ICS 65.020.20 CCS B 05 DB 5307 丽江市 地方 标准 DB 5307/T 67—2024 羊肚菌菌种和外源营养袋生产技术规程 2024 - 10 - 14发布 2024 - 12 - 30实施 丽江市市场监督管理局 发布 DB 5307/T 67 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 丽江中源绿色食品有限公司 提出。 本文件由 丽江市农业农村局 归口。 本文件起草单位：丽江中源绿色食品有限公司、永胜县农产品质量安全检测中心 、永胜县园艺技术 推广站、永胜县生物技术推广站 。 本文件主要起草人：秦飞、刘绍莲、李俊 杰、高明超、邱继权、陈先茂、和心然。 DB 5307/T 67 —2024 2 羊肚菌菌种和外源营养袋生产技术规程 1 范围 本文件规定了羊肚菌菌种和外源营养袋生产的环境与要求、种源选择、母种生产、原种生产、栽培 种生产、质量检验、入库、抽样与检测、生产记录与留样、标签、标志、包装和运输的要求。 本文件适用于云南省丽江市羊肚菌菌种和外源营养袋生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 12728 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1846 食用菌菌种检验规程 NY/T 1935 食用菌栽培基质质量安全要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 羊肚菌 Morchella 羊肚菌隶属于子囊菌门（ Ascomycota ）、盘菌纲（ Pezizomycetes ）、盘菌目（ Pezizales ）、羊肚 菌科（Morchellaceae ）、羊肚菌属（ Morchella ），又名草笠竹、羊肚菜、羊肚蘑；因其菌盖表面生有 许多小凹坑，外观极似羊肚而得名，是药食兼用的珍稀食用菌。 外源营养袋 exogenous nutrition bag 按一定的配方制作而成的袋装营养物，以便为羊肚菌菌丝生长发育提供营养补充的基质袋。 4 生产环境与要求 菌种的生产环境与要求 4.1.1 菌种场地要求 应符合NY/T 528 的规定。 4.1.2 菌种厂房设备要求 厂房设置和布局、设备设施和卫生条件应符合 NY/T 528 的规定。 4.1.3 菌种生产人员技术要求 DB 5307/T 67 —2024 3 生产所需要的技术人员和检验人员经过专业培训、掌握基础知识及菌种生产技术规程要求的相应 专业技术人员。 外源营养袋的生产环境与要求 4.2.1 外源营养袋生产场地要求 场地应选择地势高，通风良好，空气清新，水源近，排水通畅，交通便利的场所。 4.2.2 外源营养袋生产厂房设备要求 外源营养袋生产厂房要求有各自隔离的功能区，如：原材料库、辅料库、摊晒场；配套有配料间、 搅拌间、装袋间、灭菌间、冷却间、更衣室。 外源营养袋生产需要浸泡池、搅拌机、装袋机、灭菌柜等设备。 4.2.3 外源营养袋生产人员技术要求 生产所需要的技术人员和检验人员经过专业培训、掌握基础知识。 5 种源选择 种源应从具有相应资质的供种单位购买，自制菌种应符合《食用菌菌种管理办法》的规定。 6 母种生产 母种的生产应符合 NY/T 528 的规定。培养基的配方和配制方法按照 NY/T 528 中的4.6,4.7的规定。 培养温度 17 ℃～20 ℃,3 d～7 d长满后备用。 7 原种生产 培养料选择 7.1.1 主料 小麦、木屑、稻壳、棉籽壳等主料的质量及贮藏应符合 NY/T 1935 的要求。 小麦应无霉变、无虫害，颗粒度饱满。稻壳、棉籽壳应干净、无霉变、无虫害。 木屑为阔叶树硬杂木粗木屑，颗粒在（ 0.4 cm～0.5 cm）×（0.6 cm～0.8 cm），预湿湿度至 40%～ 50%，无干木屑。 7.1.2 辅料 石膏、石灰等辅料质量及贮藏应符合 NY/T 1935 的规定。 生产用水 应符合GB 5749 要求。 培养料的配制 DB 5307/T 67 —2024 4 小麦先用 1％的石灰水煮 35±2 min，用手捏开里面没有白芯、不开花即可捞出控水、冷却按配方 比例将提前预湿拌匀的木屑、稻壳、棉籽壳及其他原料搅拌均匀，培养料基含水量 48％～52％、pH值 6.5～7.5；当天拌好的料当天装完。