ICS 13.080 CCS Z 18 13 河北省 地方 标准 DB 13/T 5988—2024 土壤中多种农药及代谢物残留量的测定 2024 - 08 - 12发布 2024 - 09 - 12实施 河北省市场监督管理局 发布 DB 13/T 5988 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 -2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由河北省农业农村厅提出。 本文件起草单位：河北蕴鸿检测科技有限公司、河北省农药检定监测总站、河北农业大学植物 保护学院。 本文件主要起草人：武丽芬、杨殿贤、李瑞军、刘云肖、王继英、周静、谢欢、牛海林、白凤 虎、刘明、许昊、孙新锁、张立君、吴志勇、王雪娟、赵国存、唐甜绮、宋红英、李春艳。DB 13/T 5988 —2024 1 土壤中多种农药及代谢物残留量的测定 1 范围 本文件规定了土壤中多种农药及代谢物残留量测定的原理、试剂与材料、仪器和设备、试样采 集和制备、测定步骤、结果计算、精密度、定量限等技术要求。 本文件适用于利用液相色谱 -质谱联用法、气相色谱 -质谱联用法测定土壤中 37种农药及代谢物 的残留量。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第1部分：总则与定义 GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度） 第2部分：确定标准测量方法重复 性与再现性的基本方法 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 395 农田土壤环境质量监测技术规范 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样用乙腈提取，经分散固相萃取净化，液相色谱 -质谱联用仪、 气相色谱 -质谱联用仪 测定， 外标法定量。 5 试剂与材料 除另有说明外，所用试剂均为色谱纯试剂，水为 GB/T 6682规定的一级水。 试剂 5.1.1 乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8）。 5.1.2 甲酸（HCOOH，CAS号：64-18-6）。 5.1.3 甲醇（CH3OH，CAS号：67-56-1）。 5.1.4 甲酸铵（ HCOONH 4，CAS号：540-69-2）。 5.1.5 无水硫酸镁（ MgSO4，CAS号：7487-88-9），分析纯。 5.1.6 氯化钠（ NaCl，CAS号：7647-14-5），分析纯。 5.1.7 柠檬酸钠二水合物（ C6H5Na3O7·2H2O，CAS号：6132-04-3），分析纯。 5.1.8 柠檬酸二钠盐倍半水合物（ C6H6Na2O7·1.5H2O，CAS号：6132-05-4），分析纯。 溶液配制 5.2.1 甲酸铵-甲酸水溶液（ 2 mmol/L）：称取 0.1261 g甲酸铵，用 0.01%甲酸水溶液溶解并稀释至 1000 mL，摇匀。 5.2.2 甲酸铵-甲酸甲醇溶液（ 2 mmol/L ）：称取 0.1261 g甲酸铵，用 0.01%甲酸甲醇溶液溶解并 稀释至1000 mL，摇匀。 DB 13/T 5988 —2024 2 标准品 37种农药及代谢物标准品名称 ，见附录A。 标准溶液配置 5.4.1 标准储备溶液（ 100 mg/L）：将标准品用乙腈 (5.1.1)分别配制成 100 mg/L的标准储备液， 摇匀。于 -18 ℃条件下避光保存，有效期 6个月。 5.4.2 混合标准溶液（ 5 mg/L）：吸取一定量的农药标准储备溶液于容量瓶中用乙腈（ 5.1.1）定容 至刻度，配制成 5 mg/L混合标准溶液，使用不同仪器进行测定的标准溶液分别进行配制，于 0 ℃～ 4 ℃条件下避光保存，有效期 1个月。 材料 5.5.1 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（ PSA）：粒径 40 μm～60 μm。 5.5.2 微孔滤膜（有机相）： 0.22 μm。 5.5.3 陶瓷均质子： 2 cm(长)×1 cm（外径）。 6 仪器和设备 液相色谱 -三重四极杆质谱联用仪：配电喷雾离子源（ ESI）。 气相色谱 -三重四极 杆质谱联用仪：配电子轰击源（ EI）。 分析天平：感量 0.01 g和感量0.0001 g。 氮吹仪：可控温至 80 ℃。 离心机：转速不低于 4000 r/min。 漩涡混合器。 标准筛：孔径 2 mm。 7 试样采集和制备 土壤样品的采集和保存按 NY/T 395 的要求执行。