SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0212.1—2014 代替SN/T0212.1—1993 出口动物源食品中二氯二甲吡啶酚 残留量的测定 Determination of clopidol residues in foodstuffs of animal origin for export 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0212.1—2014 前言 SN/T0212共分为3个部分： 第1部分：出口动物源食品中二氯二甲吡啶酚残留量的测定； 第3部分：出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法 丙酰化-气相色谱法 本部分为SN/T0212的第1部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分代替SN/T0212.1一1993《出口禽肉中二氯二甲吡啶酚残留量检验方法 液相色谱法》，与 SN/T0212.1—1993相比，主要变化如下： 修改了标准的名称； 适用范围由冻鸡增加为鸡肉、猪肉、牛肉、鱼肉、鸡肝、鸡肾、鸡爪、鸡蛋和牛奶； 一将原标准的液相色谱法确定为本标准的第一法； 增加了第二法液相色谱-质谱/质谱法； 一增加了附录A（资料性附录）“二氯二甲吡啶酚标准溶液高效液相色谱图”。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、湖南省检验检疫科学技术研究院。 本部分主要起草人：王美玲、颜鸿飞、付善良、朱绍华、龚强、焦艳娜、李拥军、戴华。 本部分的历次版本发布情况为： SN/T 0212.1—1993。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 0212.1—2014 出口动物源食品中二氯二甲吡啶酚 残留量的测定 1范围 SN/T0212的本部分规定了动物源食品中二氯二甲吡啶酚残留量的测定方法。 本部分第一法液相色谱法适用于冻鸡中二氯二甲吡啶酚残留量的测定，第二法液相色谱-质谱/质 谱法适用于鸡肉、猪肉、牛肉、鱼肉、鸡肝、鸡肾、鸡爪、鸡蛋和牛奶中二氯二甲吡啶酚残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 第一法液相色谱法 3方法提要 用乙睛提取试样中二氯二甲吡啶酚，经氧化铝柱、阴离子交换柱净化，用液相色谱仪测定二氯二甲 吡啶酚残留量，外标法定量。 4 试剂和材料 试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水， 4.1乙：液相色谱级。 4.2甲醇：液相色谱级。 4.3乙酸钠水溶液（100g/L）：称取100.0g乙酸钠于1000mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混 匀后备用。 4.4乙酸甲醇溶液（0.25%）：准确移取0.25mL乙酸于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度， 混匀后备用。 4.5乙酸甲醇溶液（0.5%）：准确移取0.5mL乙酸于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混 匀后备用。 4.6饱和硝酸银丙酮溶液。 4.7无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于密封瓶中。 4.8氧化铝：层析用，中性，70目～230目。 4.9阴离子交换树脂：Dowex1-X8,100目～200目，氯离子型。使用前按下列方法转换成乙酸根型。 将100gDowex1-X8树脂浸入100g/L乙酸钠水溶液中，不时搅拌，浸泡2h后，倾入布氏漏斗中，用 500mL100g/L乙酸钠水溶液（4.3）淋洗至仅存痕量氯离子（用饱和硝酸银丙酮溶液检验，呈微混浊）， 1 SN/T 0212.1—2014 再用水淋洗至无氯离子，再依次用200mL下列溶液淋洗：甲醇、0.25%乙酸甲醇溶液（4.4）、甲醇。淋洗 后，贮存于试剂瓶中，加甲醇浸泡备用。 4.10标准备液：称取10.0mg二氯二甲吡啶酚（含量>99.0%），用甲醇溶解并定容至100mL，即为 100ug/mL二氯二甲吡啶酚标准贮备液 4.11标准工作溶液：根据需要由标准贮备液用甲醇逐级稀释成适当浓度的标准工作溶液。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2组织捣碎机。 5.3快速混匀器或匀浆机。 5.4多功能微量化样品处理仪或其他相当的仪器。 5.5氧化铝层析柱：30cm×1.8cm（内径），下填玻璃棉塞，柱内装约三分之一甲醇，缓缓加入15g氧化 铝，用20mL甲醇预洗柱子。 5.6阴离子树脂交换柱：17cm×1cm（内径），下填玻璃棉塞，加入阴离子交换树脂（4.9），使沉降后高 约2cm~3cm，用甲醇清洗，使用前，再依次用20mL0.5%乙酸甲醇溶液（4.5）和20mL甲醇洗涤。 5.7离心机：4000r/min。 5.8微量可调移液管：40μL200μL，200μL~1000μL。 5.9离心管：50mL。 5.10高速离心机：14000r/min。 6试样制备与保存 内，密封并标明标记，于一18℃下冷冻保存 在制样的操作过程中，应防正样品受到污染或发生残留物含量的变化 7测定步骤 7.1提取及净化 称取约5g（精确至0.01g）试样和5g无水硫酸钠于50mL离心管中，加人25mL乙睛，于快速混 匀器或匀浆机上匀浆2min，在离心机上以3000r/min离心2min。将上清液倾入下接阴离子交换柱 的氧化铝柱中，使提取液通过两个净化柱净化。再用20mL乙睛提取滤渣一次，离心后同样将上清液 倾人氧化铝柱中净化。待提取液全部过柱后，用20mL甲醇淋洗两个柱子，至此，弃去全部淋洗液。取 下氧化铝柱，将25mL离心管置于阴离子交换柱下，用20mL0.5%乙酸甲醇溶液（4.5）洗脱二氯二甲吡啶 酚。于多功能微量化样品处理仪上60℃蒸干，以0.5mL甲醇溶解残渣，经高速离心（14000r/min） 3min后，供液相色谱测定。 7.2测定条件 7.2.1液相色谱条件 液相色谱条件如下： a) 色谱柱：Cl8柱，250mmX4.6mm（内径），粒度5μm或相当者； 2