SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1280—2014 代替SN/T1280—2003 国境口岸鼠疫检验规程 Inspection codes forplague at frontier port 行业标准信息服务平台 2014-04-09发布 2014-11-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1280—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1280—2003《国境口岸鼠疫检验规程》。 本标准与SN/T1280一2003相比，主要技术变化如下： 修改了规范性引用文件：“GB15991一1995”修改为“WS279”； 修改了要求：“专用实验室”修改为“卫生部《人间传染的病原微生物名录》规定的相应等级的生 物安全实验室”，“条件具备用聚合酶链式反应（PCR）”修改为“用鼠疫特异抗原和抗体检测及 基因检测”； 修改了检验程序； 修改了结果判定； 修改了附录A、附录B、附录D,附录B修改为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国内蒙古出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫 局和中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：王东胜、乔舜、魏怀波、田丽、孟东平、孙利。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1280一2003。 行业标准信息服务平台 I SN/T1280—2014 国境口岸鼠疫检验规程 1范围 本标准规定了国境口岸鼠疫检验的实验室生物安全规范、材料的采集、保存和运输、检验程序、结果 判定。 本标准适用于国境口岸检验检疫工作中鼠疫的实验室检验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 WS279鼠疫诊断标准 《人间传染的病原微生物名录》（卫生部） 《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（卫生部） 3要求 3.1良 鼠疫菌检验应在卫生部《人间传染的病原微生物名录》规定的相应等级的生物安全实验室内进行。 3.2检验人员应熟悉并遵守实验室管理制度、自身防护制度、技术操作规程等，见附录A。 3.3应两人以上同时进人实验室工作。 3.4及时准确做好检验的各项实验记录。 3.5用鼠疫特异抗原和抗体检测（见WS279）及基因检测（见附录B），进行口岸鼠疫的快速初步检验。 4准备 4.1设备和材料 天平；离心机、离心管；震荡器；温箱；显微镜；解剖盘、剪刀、短镊子；带盖白瓷缸；接种棒、白金耳；平 血；灭菌小试管；1mL注射器；血凝微量板、稀释棒；定量滴头。 4.2培养基和试剂 4.2.1鼠疫菌检验 95%乙醇；生理盐水；革兰氏、美兰染液溶血（0.1%）赫氏琼脂平板培养基（培养基的制备见附录C）； 龙胆紫［（1：10万）～（1：20万）亚硫酸钠（0.025%）平板或龙胆紫溶血平板培养基；鼠疫噬菌体。 4.2.2间接血凝试验（IHA） 应不低于1：40000；与假结核血清交叉滴定、滴度应不高于1：5；符合上两项规定的致敏血球为合格 诊断用血球，每一鼠疫季节开始前或更换致敏血球批号时应进行上述滴定 1 SN/T 1280—2014 4.2.2.21%正常兔血清盐水。 4.2.2.32.5%单宁酸血球。 4.2.2.4F1抗原液（50μg/mL~100μg/mL）。 4.2.3反向血凝试验（RIHA） 2.5%鼠疫抗体致敏血球；1%正常免血清盐水；鼠疫诊断血清。 疑似鼠疫材料的采取、保存和运输 按附录D的规定执行。 6检验程序 6.1 鼠疫菌检验 6.1.1镜检 6.1.1.1涂片 6.1.1.1.1取材腺、肝、脾、肺、心，用切面在洁净玻片上压印或涂成薄片；或取骨髓、脑脊液及各种渗出 液、痰，用接种环直接涂片。至少2张，室温下自然干燥，人体及自死动物材料至少涂4张片。 6.1.1.1.2用95%乙醇或乙醇、乙醚各半配制的固定液固定10min，取出自然干燥。 6.1.1.2染色 涂片进行革兰氏染色和美兰染色。 6.1.1.3 镜检 标准信息服务平台 发现革兰氏阴性、两极浓染、两端钝圆的短小球杆菌，为符合鼠疫菌的特点。注意腐败材料或陈旧 材料菌本身形态的变化。 6.1.2细菌培养 按WS279的规定执行。 6.1.3 鼠疫噬菌体裂解试验 按WS279的规定执行。 6.1.4元 动物接种 按WS279的规定执行。 6.2血清学检验 6.2.1 间接血凝试验（IHA) 按WS279的规定执行。 6.2.2 反向血凝试验（RIHA） 按WS279的规定执行。 2