SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4139—2015 出口水果蔬菜中乙蔡酚残留量的测定 Determination of 2-naphthol residue in fruits and vegetables for export 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4139—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国重庆出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：都存显、曹淑瑞、王俊苏、唐柏彬、张雷、王国民、万巧。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 4139—2015 出口水果蔬菜中乙萘酚残留量的测定 1范围 本标准规定了植物源性食品中乙萘酚含量的高效液相色谱（HPLC）检测以及高效液相色谱-质谱） 质谱（LC-MS/MS）检测和确证方法。 本标准适用于苹果、柑橘、小白菜、西红柿等食品中乙萘酚含量的测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样经乙睛提取，氨基柱净化，经高效液相色谱仪和高效液相色谱-质谱/质谱仪检测，外标法定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 乙睛：高效液相色谱级。 4.2 甲醇：高效液相色谱级 4.4 氯化钠。 4.5 乙睛-甲苯溶液（3+1，体积比）：量取300mL乙睛（4.1)和100mL甲苯（4.3），混匀后备用。 4.6 乙睛溶液（5+5，体积比）：准确量取50mL乙睛（4.1）和50mL水，混勾后备用。 4.7 乙溶液（1+9，体积比）：准确量取10mL乙（4.1）和90mL水，混匀后备用。 4.8 乙茶酚标准品：CASNO.：135-19-3，纯度≥99.5%。 4.9 标准储备溶液：精确称取适量的上述标准品：用甲醇溶解配制溶液浓度1mg/mL的标准储备溶 液，一20℃下保存。 4.10 标准中间溶液：用甲醇分别稀释标准储备液至终浓度约为10mg/L.低于4℃下保存。 4.11基质标准工作液：吸取适量的标准中间溶液（4.10），用空白样品提取液配成适当浓度的混合标准 工作溶液。现配现用。 4.12氨基柱：3mL500mg或相当者。使用前用5mL甲苯、5mL乙睛和5mL乙-甲苯溶液（4.5） 活化。 4.130.22μm微孔滤膜，有机系。 5 仪器和设备 5.1高效液相色谱仪，配有荧光检测器。 1 SN/T 4139—2015 5.2 高效液相色谱-质谱/质谱仪，配电喷雾离子源（ESI）。 5.3电子天平：感量为0.01g和0.01mg。 5.4旋转蒸发仪。 5.5旋涡混匀器。 5.6氮吹仪。 5.7离心机:5000r/min。 5.8具塞塑料离心管：50mL。 6 试样制备与保存 6.1 试样制备 蔬菜、水果样品取可食部分切碎，用均质器匀浆后装人洁净容器内密封，并标明标记。 6.2 试样的保存 将试样于一18℃以下保存。 7测定步骤 7.1提取 称取匀浆后的样品10.0g于50mL离心管中，加人25mL乙睛（4.1），再加人3g氯化钠（4.4），涡 旋振荡提取5min，5000r/min离心3min，将上层有机相转移至旋蒸瓶中。用25mL（4.1）乙睛重复提 取1次，合并有机相，在40℃水浴锅中旋转浓缩至约1mL，向旋蒸瓶中加人5mL乙晴-甲苯（3十1） （4.5）溶液溶解残渣，待净化。 7.2 2净化 将上述溶液全部转移至活化后的氨基柱上，用鸡心瓶收集流出液，再每次用2mL乙睛-甲苯 （3+1）（4.5）溶液洗涤旋蒸瓶3次并将洗涤液移入柱上，再用10mL乙睛-甲苯（3+1）（4.5）溶液洗脱 化合物，收集全部流出液。并在40℃水浴锅中旋转浓缩至约1mL，氮吹至干。HPLC法用1mL乙睛 溶液（4.6）或LC-MS/MS法用1mL乙睛溶液（4.7）溶解残渣，过滤膜后供HPLC或LC-MS/MS测定。 准信息服 7.3测定 7.3.1 液相色谱条件 液相色谱条件如下： a) 流动相：乙睛和水（50十50，体积比），等体积洗脱； c) 流速：1mL/min; 波长：激发波长入x=250nm，发射波长入em=410nm； e) 柱温：30℃； 进样量：20μl。 7.3.2 液相色谱-质谱/质谱条件 液相色谱-质谱/质谱条件如下： 2