、蛋等产品许可上市的间隔时间。 驱虫 helminthicide 应用药物驱除、杀灭宿主动物体内和外界相通脏器中的寄生虫。 DB15/T 3681—2024 2 4 临床诊断 流行特点 4.1.1 传染源与传播方式 患有奶山羊球虫病的羊或带虫羊为传染源，病原体（球虫卵囊）可随着粪便直接排出体外，污染饲 料、饮水、垫料和母羊乳房，奶山羊食入具有感染能力的孢子化卵囊即可感染。 4.1.2 发病季节 一年四季均可发病，春、夏、秋及潮湿的饲养环境多发。 4.1.3 易感动物 羔羊1～6月龄期间均易感，但大多数临床症状发生在 1～2月龄的羔羊身上。成年羊一般都是带虫 者。 临床症状 4.2.1 严重感染球虫的病羊消瘦，精神不振，食欲减退或废绝，被毛 粗乱；腹泻，后肢及尾部污染有 稀粪，粪便中常混有血液、剥落的黏膜和上皮，有恶臭。 4.2.2 体温可升至 40 ℃～41 ℃左右。死亡率约为 10%。 4.2.3 非羔羊阶段的奶山羊球虫感染可能不表现出明显的临床症状，而是以亚临床形式存在，亚临床 感染可造成食欲下降以及肠道损害，导致的饲料转化效率下降，羊只生长速度及体重增加缓慢。 病理变化 4.3.1 在羔羊感染妮氏艾美尔球虫或山羊艾美尔球虫的，早期出血性肠炎为特征，阿氏艾美尔球虫感 染时可在小肠内形成息肉，而阿普艾美耳球虫可诱导在黏膜内形成的从浆膜表面可见的白色结节。 4.3.2 患病奶山羊的一般病理表现为卡他性肠炎，有时可能表现为肠管高度充血，或伴有黏液或纤维 蛋白渗出。 4.3.3 部分奶山羊皱胃胃壁呈弥漫性增厚并伴有水肿，胃黏膜表面有白色结节和红黑色出血斑。十二 指肠和回肠有卡他性炎症，有点状或带状出血；小肠及大肠的浆膜和黏膜上有溃疡灶，并伴有白色 -黄 色圆形或者卵圆形结节，如粟粒大小，常成簇分布。 5 实验室诊断 试剂和材料 5.1.1 试剂：饱和盐水， 2.5%重铬酸钾溶液，配制方法分别按照附录 A，配制用水应符合 GB/T 6682三 级水要求。 5.1.2 材料：样品保存袋、记号笔、防水标签纸、 60目和100目铜丝网或尼龙网、 100 mL量筒、50 mL 烧杯、50 mL离心管、 10 mL玻璃瓶、吸管、镊子、天平、离心机、麦氏虫卵计数板、载玻片、盖玻片、 显微镜等。 样品采集、运输和保存 5.2.1 采集奶山羊新鲜粪便 20 g以上，放入灭菌样品保存袋（杯）中，用记号笔标注样品编号、采集DB15/T 3681 —2024 3 时间、地点。 5.2.2 将样品保存袋放在装有冰袋的泡沫盒中低温运输。 5.2.3 将样品送达实验室后放置于 4 ℃保存。 定性检查 5.3.1 将被检羊或羊群的新鲜粪便充分搅匀后取 2 g，放入50 mL烧杯中，加入 10倍量蒸馏水。 5.3.2 轻轻搅匀， 经 60目铜丝网或尼龙网过滤第一次，用少量蒸馏水冲洗 3～5次滤网；滤液再经 100 目铜丝网或尼龙网过滤第二次，用少量蒸馏水冲洗 3～5次滤网。 5.3.3 将滤液移入 50 mL离心管， 2500 rpm/min 离心10 min，倾去上清液。 5.3.4 沉淀物中加入少量饱和盐水，混匀，将管内的混悬液移入 10 mL离心管。 5.3.5 用饱和盐水加满离心管且液面凸起微高于管口，盖上盖玻片静置 10 min。 5.3.6 取下盖玻片，将有液体的一面盖在载玻片上。 5.3.7 置载玻片于显微镜载物台上，用 10×或40×的倍数进行检查。 结果判定 5.4.1 发现球虫卵囊，判为阳性，说明该羊 (群)已感染球虫。将球虫阳性粪样置于 2.5%重铬酸钾溶液 中，在25 ℃～28 ℃环境中培养至孢子化卵囊后，参见附录 B球虫卵囊形态特征，确定球虫种属。 5.4.2 未发现球虫卵囊，需按照 5.3重复检查 5次，仍未见球虫卵囊，该粪样可判为阴性。 定量检查 5.5.1 对定性检查中呈阳性的粪样，需定量检查其每克粪便卵囊数。 5.5.2 每份粪样取 3个重复，按照 5.3.1～5.3.3进行操作。 5.5.3 将沉淀物用少量饱和 盐水搅匀，移入 100 mL量杯，加饱和盐水至 60 mL处，充分混匀。 5.5.4 用吸管吸取液面混悬液注满麦氏虫卵计数板的 2个计数室，静置 5 min。 5.5.5 将麦氏虫卵计数板置于显微镜下检查，用 10×的倍数数出每个计数室 (1 cm×1 cm×0.15 cm=0.15 cm3)内的所有卵囊数，将两个计数室的卵囊数之和除以 2即得卵囊平均值。对压线的卵囊，按 左、上压线计，右、下压线不计处理。根据每个重复的卵囊平均值，计算出三个重复的平均值 A。 5.5.6 每克粪便卵囊数（ OPG）按式(1）计算： 𝑂𝑃𝐺=(𝐴÷0.15)×60÷2=𝐴×200…………………………………(1) 式中： OPG——每克粪便卵囊数； A——三个重复的卵囊平均值。 5.5.7 对卵囊数较多的粪样，可在 60 mL总体积的基础上，用饱和盐水再稀释 B倍计数，按式 (2)计 算： 𝑂𝑃𝐺=𝐴×200×𝐵…………………………………(2) 式中： OPG——每克粪便卵囊数； A——三个重复的卵囊平均值； B——稀释倍数。 定量检查的判定标准 DB15/T 3681 —2024 4 5.6.1 OPG＞1×105/g，为重度感染。 5.6.2 1×104/g≤OPG≤1×105/g，为中度感染。 5.6.3 OPG＜1×104/g，为轻度感染。 球虫病判定标准 凡符合4.3的病变特征，或粪便定量检查结果满足 5.6.1或5.6.2时，可判为球虫病病例。 6 防治要求 加强饲养管理，搞好环境卫生 6.1.1 饲养管理 成年羊多系带虫者，故羔羊应与成年羊分群饲养管理，曾经爆发过临床球虫病的羊舍需要进行彻底 消杀后再饲养 6月龄以下的羔羊。饲草和饮水要严格避免羊粪污染。哺乳母羊的乳房要经常擦洗。合理 安排饲养密度，分批进栏饲养，减少断奶、转群、换料应激。 6.1.2 圈舍消毒 圈舍应每天清扫，粪便及时清理。用 3%～5%热碱水或甲酚类消毒剂消毒地面、饲槽、饮水槽等， 1 次