SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1751.3—2011 进出口动物源性食品中喹诺酮类药物残留 量的测定 第3部分：高效液相色谱法 Determination of quinolone residues in foodstuffs of animal origin for import and export-Part 3:HPLCmethod 行业标准信息服务平台 2011-02-25发布 2011-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1751.3—2011 前言 SN/T1751《进出口动物源性食品中喹诺酮类药物残留量的测定》共分为3部分： 第1部分：微生物抑制法； 一第2部分：液相色谱-质谱/质谱法； 第3部分：高效液相色谱法。 本部分为SN/T1751的第3部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国东宁出人境检验检疫局和中华人民共 和国内蒙古出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：于静、马微、彭涛、安娟、严矛、郝静云。 行业标准信息服务平台 I SN/T1751.3—2011 进出口动物源性食品中喹诺酮类药物残留 量的测定第3部分：高效液相色谱法 1范围 SN/T1751的本部分规定了动物源性食品中15种喹诺酮药物残留量的高效液相色谱测定方法。 本部分适用于虾肉、鱼肉、鸡肉和奶粉中环丙沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、氟甲喹、诺氟沙 星、二氟沙星、麻保沙星、嗯喹酸、萘啶酸、培氟沙星、司帕沙星、奥比沙星、氟罗沙星和洛美沙星残留量的 测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 用磷酸盐缓冲液和乙睛提取试样中残留的喹诺酮药物，经正已烷去除油脂、C18和MAX固相萃取 柱净化后，采用高效液相色谱-荧光检测器和紫外检测器检测，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水或GB/T6682规定的一级水。 准信息服务平 4.1乙睛：色谱纯。 4.2甲醇：色谱纯。 4.3正已烷：色谱纯。 4.4十二水合磷酸钠。 4.5氢氧化钠。 4.6 磷酸。 25%氨水。 4.8甲酸。 4.9乙睛饱和正已烷溶液：100mL乙（4.1）中加人100mL正已烷（4.3），充分振荡后，静置分层，取 上层液体。 4.100.02mol/L磷酸溶液：准确量取1.4mL磷酸（4.6)于1L容量瓶中，用水定容至1L。 4.115mol/L氢氧化钠溶液：称取200g氢氧化钠（4.5），用水溶解并定容至1L。 4.12 磷酸钠缓冲溶液（50mmol/L，pH7.4土0.2）：称取19g十二水合磷酸钠（4.4），用水溶解并定容 至1L，加磷酸调节pH至7.4士0.2。 4.13样品提取液：180mL磷酸盐缓冲液（4.12）中加人20mL乙睛。 4.14 洗脱液1：取25mL25%氨水（4.7），加人75mL甲醇（4.2）。 1 SN/T 1751.3—2011 4.15洗脱液2：取4mL甲酸（4.8）加人96mL甲醇 4.16定容液：0.02mo1/L磷酸（4.10）十乙腈（80十20，体积比）。 4.17标准品：环丙沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、氟甲喹、诺氟沙星、二氟沙星、麻保沙星、喹 酸、萘啶酸、培氟沙星、司帕沙星、奥比沙星、氟罗沙星和洛美沙星，纯度99%。 4.18标准储备溶液：称取环丙沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、氟甲喹、诺氟沙星、二氟沙星、麻保 沙星、嗯喹酸、萘啶酸、培氟沙星、司帕沙星、奥比沙星和氟罗沙星的标准品（精确至0.1mg），用乙睛溶 解，配制成浓度为100μg/mL的标准储备溶液，一18℃以下避光保存。 4.19中间混合标准溶液：根据每种药物在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。依 据每种药物的混合标准液浓度及其标准储备液浓度，移取一定量的单个药物的标准储备液于10mL容 量瓶中，用乙睛定容至刻度，配制成浓度为10ug/mL的中间标准溶液，0℃～4℃避光保存。 4.20混合标准工作溶液：根据需要用乙睛稀释成适用浓度的标准工作溶液，一18℃以下避光保存。 4.22MAX阴离子交换固相萃取柱：6mL，500mg，或相当者。 4.23 微孔滤膜：0.2um，有机相 5仪器和设备 5.1液相色谱仪：配备紫外和荧光检测器。 5.2组织捣碎机。 5.3天平：感量为0.0001g和0.001g。 5.4pH计:±0.1。 5.5均质器：10000r/min。 行业标准信息服务平台 5.6振荡器。 5.77 离心机：10000r/min 5.8氮吹仪。 5.9涡旋混合器。 5. 10走 超声波水浴。 5.11 分液漏斗：50mL。 5.12 具塞离心管：聚四氟乙烯，50mL。 5.13 刻度试管：10mL。 6试样制备 6.1虾肉、鱼肉、鸡肉样品 从原始样品取出有代表性样品约500g，用组织碎机充分捣碎混匀，均分成两份，分别装人洁净容 器作为试样，密封，并标明标记。将试样置于一18℃以下避光保存。 6.2奶粉样品 从原始样品取出有代表性样品约500g，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样，密封，并标明标 记。将试样置于4℃避光保存。 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 2