ICS71.100.40 CCSY43 中华人民共和国国家标准 GB/T43544—2023 口腔清洁护理用品 牙膏对牙结石抑制 率的实验室测试方法 Oralcareandcleaningproducts—Laboratorytestmethodforinhibitionrateof toothpastestodentalcalculus 2023-12-28发布 2024-07-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国口腔护理用品标准化技术委员会(SAC/TC492)归口。 本文件起草单位:广州质量监督检测研究院、上海美加净日化有限公司、苏州市金茂日用化学品有 限公司、广州舒客实业有限公司、江西诚志日化有限公司、苏州清馨健康科技有限公司、黑龙江省轻工科 学研究院、好来化工(中山)有限公司、重庆登康口腔护理用品股份有限公司、云南白药集团健康产品有 限公司、杭州纳美智康科技有限公司、柳州两面针股份有限公司、无限极(中国)有限公司、纳爱斯集团有 限公司、苏州绿叶日用品有限公司、高露洁棕榄(中国)有限公司、广州中汉口腔用品有限公司、淮安纵横 生物科技有限公司淮阴分公司、康博士日化集团有限公司、浙江爱尚日用品有限公司、广州市倩采化妆 品有限公司、好易康生物科技(广州)有限公司、斯坦德科创医药科技(青岛)有限公司、广州星际悦动股 份有限公司、佛山市南海区和顺安富日用品有限公司、上海全力日用品有限公司、福建爱洁丽日化有限 公司、深圳小阔科技有限公司、上海格芒生物科技有限公司、扬州倍加洁日化有限公司、空军军医大学口 腔医学院。 本文件主要起草人:贾芳、施裔磊、陈健芬、陈敏珊、许海燕、毛建林、孙东方、郑卫、何琪莹、邓全富、 张志伟、范宇、胡永志、高艳、彭燕、刘冬、郑卓丽、钟锡基、笪成柱、王春梅、赵国盛、徐春生、黄秀娟、 宫静榕、李立芬、胡茵、杨续义、陈万金、尹阔、方浩、陆留华、李鑫宇、陈晓斌、李一清、韩金豆、李露、周艺、 刘家溍、谢宇、曾宇阳、夏泽敏、谭建华、席绍峰、李刚。 ⅠGB/T43544—2023 口腔清洁护理用品 牙膏对牙结石抑制 率的实验室测试方法 1 范围 本文件描述了牙膏对牙结石抑制率实验室测试方法的原理、试剂和材料、仪器设备、测定步骤、 计算。 本文件适用于以抑制晶体生长为起效机制的牙膏对牙结石抑制率的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB5009.92—2016 食品安全国家标准 食品中钙的测定 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 当存在较厚的牙菌斑时,唾液中的钙、磷酸盐局部累积在其上逐渐形成(羟基)磷酸钙类矿物,即牙 结石。在恒定pH条件下,以羟基磷灰石粉末作为晶种,人工唾液中的钙、磷元素在晶种表面发生反应 生成(羟基)磷酸钙类沉淀,模拟牙结石的形成过程中的菌斑钙化过程。通过测定人工唾液中钙元素的 浓度,计算样品对牙结石的抑制率。 5 试剂与材料 5.1 通用要求:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,试验用水均按照GB/T6682中规定的一 级水。 5.2 无水氯化钙(CaCl2)。 5.3 磷酸二氢钠(NaH2PO4)。 5.4 氯化钠(NaCl)。 5.5 氢氧化钠(NaOH)。 5.6 焦磷酸钠(Na4P2O7)。 5.7 羟基磷灰石[Ca5(PO4)3(OH)]:纯度≥97%。 5.8 氢氧化钠溶液(0.5mol/L):称取0.08g(精确至0.01g)氢氧化钠(5.5)溶解于水中并转移至 10mL容量瓶,定容,摇匀。 