SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 01742011 代替SN0174—1992 出口食品小肠结肠炎耶尔森氏菌 检验方法 Determination of Yersinia enterocolitica in food for export 行业标准信息服务平台 2011-05-31发布 2011-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0174—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN0174一1992《出口食品小肠结肠炎耶尔森氏菌检验方法》。 本标准与SN0174—1992相比，主要技术变化如下： 适用范围由出口冷冻和生鲜的猪肉、猪舌、鸡肉、虾和虾仁扩大至食品； 样品增菌培养方法：由改良磷酸盐缓冲液培养、氢氧化钾处理、改良酵母浸汁-孟加拉红肉汤培 养改为蛋白陈-山梨醇胆盐肉汤及氯苯酚-替卡西林-氯酸钾肉汤分别培养； 分离培养：使用的培养基由含吐温-80的亚硫酸铋琼脂平板及麦康凯琼脂平板改为头孢磺 氯苯酚-新生霉素琼脂和沙门氏菌-志贺氏菌琼脂（含脱氧胆盐氯化钠）； 鉴定：对小肠结肠炎耶尔森氏菌鉴定的生化试验增加了吲哚、氧化酶、海藻糖、木糖及吐温酯酶 试验，去除了山梨醇、L-阿拉伯糖试验； 在附录B、C、D中增加小肠结肠炎耶尔森氏菌与其他菌的生化区别、小肠结肠炎耶尔森菌生物 型、致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌生化检测方法。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：张霞、张宏伟、张海英、刘培、吴冬雪、高旗利、郑文杰、曲鹏。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ZBX04003—1986,SN0174—1992。 行业标准信息服务平台 I SN/T 0174—2011 出口食品小肠结肠炎耶尔森氏菌 检验方法 1范围 本标准规定了食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验方法。 本标准适用于食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌检验，动物饲料及食品生产和处理领域的环境样本可 参照使用。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.11 食品安全国家标准食品卫生微生物学检验总则 GB4789.2食品安全国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定 GB/T 4789.171 食品卫生微生物学检验肉与肉制品检验 GB4789.18食品安全国家标准食品卫生微生物学检验乳与乳制品检验 GB/T4789.191 食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验 GB/T4789.20 食品卫生微生物学检验水产食品检验 GB/T 4789.22 食品卫生微生物学检验 调味品检验 GB/T 4789.24 食品卫生微生物学检验糖果、糕点、蜜钱检验 SN/T1538.1 培养基制备指南 第1部分：实验室培养基制备质量保证通则 SN/T1538.2培养基制备指南 第2部分：培养基性能测试实用指南 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 致病性小肠结肠炎耶尔森菌 presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica 按照本标准进行检测，在固体选择性培养基上形成典型菌落，并具有致病性的生化特性的嗜冷细菌 推定为致病性小肠结肠炎耶尔森菌。 3.2 致病性小肠结肠炎耶尔森菌的检测presumptivepathogenicYersinia enterocolitica 按照本标准对样品进行检测，以确定样品中是否存在致病性小肠结肠炎耶尔森菌的检测步骤。 4设备和材料 4.1培养箱:22℃±1℃.25℃±1℃,30℃±1℃,37℃±1℃。 4.3吸管：10mL及1mL，分刻度0.1mL。 1 SN/T 0174—2011 4. 4 试管:18mmX180mm,9mmX180mm,12mmX50mm。 4. 5 锥形瓶或烧瓶。 4. 6 灭菌平皿：直径90mm~100mm。 4.7 接种环：3mm直径。 4.8pH计：25℃精确度在土0.1pH单位。 4.9照明：斜射照明。 4. 10 放大镜或立体显微镜。 4.11 蠕动搅拌机。 5培养基和试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。为保证培养基的质量，应按SN/T1538.1和 SN/T1538.2进行培养基的制备与性能测试。 5.1蛋白陈-山梨醇胆盐（PSB)肉汤：见A.1。 5.2 氯苯酚-替卡西林-氯酸钾（ITC)肉汤：见A,2。 5. 3 头孢磺啶-氯苯酚-新生霉素（CIN)琼脂：见A.3。 5. 4 沙门氏菌-志贺氏菌琼脂（含脱氧胆盐氯化钠）（SSDC琼脂）：见A.4。 5.5 营养琼脂：见A.5。 5.6 尿素吲哚培养基：见A.6。 5.7 科瓦奇试剂：见A.7。 5.8 双糖铁琼脂：见A.8。 5.9 氧化酶试剂：见A.9。 5. 10 赖氨酸脱羧培养基：见A.10。 5. 11 鸟氨酸脱羧培养基：见A.11。 5. 12 糖类发酵培养基：见A.12。 5.13 西蒙氏柠檬酸盐培养基：见A.13。 5. 14 吐温酯酶培养基：见A.14。 5.15 胆汁-七叶苷琼脂：见A.15。 5.16 酪蛋白大豆琼脂：见A16。 5. 17 吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂：见A.17 硫酸铁铵溶液：见A.18。 5.18 信息服务平台 5. 19 含镁和草酸的酪蛋白大豆琼脂：见A.19。 5.20 盐水：见A.20。 5.21 氢氧化钾盐溶液：见A.21。 5.22 牛肉浸膏：见A.22。 5.23 无菌甘油：见A.23。 6取样 保证实验室收到的样本真正具有代表性，在运输储存中没有损坏改变。虽然耶尔森氏菌是由冷冻 产品中复活的，但是不建议在试验分析前冷冻样品。取样不是本标准规定方法的一部分，样品采集和处 理见GB4789.1，样品采集后应尽快送检。 2