SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0175—2010 代替SN0175—1992 进出口食品中弯曲菌的检测方法 Detection of Campylobacter spp. in food for import and export 行业标准信息服务平台 2010-03-02发布 2010-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0175—2010 前言 本标准代替SN0175一1992《出口食品中弯曲杆菌检验方法》。 本标准与SN0175一1992相比，主要变化如下： 修改和规范了“设备和材料”； 增加了蛋及蛋制品等产品的样品制备方法； 修改及完善了增菌培养方法； 增加了API鉴定试验； 增加了选择性培养基改良CCDA培养基。 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖南出入境检验检疫局，中华人民共和国中山出入境检验检疫 局，中华人民共和国广东出人境检验检疫局，中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：朱金国、莫瑾、蒋原、伍朝晖、唐连飞、朱中武、许龙岩、王志强、祝长青 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN0175—1992。 行业标准信息服务平台 1 SN/T0175—2010 进出口食品中弯曲菌的检测方法 1范围 本标准规定了进出口食品中弯曲菌的检测方法。 本标准适用于进出口食品中弯曲菌的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 GB19489实验室生物安全通用要求 3设备和材料 3.1微需氧条件及相关设备：最佳微需氧条件为5%氧气、10%二氧化碳和85%氮气，选择合适大小的 厌氧罐、密封效果好的密封盒中，或其他能保持微需氧条件的设备中放人微需氧产气袋（如：OXIOD公 司生产BR0060A或者CN0035A及同类型产品1），也可在微需氧恒温工作站中进行培养。 3.2 离心机：≤20000g。 3.3 灭菌离心瓶：250mL。 3.4具过滤网的无菌均质袋 3.5 相差显微镜、暗视野显微镜或光学显微镜10×，100X。 3. 6 载玻片和盖玻片。 3.7 恒温培养箱：25℃±1℃，30℃±1℃，36℃±1℃以及42℃±1℃。 3.8 灭菌培养皿：直径90mm。 3.9 乙酸铅条。 3.10 麦氏单位标准浊度。 3.11 4培养基和试剂 4.1培养基 4.1.1Bolton增菌肉汤：见第A.1章。 4.1.20.1%蛋白陈水：见A.1.4。 4.1.3弯曲菌分离培养基：见第A.2章。 4.1.4改良Skirrow氏培养基：见A.2.2。 4. 1.5 改良CCDA培养基：见A.2.1。 4.1.6 哥伦比亚血琼脂平板：见第A，3章。 4. 1.7 用于生化鉴定的改良半固体培养基：见第A.4章。 4.1.7.1中性红。 4.1.7.2甘氨酸。 4. 1. 7. 3 半胱氨酸-HC1。 1）给出这一信息是为了方便本标准的使用者，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 SN/T 0175—2010 4. 1. 7. 4 硝酸钾。 4. 1. 8 三糖铁琼脂斜面：见第A.5章。 4.1.9改良O-F葡萄糖培养基：见第A.6章。 4. 1. 10 半固体储存培养基：见第A.7章。 4.1.11冷冻培养基：见第A.8章。 4.2试剂 4.2.1 马尿酸盐和节三酮反应试剂：见第A.9章。 4. 2. 2 萘啶酮酸和头孢菌素钠：见第A.1章。 4.2.3 3%过氧化氢。 4.2.4 冻融马羊)血。 4.2.5 氧化酶试剂：见第A.10章。 4.2. 6 革兰氏染色试剂：见第A.11章。 4.2.7 硝酸盐检测试剂A和B:见第A.12章。 4. 2.8 APICAMPY鉴定条。 5 检测程序 弯曲菌检测程序见图1。 制备样品 接种Bolton肉汤（微需氧） 前增菌 增菌 分离 接种Skirrow和改良CCDA平板（微需氧） 镜检 行业木 哥伦比亚血平板（微需氧）培养 氧化酶试验 信 阳性 阴性 0.1%甘氨酸生长试验 温度耐受试验 革兰氏染色 三糖铁反应试验 生化试验或 弯曲菌阴性 API鉴定试验 报告 报告 图1弯曲菌检测程序图