1GB/T43544—2023 5.9 人工唾液:称取8.766g(精确至0.001g)氯化钠(5.4)和0.126g(精确至0.001g)磷酸二氢钠(5.3) 溶解于900mL水中,再加入0.194g(精确至0.001g)无水氯化钙(5.2),搅拌均匀后,用氢氧化钠溶液 (5.8)调节pH至7.4,加水定容至1000mL。相同批次试验使用同一批次人工唾液,室温保存,保存时 间不宜超过3d。 5.10 氢氧化钠溶液(0.01mol/L):量取5mL氢氧化钠溶液(5.8)至250mL容量瓶中用水定容至刻度 线,摇匀。 5.11 生理盐水:称取0.88g(精确至0.01g)氯化钠(5.4),加水溶解转移至100mL容量瓶,定容,摇匀。 5.12 5%焦磷酸钠溶液:称取0.5g(精确至0.1g)焦磷酸钠(5.6)溶解于9.5mL水中,混匀。 6 仪器与设备 6.1 磁力搅拌水浴锅:能控温(37±2)℃。 6.2 分析天平:感量为0.001g。 6.3 高速离心机:转速≥10000r/min。 6.4 pH计:精度±0.01。 6.5 火焰原子吸收分光光度计。 7 试验测定 7.1 试验方案 试验设置样品组、负对照组和正对照组,每个试验组3个平行。牙膏浆溶液为样品组,水为负对照 组,5%焦磷酸钠溶液为正对照组。 7.2 牙膏浆溶液的制备 称取10g(精确至0.1g)牙膏于烧杯中,加入30g(精确至0.1g)水配制25%的牙膏浆溶液,搅拌均 匀后将牙膏浆溶液转移至50mL离心管中,于高速离心机(6.3)中10000r/min离心15min,保留上清 液备用。 7.3 样品的处理 准备相应数量的10mL离心管并进行分组。分别准确称量50mg(精确至0.001g)羟基磷灰石粉 末于10mL离心管中,加入5mL生理盐水(5.11),振荡处理1min后10000r/min离心10min,用吸 管缓慢将上清液弃去。分别向样品组、负对照组和正对照组离心管中加入5mL牙膏上清液(7.2)、水 和5%焦磷酸钠溶液(5.12),振荡处理1min,10000r/min离心10min,用吸管缓慢将上清液弃去。随 后再向离心管中加入5mL生理盐水,振荡处理1min,10000r/min离心10min,用吸管缓慢将上清液 弃去,再加入5mL生理盐水按上述操作重复处理两次。在离心管中加入5mL生理盐水,于旋涡振荡 器上振荡1min,得到分散均一的羟基磷灰石悬浊液。 注:振荡处理需保证羟基磷灰石粉末完全分散,必要时增加振荡时间。 7.4 模拟反应 量取100mL人工唾液(5.9)至200mL烧杯中,将烧杯置于磁力搅拌水浴锅(6.1),待人工唾液温 度加热至(37±2)℃,将7.3制备的羟基磷灰石悬浊液转移至烧杯中开始反应。往烧杯中不断滴加氢氧 化钠溶液(5.10),使溶液pH恒定在7.4,反应进行30min。到达时间后立即从烧杯中移取10mL溶 液,经0.22μm滤膜过滤后待用。 2GB/T43544—2023 7.5 钙元素浓度的测定 按GB5009.92—2016中第一法或其他灵敏度相当的方法,对滤液(7.4)中钙元素浓度C进行测定。 8 计算 待测样品对牙结石的抑制率R按公式(1)计算: R=CS-CN CP-CN×100 …………………………(1) 式中: R———待测样品抑制率,%; CS———样品组钙元素浓度平均值,单位为毫克每升(mg/L); CP———正对照组钙元素浓度平均值,单位为毫克每升(mg/L); CN———负对照组钙元素浓度平均值,单位为毫克每升(mg/L)。GB/T43544—2023