SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4675.22—2016 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定 比色法 Determination of total sulfur dioxide in wine for export- Colorimetric method 行业标准信息服务平台 2016-12-12发布 2017-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4675.22—2016 前言 SN/T4675《出口葡萄酒品质分析方法》共分为30个部分： SN/T 4675.1 出口葡萄酒中甘油的测定酶法； SN/T 4675.2 出口葡萄酒中2,3-丁二醇的测定气相色谱法； SN/T4675.3 出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定； -SN/T4675.4 出口葡萄酒中乳酸的测定酶法； SN/T4675.5 出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法； -SN/T4675.6 出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定； SN/T 4675.7 出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.8 出口葡萄酒中5-羟甲基糠醛的测定液相色谱法； SN/T4675.9 出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.10 出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.11 出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法； SN/T4675.12 出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法； SN/T 4675.13 出口葡萄酒中2，4，6-三氯苯甲醚残留量的测定气相色谱-质谱法； SN/T 4675.14 出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.15 出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法； SN/T 4675.16 出口葡萄酒中富马酸的测定液相色谱-质谱/质谱法； SN/T 4675.17 出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法； SN/T4675.18 二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法； 出口葡萄酒中 SN/T 4675.19 出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定； SN/T 4675.20 出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法： SN/T 4675.21 出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法； SN/T 4675.22 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法； SN/T4675.23 出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法； SN/T4675.24 出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法； SN/T 4675.25 出口葡萄酒颜色的测定CIE1976（L*a*b*）色空间法； SN/T 4675.26 出口葡萄酒浊度的测定散射光法； SN/T4675.27 出口葡萄酒碱性灰分的测定； SN/T 4675.28 出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数； SN/T4675.29 出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法； 出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。 SN/T4675.30 本部分为SN/T4675的第22部分 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国广东出入境检验检 疫局。 本部分主要起草人：陈章庭、倪昕路、秦宇雯、汪侃晨、章孟凡、杨振宇、谌鸿超、樊彦莉、王诚、郭德华、 刘青、李志勇。 1 SN/T4675.22—2016 出口葡萄酒中总二氧化硫的测定 比色法 1范围 本部分适用于葡萄酒中总二氧化硫含量的测定 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 3方法提要 试样中二氧化硫被甲醛缓冲溶液吸收后，生成稳定的羟甲基磺酸加成化合物，在样品溶液中加入氢 氧化钠使加成化合物分解，释放出的二氧化硫与副玫瑰苯胺、甲醛作用，生成紫红色化合物，在波长 577nm处其吸光度与二氧化硫含量成比例。外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水 4.1 氢氧化钠。 4.2 反式1,2-环已二胺四乙酸（trans-1，2-cyclohexylenedinitrilo)tetraaceticacid，简称CDTA。 4.3 乙二胺四乙酸二钠盐(CuHiaN,O.Na2·2HzO)。 4.4 氨磺酸。 4.5 甲醛溶液：36%~38%。 邻苯二甲酸氢钾。 4.7 盐酸副玫瑰苯胺（pararosaniline，简称PRA，即副品红或对品红）。 4.8石 磷酸：85%。 4.9 盐酸：36%~38%。 4.10 二氧化硫标准品：亚硫酸钠（Na2SO）（分析纯，≥98%，CAS号：7757-83-7）需标定浓度后使用。 或直接使用有证书的标准溶液。 4.11氢氧化钠溶液（1.5mol/L）：称取6.0g氢氧化钠，溶于100mL水中。 4.12环已二胺四乙酸二钠溶液（0.05mol/L）：称取1.82g反式1,2-环已二胺四乙酸，加人氢氧化钠溶 液（4.11)6.5mL，用水稀释至100mL。 4.13乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-2Na）溶液（0.50g/L）：称取0.25g乙二胺四乙酸二钠盐，溶于 500mL新煮沸并已冷却的水中。临用时现配 4.14氨磺酸钠溶液[c（NaH,NSO）=6.0g/LJ：称取0.36g氢氧化钠，置于100mL烧杯中，用水溶 1 SN/T 4675.22—2016 解，稀释至100mL。称取0.60g氨磺酸[HzNSO,HJ，加入上述氢氧化钠溶液中，用玻璃棒搅拌至完全 溶解。 取2.04g邻苯二甲酸氢钾，溶于少量水中；将三种溶液混合，再用水稀释至100mL，贮于4℃～8℃可 保存1年。 4.17盐酸副玫瑰苯胺贮备液：c(PRA）=2.0g/L：称取1g盐酸副玫瑰苯胺（4.7)于研钵中，加少量水 研磨使溶解并稀释至100mL。取出20mL，置于100mL容量瓶中，加盐酸（1十1），充分摇匀后使溶液 由红变黄，再加水稀释至刻度，混匀备用。 4.18盐酸副玫瑰苯胺溶液，c（PRA）=0.50g/L吸取25mL副玫瑰苯胺贮备液（4.17）于100mL容量 瓶中，加30mL85%的浓磷酸，12mL浓盐酸，用水稀释至刻度，摇匀，放置过夜后使用。避光密封 保存。 4.19亚硫酸钠溶液，c（NazSO：）=1g/L：称取0.2g亚硫酸钠，溶于200mLEDTA-2Na（4.13）溶液 中，缓缓摇匀以防充氧，使其溶解。放置2h～3h后标定，标定方法见附录A。此溶液每毫升含 320μg~400μg二氧化硫 4.20二氧化硫标准贮备溶液：吸取2.00mL亚硫酸钠溶液（4.19）加到一个已装有40mL~50mL甲 醛吸收储备液（4.15）的100mL容量瓶中，并用甲醛吸收储备液（4.15）稀释至刻度，摇匀。临用现配。 4.21二氧化硫标准使用溶液，c（SO2）=1.00μg/mL：吸取适量二氧化硫标准贮备溶液（4.20），用甲醛 吸收液（4.16）稀释成每毫升含1.00μg二氧化硫的标准使用溶液。临用现配。 5仪器和设备 5.1 分光光度计：波长577nm，光程1cm比色皿，或相当者。 5.2 MCXSPE小柱：60mg，3mL；或相同性质的强阳离子交换小柱。 5.3水平振荡器。 5.4超声波清洗器。 行业标准 6测定步骤 6.1试样制备 起泡葡萄酒需预先脱气。将100mL试样倒入带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声 信息服务平 波水浴脱气，直至无气体逸出。 6.2试样保存 试样置于常温密闭条件下保存。 6.3标准曲线绘制 分别移取二氧化硫标准使用溶液（4.21)0mL，0.50mL，1.00mL，2.00mL，3.00mL，5.00mL于 15mL刻度试管中，用水定容至5.0mL，在各管中分别加入0.5mL甲醛缓冲吸收液（4.16）。加入 溶液在20℃土3℃环境下显色20min。显色完成后，放人比色杯中，于波长577nm条件下，以水为参 比测量吸光度。以空白校正后各管的吸光度为纵坐标，以二氧化硫的含量（g）为横坐标，建立校准 曲线。 2