ICS 65.020.20 CCS B 16 15 内蒙古自治区 地方 标准 DB15/T 3659—2024 马铃薯种薯田间检验操作技术规程 Code of practice for seed potatoes field inspection 2024-09-06发布 2024-10-06实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 3659 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。 本文件由内蒙古自治区马铃薯标准化技术委员会 (SAM/TC 40) 归口。 本文件起草单位：乌兰察布市种业工作站、内蒙古农业大学职业技术学院、乌兰察布市农林科学研 究所、乌兰察布市科学事业发展中心、内蒙古中加农业生物科技有限公司、乌兰察布市气象局、内蒙古 自治区农牧业技术推广中心、 乌兰察布市财政预算绩效评价中心、乌兰察布市植保植检站、乌兰察布市 农牧业综合行政执法支队、 内蒙古民丰种业有限公司、 乌兰察布市农畜产品质量安全中心。 本文件主要起草人：赵玉平、刘智慧、崔健、戎素平、黄修梅、董其冰、牛俊美、姚国宇、王静、 王沛、纳钦、郭岩峰、朵岚、武振亚、李海青、王真、王玉凤、刘广晶、吕文霞、何瑞兵 、郝帅、于国 林、王伟、郭建晗、李强、董利娟、陈宏芳、李燕、郭威艳、张晓儒、特日格勒。 DB15/T 3659 —2024 1 马铃薯种薯田间检验操作技术 规程 1 范围 本文件规定了马铃薯种薯田间检验次数及时期、检验内容、检验准备、田间检验、实验室验证、结 果判定、记录存档和管理等内容。 本文件适用于马铃薯种薯质量田间检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 18133 马铃薯种薯 GB/T 29378 马铃薯脱毒种薯 生产技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 田间检验 field inspection 在种薯生产过程中，对种薯田进行的一系列质量鉴定活动。 原原种（ G1） pre-elite 用脱毒苗或试管薯，在防虫网棚、温室等隔离条件下生产，经质量检测达到 GB 18133 要求的马铃薯 种薯。 原种（G2） elite 用原原种做种薯，在良好隔离条件下生产出的经质量检测达到 GB 18133 要求的种薯。 大田种薯 field seed potatoes 经质量检测达到 GB 18133 要求的一级种或二级种。 4 检验次数及时期 DB15/T 3659 —2024 2 原原种生产在组培苗定植后或者试管薯出苗后 30 d～40 d和收获前 10 d进行2次田间检验。 原种和大田种薯生产在马铃薯现蕾期、盛花期、收获期或杀秧前 2～3周进行3次田间检验，第 3次检 验为最终结果。 5 检验内容 检疫性有害生物 包括马铃薯 A病毒（PVA)、马铃薯纺锤块茎类病毒（ PSTVd)、马铃薯帚顶病毒（ PMTV)、马铃薯癌肿 病菌 （Synchytrium endobioticum) 、 马铃薯环腐病菌 （ Clavibacter michiganensesubsp. sepedonicus) 、 马铃薯丛植支原 体（Potato witches'broom phytoplasma) 、马铃薯粉痂病菌（ Spongospora subterranea) 、马铃薯腐烂茎线虫（ Ditylenchus destructor) 、马铃薯甲虫（ Leptinotarsa decemlineata) 。 发现上述检疫性有害生物引起的病虫害，应立即向检疫部门报告，由检疫部门根据病虫害种类采取 相应措施，同时该地块所有马铃薯不能用作种薯。 