ICS 65.020 CCS B 16 13 河北省 地方 标准 DB 13/T 6044—2025 小麦抗茎基腐病鉴定技术规程 2025 - 04 - 03发布 2025 - 05 - 03实施 河北省市场监督管理局 发布 DB 13/T 6044 —2025 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 本文件由河北省农业农村厅提出。 本文件起草单位：河北农业大学植物保护学院、中国农业大学农学院、河北省农林科学院谷子 研究所、河北省农林科学院植物保护研究所、河北省植保植检总站。 本文件起草人：齐永志、马骏、董志平、王永芳、王烨、甄文超、王逍冬、吴玉星、耿立格、郄 彦敏、赵立强、勾建军、李娜、崔彦、刘娜、班胜聪。 DB 13/T 6044 —2025 1 小麦抗茎基腐病鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了小麦抗茎基腐病室内苗期和田间成株期鉴定的接种体制备、抗病性鉴定方法、病 情调查分级标准和抗病性评价的技术要求。 本文件适用于小麦对茎基腐病的室内苗期和田间成株期抗病性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 DB13/T 5888 保护性耕作条件下小麦茎基腐病绿色防控技术规程。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 白穗white head 由假禾谷镰刀菌侵染引起的茎基部褐变腐烂造成的小麦枯死穗， 呈整茎干枯状， 且拔起不带根。 4 接种体的制备 病原物获取 选择有代表性、致病力强的假禾谷镰刀菌菌株。病菌分离鉴定、致病性及周年侵染循环见附录 A。 分生孢子悬浮液接种体的制备 将病菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂（ Potato dextrose agar ，PDA；见附录 B.1）固体平板培养基 上活化（ 9 cm培养皿）， 25℃条件下，黑暗培养 5～7 d；用无菌打孔器打成直径为 0.5 cm的菌饼， 取10～15枚菌饼放入含有 150 mL羧甲基纤维素钠液体培养基（ Carboxymethyl Cellulose ，CMC；见 附录B.2）的三角瓶内， 25℃黑暗振荡 （180 r/min ）培养3～5 d后，4层纱布过滤，于显微镜下观察， 用无菌水或去离子水调节孢子悬浮液浓度至 1.0 × 106个孢子/mL，然后加入 0.5%的吐温20，混匀， 4℃保存，备用。 麦粒接种体的制备 将小麦籽粒用水浸泡 10～12 h，取吸胀水的麦粒 300 g，放入聚乙烯塑料袋（长 ×宽×高=36 cm ×10 cm×8 cm）或500 mL三角瓶中，置于灭菌锅中 121℃灭菌30 min，冷却后备用。 接种时，将装有无菌冷却麦粒的聚乙烯塑料袋或三角瓶置于超净工作台中，表面喷洒 75%酒精， 打开紫外灯表面消毒 20 min。将在PDA平板上（ 9 cm培养皿）黑暗、 25℃条件下培养 7 d的菌株，用 无菌打孔器打成直径为 0.5 cm的菌饼，接入灭菌好的麦粒上，每个聚乙烯塑料袋或三角瓶接入 20枚 菌饼。黑暗、 25℃条件下培养，每天轻轻摇晃聚乙烯塑料袋或三角瓶，以保证菌丝长势均匀。培养 20 d后待菌丝长满麦粒表面即可，放在 4℃冰箱中冷藏备用 。田间使用前，将长满菌丝的麦粒倒出， 在通风背光处晾干，用小型粉碎机粉碎成直径为 2 mm左右的颗粒。 5 抗病性鉴定 室内苗期抗病性鉴定 DB 13/T 6044 —2025 2 选取籽粒饱满、大小一致的小麦种子 ，75%酒精消毒 2 min，无菌水冲洗 3遍。消毒后的小麦种子 在培养皿中 25℃催芽2～3 d，待种子出芽 5 mm后，将种子在以上备好的 1.0 × 106个孢子/mL的孢子 悬浮液接种体中浸泡 1 min，播种至规格为 5×10的穴盘中，每穴 2粒，每个品种播种 10粒，每盘可以 播种10个品种。重复 3次。温室自然光照，昼夜温度分别设定为 25±2℃和20±2℃。采用底部灌水方式 浇水。以‘ Sunco’和‘新麦 26’分别为抗病、感病对照，播种 5周以后，当感病对照严重发病时进行 调查。 田间成株期抗病性鉴定 在小麦茎基腐病常发区，选择地势平坦、土壤肥沃程度居中的地块建立田间鉴定病圃，周围留 2 m以上的保护行。