SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4056—2014 蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of fumagillin residue in honey- LC-MS-MS-method 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4056—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：刘晓茂、葛娜、李学民、王飞、张进杰、曹彦忠、宋强。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4056—2014 蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 1范围 本标准规定了蜂蜜中烟曲霉素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法 本标准适用于蜂蜜中烟曲霉素残留量的测定。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 蜂蜜试样用水稀释，经HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱（ESI十）检测，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 乙：色谱纯。 4.3 甲酸：优级纯。 4.4 乙酸乙酯：色谱纯。 4.5 甲醇-水（3+7，体积比）溶液：取30mL甲醇（4.1)用水定容至100mL。 4.6 乙睛-水（1十1，体积比）溶液：取50mL乙（4.2）用水定容至100mL。 4.7 标准物质：烟曲霉素（CAS号：23110-15-8）；纯度大于或等于98%。 4.8 烟曲霉素标准贮备溶液：1.0mg/mL。称取适量的烟曲霉素标准物质（4.7），用甲醇溶解并配制成 1.0mg/mL的标准贮备液。避光保存于-18℃冰柜中。V 成1.0ug/mL的标准工作溶液，避光保存于一18℃冰柜中。 4.10HLB固相萃取柱：500mg，6mL，或相当者，使用前依次用5mL甲醇和10mL水预处理，保持柱 体湿润。 4.11微孔滤膜：0.2μm，尼龙 5仪器 5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI）。 1 SN/T 4056—2014 5.2 2分析天平：感量分别为0.01mg和0.01g。 5.3旋涡混匀器。 5.4固相萃取装置。 5.5真空泵：真空度应达到80kPa。 5.6氮气吹干仪。 5.7三角瓶：200mL。 5.8试管：10mL。 6试样的制备与保存 6.1 试样的制备 对于无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过50℃的水 浴中振荡，待样品全部融化后搅拌均匀，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。 6.2 试样保存 试样置于常温下，避光保存。试样在制备和保存过程中应避免受到污染或待测物含量发生变化。 测定步骤 7.1 提取净化 后，全部倒入下接固相萃取柱（4.10）的贮液器中，在固相萃取装置（5.4）上使样液以小于2mL/min的流 在65kPa的负压下，减压抽干10min。用7mL乙酸乙酯（4.4）洗脱至10mL试管（5.8）中，于40℃水 浴中氮气吹至近干，用1mL乙脂十水（4.6）溶解残余物，供液相色谱-串联质谱仪测定。 行业标准 7.2测定 7.2.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： 色谱柱：C18，1.7μm，50mm×2.1mm（内径）或相当者； b) 柱温：35℃； c) 进样量：10μL； (P 流动相：A：0.1%甲酸（4.3)水溶液；B：乙睛。梯度洗脱条件见表1 表1液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(μL/min) 流动相A/% 流动相B/% 85 0 300 15 0.7 300 10 90 2 300 10 90 2.1 300 85 15 85 4 300 15 2