风干后拣出杂质，研磨后过 2 mm标准筛，取 250 g～500 g装入洁净的容器内待测。 8 测定步骤 前处理 8.1.1 提取 称取5 g试样（精确至 0.01 g）于50 mL离心管中，加 5 mL水，放置半小时，加 10 mL乙腈，涡旋提 取4 min，加入4 g无水硫酸镁、 1 g氯化钠、 1 g柠檬酸钠二水合物 、0.5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物 以 及2颗陶瓷均质子，涡旋 4 min后，以4000 r/min 离心5 min。 8.1.2 净化 吸取6 mL上清液加到内含 0.9 g硫酸镁、 0.15 gPSA的15 mL离心管中，涡旋 4 min，以4000 r/min离 心5 min，准确吸取 4 mL上清液于 10 mL试管中，氮吹 仪80 ℃吹至近干 ，加入乙腈定容至 2 mL，漩涡混 合器混匀，过微孔滤膜，待上机测定。 仪器参考条件 8.2.1 液相色谱 -三重四极杆质谱联用仪参考条件 色谱柱： C18（2.1 mmI.D.×100 mm，3 μm），或能达到同样分离效果的色谱柱； 流动相： A相为甲酸铵 -甲酸水溶液（ 5.2.1），B相为甲酸铵 -甲酸甲醇溶液（ 5.2.2）；梯度洗脱 程序见表 1； 流速：0.4 mL/min； DB 13/T 5988 —2024 3 柱温：40 ℃； 进样量： 1 μL～2 μL； 表1 流动相洗脱程序 离子源类型：电喷雾离子源； 扫描方式：正离子； 离子源温度： 300 ℃； 检测器电压： 1.94 kv； 雾化气： 3.0 L/min； 加热气： 15.0 L/min； 多反应监测：每种农药分别选择至少 2个子离子。所有需要检测的子离子按照出峰顺序，分时段 分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录 B.1。 8.2.2 气相色谱 -三重四极杆质谱联用仪参考条件 色谱柱：键合交联 5%二苯基/95%二甲基聚硅氧烷； 30 m×0.25 mm×0.25 μm，或能达到同样分离效 果的色谱柱； 色谱柱温度（ ℃）：100 ℃保持1 min，以20 ℃/min升到280 ℃，保持 11 min； 载气：氦气； 流速：1.39 mL/min； 进样口温度： 240 ℃； 进样量： 1 μL； 进样方式：不分流进样； 检测器电压： 1.17 kv； 离子源类型：电子轰击源； 离子源温度： 200 ℃； 传输线温度： 250 ℃； 溶剂延迟： 3 min； 多反应监测：每种农药分别选择至少 2个子离子。所有需要检测的子离子按照出峰顺序，分时段 分别检测。每种农药的保留时间、母离子、子离子及离子对质谱参数，见附录 B.2。 标准曲线 选择与被测样品性质相同的空白土壤样品按照 8.1进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一 定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为 0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.2 mg/L和0.5 mg/L的基质匹配工作溶液，根据仪器性能和检测需要选择不少于 5个浓度点， 供仪器测定。以 37种农药及代谢物的质量浓度为横坐标，以定量离子的色谱峰面积为纵坐标，绘制 标准曲线，基质标准工作溶液应现用现配。 时间 min 流动相A/% 流动相B/% 0 90 10 0.5 90 10 5.0 5 95 8.0 5 95 8.1 90 10 11.5 90 10 DB 13/T 5988 —2024 4 定性测定 在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣 除背景后的样品质谱图中，所选离子均出现，样品中目标农药的定性离子和定量离子的相对丰度比 与浓度相当的基质标准溶液相比， 其允许偏差不超过表 2规定的范围， 则可判定样品中存在目标农药。 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差详见表 2。 表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 定量测定 本文件采用外标法定量。待测样品溶液中的农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之 内，超出线性范围应根据测定浓度与基质标准溶液同步稀释后再进行分析。 37种农药及代谢物多反 应监（MRM）质量色谱图见附录 C。 平行试验 按以上步骤对同一试样进行平行试验。 空白试验 空白样品除不加试样外，采用与试样测定完全相同的试剂、设备和