利用人工接种方法，将已粉碎的麦粒接种体按 15 g/m接种量与细沙或细土（不能攥 成团）按照体积比 1∶1比例混合均匀成菌土。每个品种种植 4行，每行 1 m，播种100粒种子。重复 3 次。先开沟，然后撒播种子，再均匀覆盖菌土，最后埋土 3～4 cm。以‘Sunco’和‘新麦 26’分别为 抗病、感病对照，每 20个品种设 1组对照。在乳熟末期进行调查。 田间管理：均匀施足底肥，做好土地平整；播种时间与当地大田生产一致，或适当早 播；足墒 播种，及时灌溉过冬水和拔节孕穗水，足量灌溉，保持均匀，扬花期后不再浇水；鉴定圃不使用任 何杀菌剂。 6 病情调查 室内苗期病情调查 室内种植 5周后， 待感病对照充分发病时， 调查记录待鉴品种单株发病程度。 每个品种调查 10株。 发病严重度级值分级标准见表 1，按照附录 C.1记录调查结果。按照如下公式（ 1）计算病情指数。 表1 小麦茎基腐病苗期发病严重度分级标准 严重度级值 病害发生程度 严重度级值 病害发生程度 0级 无症状 3级 第1叶鞘褐枯占叶鞘长度 1/2以上 1级 胚芽鞘发生褐枯或第 1叶鞘褐枯小于叶鞘 1/4长 度 4级 第2叶鞘有明显褐枯 2级 第1叶鞘褐枯占叶鞘长度 1/4～1/2 5级 第3叶鞘有明显褐枯或全株 枯死 DI= 100 × ∑ （Si×Fi）/（S×N）………………………… （1） 式中： DI——病情指数； Si——各严重度级值； Fi——各严重度的病株数； S——严重度最高级值； N——调查总株数。 田间成株期病情调查 在小麦乳熟末期， 调查每个品种中间 2行的白穗率， 重复 3次。 要求待鉴品种 1 d内全部完成调查。 按照附录 C.2记录调查结果，按照如下公式（ 2）计算相对白穗率。 RWEP= WEPic/WEP cc……………………………………………… （2） DB 13/T 6044 —2025 3 式中： RWEP——相对白穗率； WEPic——待鉴品种的白穗率； WEPcc——感病对照品种的白穗率。 若鉴定圃发病整体较轻，利用白穗率难以区分抗病材料时，可利用白穗率淘汰部分白穗率高的 感病材料，其余的再按照成株期发生程度进行调查。小麦茎基腐病成株期发病严重度级值分级标准 见表2。从中间 2行随机取样，每行调查 20个茎，共调查 40个茎。调查时拨去叶鞘记录各茎病级，要 求1 d内调查完毕，或所有待鉴定品种一起取样，当天调查不完放在冷库。按照附录 C.3记录调查结 果。按照如上公式（ 1）计算病情指数，按照如下公式（ 3）计算相对病情指数。 表2 小麦茎基腐病成株期严重度分级标准 严重度级值 病害发生程度 严重度级值 病害发生程度 0级 健康植株，茎基部无坏死病斑或褐变 3级 第二茎节局部褐变或全部褐变，无白穗 1级 第一茎节褐变面积小于 1/2，植株正 常生长 4级 茎秆基部变色至第三节或以上，但无白穗 2级 第一茎节褐变面积大于 1/2，植株正 常生长 5级 茎秆枯死，无穗或出现白穗 RDI= DIic/DIcc………………………………… （3） 式中： RDI——相对病情指数； DIic——待鉴品种的病情指数； DIcc——感病对照品种的病情指数。 7 抗病性评价 鉴定有效性判断 当感病对照品种达到感病级别时鉴定有效。室内苗期鉴定感病对照品种病情指数 ≥40.0，田间成 株期鉴定感病对照品种病情指数 ≥30.0，该批次鉴定有效。 抗病性评价标准 7.2.1 室内苗期抗病性评价标准 按照病情指数，将小麦茎基腐病抗病性类型划分为 5个级别（见表 3）。淘汰高感品种，感病及 以上级别的待鉴品种继续进行田间成株期鉴定。 表3 室内苗期小麦对茎基腐病抗病性评价标准 病情指数 抗病性评价 DI=0 免疫Immune（I） 0＜DI≤10 高抗Highly resistant （HR） 10＜DI≤30 中抗Moderately resistant （MR） 30＜DI≤40 中感Moderately susceptible （MS） DI＞40 高感Highly susceptible （HS） DB 13/T 6044 —2025 4 7.2.2 田间成株期抗病性评价标准 当田间感病对照品种白穗率达到 3%及以上时，按照公式（ 2）计算相对白穗率。根据相对白穗率 将小麦茎基腐病抗病性类型划分为 5个级别（见表 4）。若鉴定圃发病普遍较轻，则利用白穗率淘汰 部分感病材料，其余的按照成株期发病严重度分级标准调查的数据计算病情指数，进一步按照公式 （3）计算相对病情指数，按照相对病情指数进行分级（见表 4）。 表4 田间成株期小麦茎基腐病抗病性评价标