非检疫性有害生物和其他检测项目 包括品种混杂、病毒病（ PVY、PLRV、PVS、PVM、PVX）和黑胫病（Erwinia carotovora subsp.atroseptica ）以及由农药、化肥、气候等非侵染性因素引起的生理性病害。 6 检验准备 必备物品 田间作业服、田间检验记载表、记号笔、 75%酒精和喷壶、样品袋、遮阳伞、低温保存箱或车载冰 箱、马铃薯病毒快速检测试剂条等。 信息调查 田间检验前，调查记录种薯生产田基本情况，包括品种名称、种薯级别、种植面积、种薯来源、前 茬、播种时间、用药种类和时间等，同时查阅生产档案调查种薯田隔离情况、蚜虫监测情况、拔杂去劣 情况以及田间管理等信息并记录（见附录 A中表A.1）。 检验顺序 同一种薯生产企业，不同级别种薯批次按照由高级别到低级别的顺序进行检验。 检验数量 按照GB 18133 的要求执行。 样点分布 样点选择要有代表性，根据种薯田布局情况采取对角线法、“ S”形或“ Z”字形等方式取样，样点 应涵盖地头、低洼地块和作业车道。 7 田间检验 DB15/T 3659 —2024 3 消毒 进地检查前或更换种薯批后，检验人员需穿戴使用 75%酒精消毒后的田间作业服。 目测检查 顺光检查，阴天检查效果更好，光线太强时，借助遮阳伞进行检查。 原原种需要 100%检查，即全部植株目测检查；大田种薯按照 GB 18133 的要求规定的数量选取样点进 行逐株检查，边目测边记录样点总株数和非正常植株（见附录 A中表A.2）。 快速检测 田间病毒感病初期或抗病毒品种等症状不明显的情况或有其他症状干扰的情况可以采集一定比例 样品借助马铃薯病毒快速检测试纸条法进行确认。 疑似样品取样 通过目测和快速检测技术仍不能确诊的非正 常植株或器官应采集样本进行实验室检验。 病毒疑似样品取样时手持样品袋外侧，将病毒疑似植株顶端第 3～4个侧枝的叶片伸入样品袋内后 取下叶片，取样过程中避免直接接触叶片，每取完 1个样品用 75%酒精对手部进行消毒，防止不同样品间 交叉感染。 真菌、细菌病害疑似样品取能够代表该病害典型症状的病健交间部位，必要时需要剖开茎、 根、块茎进行取样。 疑似样品整理与保存 对田间疑似株样品进行整理，在取样袋上标注取样时间、地点、品种、级别、样品号、症状、疑似 病害名称等关键信息，将疑似样品立即放入低温保存箱或车载冰箱冷藏保存。 8 实验室验证 针对不同类型病害采用不同的实验室检测方法验证，病毒采用 DAS-ELISA或RT-PCR的方法；类病毒 采用RT-PCR或NASH的方法； 真菌、 细菌病害采用形态学结合 DAS-ELISA或PCR或RT-PCR等分子生物学方法。 9 结果判定 依据检查前调查信息和实验室检测结果对目测和样点检验结果进行修正，排除药害、缺素、肥害、 气候等非侵染性因素的影响，按照 GB 18133 的质量要求对田间检验结果进行判定。 10 记录存档和管理 检验结束后保留原始记录，包括检查前信息调查记录、田间检查记录、实验室检测记录和田间检验 结果评价，要求原始记录全面，关键信息准确，原始记录及时存档，存档至少 6年，记录管理按照 GB/T 29378的要求执行。 DB15/T 3659 —2024 4 A A 附录 A （资料性） 田间检验信息记录 A.1 马铃薯种薯质量田间检验基础信息调查 表见表A.1。 表A.1 马铃薯种薯质量田间检验基础信息调查表 批次 品种 面积 播种种薯 播种 日期 前茬 农药使用 隔离 蚜虫 监测 拔杂 去劣 备注 级别 来源 去年 前年 药名 时间 种植者／代理人签字： 检验员签字： A.2 田间检验记录表见 表A.2。 表A.2 田间检验记录表 地块编号： 第 次检验 检验时间： 单位：株 检测点 混杂 类病毒 病毒病 黑胫病 环腐病 生理性病害 其他 备注 种植者／代理人签字： 检验员签字：