原种培养料配方 宜采用：小麦 70%、木屑9%、稻壳9%、棉籽壳 9%、 轻质碳酸钙 2%、石灰1%。 装瓶与灭菌 采用容量为 500 mL或750 mL的菌种瓶；瓶内培养料要做到松紧一致，料面平整，打孔。瓶口用无菌 透气盖封口，放入灭菌柜（锅）内（压力 0.12 Mpa～0.15 Mpa、温度121 ℃～126 ℃），灭菌 150 min～ 160 min。 冷却 将灭菌后的菌种瓶冷却，等菌种瓶中心温度降至 20 ℃以下待用。 接种 灭菌后当菌种瓶内中心温度降至 20℃以下时，按无菌操作要求接种。 培养 将接种好的菌种瓶置于培养室培养，菌丝生长阶段全程避光培养，培养室温度 17 ℃～20 ℃，每天 通风2 次～3 次，将二氧化碳浓度控制在 1 g/m³以下，选择菌丝全瓶长满的继续培养 3 d～5 d，即可用 于栽培种生产。 8 栽培种生产 培养料配制 培养料质量应符合 NY/T 1935 的规定。按配方比例将木屑、稻壳、棉籽壳提前预湿，小麦用 0.5％ 石灰水浸泡。小麦浸泡时应完全浸入水中，浸泡至麦粒保持完整，含水量 60％，麦粒切开无白芯，捞出 控水，与配方中其他原料搅拌均匀，培养料的含水量 48％～52％，pH 值 6.5～7.5；当天拌好的料当天 装完。栽培种培养料配方 宜采用：小麦 70%、木屑9%、稻壳9%、棉籽壳 9%、轻质碳酸钙 2%、石灰1%。 装袋与灭菌 采用15 cm×28 cm×0.005 cm或17 cm×35 cm×0.005 cm 规格的高压灭菌聚丙烯塑料袋。装好的 料要做到松紧一致、 中间打孔，料面平整。采用高压蒸汽灭菌，温度 121 ℃～126 ℃，时间 150 min～ 160 min。 冷却 将灭菌后的菌包自然冷却或风机冷却，等菌包中心温度降至 20 ℃以下待用。 接种 灭菌后当袋内中心温度降至 20 ℃以下可以接种，接种设施设备消毒流程应符合 NY/T 528 的规定。 按照无菌操作规程接种并贴好标签。 培养 DB 5307/T 67 —2024 5 将接种好的菌包置于培养室培养，菌丝生长阶段全程避光培养，培养室温度 17 ℃～20 ℃，每天通 风2次～3次，将二氧化碳浓度控制在 1 g/m³以下，选择菌丝全瓶长满的继续培养 3 d～5 d，即可用于生 产。 9 外源营养袋生产 培养料配制 培养料质量应符合 NY/T 1935 的规定。按配方比例将木屑、腐殖土提前预湿，小麦用加入 0.5％石灰 水浸泡。小麦浸泡时应完全浸入水中，浸泡至麦粒保持完整，含水量 60％时，麦粒切开无白芯，捞出控 水，与配方中其他原料搅拌均匀，培养料的含水量 48％～52％，pH 值 6.5～7.5；当天拌好的料当天 装完。外源营养袋 培养料配方 宜采用：小麦60%、木屑18%、稻壳17%、腐殖土 2%、轻质碳酸钙 2%、石灰 1%。 装袋与灭 菌 采用13 cm×26 cm×0.005 cm或14 cm×28 cm×0.005 cm规格的高压灭菌聚丙烯塑料袋。装好的 料要做到松紧一致、中间打孔，料面平整。采用高压蒸汽灭菌，温度 121 ℃～126 ℃，时间 150 min～ 160 min； 冷却 将灭菌后的营养袋自然冷却或风机冷却，等外源营养袋中心温度降至 20 ℃以下待用。 10 检验 检验 母种、原种、栽培种抽样、检验和判定应符合 NY/T 1846 的规定。 母种感官要求见附录 A,原种感官 要求见附录 B,栽培种感官要求见附录 C。 外源营养袋指标 外源营养袋应外观完好、无污染、无破损、水份： 50%～55%、pH：6.5～7.5、内容物应干燥、整洁、 松紧适度。 11 入库 检验完成后及时入冷藏库，详细记录各生产环节，库温 1 ℃～4 ℃，避光，适当通风，定期对空间 进行杀菌处理。 12 抽样与检测 抽样 按照NY/T 1846 中抽样标准抽样。母种、原种、栽培种的抽样量分别为该批次的 10%、5%、1%。但每 批次抽样量不得少于 10支（瓶、袋）；超过 100支（瓶、袋）的，可进行二级抽样。 DB 5307/T 67 —2024 6 检测 按照NY/T 1846 中感官检验、霉菌、细菌检验、菌丝生长速度测定进行，任何一项 不符合标准要求 的，为不合格菌种，均符合要求的，为合格菌种。 贮藏备用 将检查合格的菌种放于洁净的