SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1944—2016 代替SN/T1944—2007 动物及其制品中细菌耐药性的测定 纸片扩散法 Detection of antimicrobial resistance of the bacteria in animal and animal productsDisk diffusion testing 行业标准信息服务平台 2016-08-23发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1944—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1944—2007《动物及其制品中细菌耐药性的测定纸片扩散法》，与SN/T1944- 2007相比，主要技术变化如下： 检测方法及附录部分参考了美国临床和实验室标准协会CLSIM100-S24（2014)《抗菌药物敏 感性试验执行标准》，CLSIM02-A11（2012）《抗菌药物敏感性试验纸片扩散法操作标准》和 规范性引用文件中用GB4789.4替代了SN0170。 删除了方法原理和实验室自制抗菌药物纸片方法 附录D耐药性试验报告中应考虑的抗菌药物建议分组中增加了动物专用的常规报告试验 药物。 附录E特定耐药机制的测定与判定中增加了产碳青霉烯酶的肠杆菌的测定。 本标准负责起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：韩伟、谢小珏、王赢、袁辰刚。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T1944—2007。 行业标准信息服务平台 1 SN/T1944—2016 动物及其制品中细菌耐药性的测定 纸片扩散法 1范围 本标准规定了动物及其制品中细菌耐药性的纸片扩散检测方法 本标准适用于动物及其制品中分离的大肠埃希氏菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌耐药性的检测，其 他动物源性细菌的耐药性测定可参考执行本方法。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T4789.6食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验 GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 3定义和术语 3.1 细菌耐药性 antimicrobialresistance 细菌与抗菌药物反复接触后，对药物的敏感性逐渐减弱，甚至能抵抗而不被抑制和杀灭，细菌的这 种特性称为耐药性。通常通过药物敏感性试验（AntimicrobialSusceptibilityTesting，AST）进行测定， 其结果可用敏感（S）、中介（I)和耐药（R）等来表示。 3.2 敏感susceptible（S) 使用常规剂量时，细菌的生长繁殖被可达到的抗菌药物浓度水平抑制。 3.3 中介intermediate (I) 常规剂量的抗菌药物对细菌的疗效低于敏感菌株，药物在生理浓集部位有效或可使用高于正常剂 量得药物进行治疗。 3.4 耐药resistant（R） 细菌不能被常规剂量抗菌药物达到的浓度所抑制，和（或）证明抑菌环直径落在某些特定的细菌耐 药机制范围内。 3.5 纸片扩散法diskdiffusiontesting 一种定性药物敏感性试验方法。将含一定量的抗菌药物的纸片贴在已接种一定量的待测细菌的琼 脂平板上，经培养后，可在纸片周围出现抑菌环，以通过测量其大小来判定该细菌对该药物的敏感性，也 称Kindy-Bauer(KB)法。 1 SN/T 1944—2016 4设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 4.1培养箱：35℃±1℃。 4.2恒温摇床：35℃±1℃。 4.3 冰箱：0℃~8℃；-18℃以下。 4.4pH计：精度±0.1。 4.5无菌培养皿：直径90mm。 4.6灭菌棉拭子。 4.7McFlarland标准比浊管或比浊仪。 4.8L棒。 4.9 药敏纸片分配器。 4.10 游标卡尺：精度0.1mm。 4.11 半自动或自动抑菌环读取仪。 5培养基与试剂 5.1Mueller-Hinton琼脂(MHA):见附录A中A.1。 5.2胰酪陈大豆肉汤（TSB)：见A.2。 5.3胰酪陈大豆琼脂（TSA)：见A.3。 5.40.5麦氏单位硫酸标准比浊管：见A.4。 5.5质控菌株包括： a) 大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）ATCC25922； b) 大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）ATCC35218（仅用于β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合药物 的质控）； c) 金黄色葡萄球菌（Staphyfococcusaureus）ATCC25923； (P 色葡萄球菌测定）； 菌的测定）； f) 肺炎克雷伯氏菌（Klebsiellapneumoniae）ATCCBAA-1705（仅用于产碳青霉烯酶的肠杆菌的 测定)； g) 肺炎克雷伯氏菌（Klebsiellapneumoniae）ATCCBAA-1706（仅用于产碳青霉烯酶的肠杆菌的 测定）。 5.6 6商品化抗菌药物纸片，药物含量应与本标准一致。 6 测定方法 6.1 细菌的培养、分离和鉴定 金黄色葡萄球菌的增菌培养、分离和鉴定按GB4789.10进行。 沙门氏菌的增菌培养、分离和鉴定按GB4789.4进行 大肠埃希氏菌的增菌培养、分离和鉴定按GB/T4789.6进行。