SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1396—2015 代替SN/T1396—2004 弓形虫病检疫技术规范 Quarantine protocol for toxoplasmosis 行业标准信息服务平台 2015-09-02发布 2016-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业标准 弓形虫病检疫技术规范 SN/T1396-2015 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 务平台 北京市西城区三里河北街16号（100045) 总编室：（010)68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 1/16 印张1 字数26千字 2016年4月第一版 2016年4月第一次印刷 印数1-1100 * 书号：155066·2-29894 定价21.00元 SN/T1396—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1396—2004《弓形虫病间接血凝试验》，与SN/T1396—2004相比，主要技术变 化如下： 增加了临床诊断； 一增加了弓形虫分离及鉴定； 一增加了间接荧光抗体试验； 一增加了酶联免疫吸附试验； 增加了聚合酶链反应（PCR）、套式PCR和实时荧光PCR的技术要求 本标准参考国际动物卫生组织（OIE）《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（ManualofDiagnosticTests andVaccinesforTerrestrialAnimals)（2013)中2.9.10的相关内容编制。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖北出人境检验检疫局 本标准主要起草人：陈建军、杨武、曾宪东、冯汉利、徐家文、陈孝宇、郑剑、余浩。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T1396—2004。 行业标准信息服务平台 1 SN/T1396—2015 弓形虫病检疫技术规范 1范围 本标准规定了弓形虫病的临床诊断、弓形虫的分离与鉴定、间接荧光抗体试验、间接血球凝集试验， 酶联免疫吸附试验、聚合酶链反应（PCR）、套式PCR和实时荧光PCR的技术要求。 本标准适用于各类动物弓形虫病的诊断、进出口检疫及流行病学调查等。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 3 临床诊断 弓形虫病是由刚地弓形虫感染所引起的一种人兽共患传染病，各类温血动物对本病都具有易感性， 动物感染本病无明显的季节性，临床多表现为繁殖障碍、呼吸及神经系统症状，与其他很多疾病相似，如 猪感染本病初期，常出现稽留性高热、精神萎顿、食欲减退、腹式呼吸等症状，体温升至40.5℃～42℃； 妊娠母猪、母羊感染本病多导致流产、产死胎、胎儿畸形等繁殖障碍性症状；鸡则多表现为神经性症状。 具体病理变化和流行病学特征参见附录A。临床症状不能作为本病的确诊依据，而须经实验室检测出 病原体和特异性抗体才能确诊。 4 实验室诊断 4.1 实验操作生物安全要求 本标准所列各项实验操作应符合国家有关病原微生物实验室生物安全管理要求，具体防护措施及 准信息服 要求按GB19489执行。 4.2弓形虫的分离鉴定 4.2.1材料和试剂 4.2.1.1 器材：研钵，无菌石英砂，5mL注射器及针头，普通生物显微镜 4.2.1.2 双抗磷酸盐缓冲液（双抗PBS):0.3mol/L，pH7.4的PBS(配制方法见附录B中B.1)中加人 终浓度分别为100IU/mL和745IU/mL的青霉素和链霉素。 万 4.2.1.3蛋白酶K(50μg/mL)。 4.2.1.4健康实验鼠：清洁级KM、ICR或BALB/c实验小白鼠。 4.2.1.5姬姆萨染色液（配制方法见B.2）。 4.2.2样品的采集和处理 无菌采集2g~5g病畜的脑、胎盘、心、肝、肺、肾、骨骼肌等病料组织或5mL腹腔液，放人洁净组 1