SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4258—2015 出口食品中水溶性维生素的测定方法 Determination of water-soluble vitamins in foods for export 行业标准信息服务平台 2015-05-26发布 2016-01-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4258—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河北出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：艾连峰、段永生、王敬、郭春海、马育松、宋歌、曲栗。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4258—2015 出口食品中水溶性维生素的测定方法 1范围 本标准规定了食品中维生素B（硫胺素）、B（核黄素）、B（烟酸、烟酰胺）、B,（泛酸）、B（吡哆醇、吡 哆醛、吡哆胺）、叶酸和Bi2（钻胺素）的液相色谱-质谱/质谱测定方法和维生素Vc(L-抗坏血酸）的高效 液相色谱测定方法。 本标准适用于果汁、奶粉、含乳饮料、大米、饼干和果冻中维生素B（硫胺素）、Bz（核黄素）、B（烟 酸、烟酰胺）、B（泛酸）、B（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）、叶酸和B12（钴胺素）的测定和确证；适用于果汁、 奶粉、含乳饮料、大米、果泥和果冻中维生素Vc(L-抗坏血酸）的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 第一部分 食品中水溶性维生素B,（硫胺素）、B2（核黄素）、B3（烟酸、烟酰胺）、 Bs（泛酸）、B（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）和叶酸的测定 3原理 试样中的维生素B（硫胺素）、维生素B,（核黄素）、维生素B（烟酸、烟酰胺）、维生素B（泛酸）、维 生素B（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）和叶酸用盐酸溶液、三氯乙酸溶液或温水（等电点法）提取，过膜后，用 液相色谱-质谱/质谱仪检测，内标法定量 试剂和材料 慧服务平台 除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇:HPLC级。 4.2 2甲酸：HPLC级。 4.3 乙酸铵：HPLC级 4.4 氨水。 4.5 盐酸。 4.6 三氯乙酸。 4.7 氢氧化钠。 4.81 BHT（二丁基羟基甲苯）：纯度大于等于99.3%，一18℃冷冻储藏。 4.9 0.1%甲酸溶液（体积分数）：量取0.1mL甲酸（4.2），用水定容至100mL。 4.1010mmol/L乙酸铵（pH=6.3）溶液：0.39g乙酸铵（4.3）加水溶解至500mL，混匀，用0.1%甲酸 溶液（4.9）调节至pH=6.3。 1 SN/T 4258—2015 4.11 0.01mol/L盐酸溶液：量取900μL的盐酸（4.5），用水定容至1000mL，混匀。 4.125mol/L盐酸溶液：量取45mL的盐酸（4.5），用水定容至100mL，混匀。 4.13 5mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠（4.7），溶于100mL水中，混匀。 4.14 40g/L三氯乙酸溶液：称取40g三氯乙酸（4.6），溶于1000mL水中，混匀。 4.151%氨水溶液（体积分数）：量取1mL的氨水（4.4），用水定容至100mL，混匀。 4.161mg/mLBHT溶液：称取10mgBHT（4.8），溶于10mL甲醇（4.1）中，混匀。 4.17维生素标准物质：维生素B（硫胺素）、维生素Bz（核黄素）、维生素B（烟酸、烟酰胺）、维生素Bs （泛酸）、维生素B（吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺）、叶酸；内标物质：D4-烟酸、D4-烟酰胺、甲氨蝶呤和乙酰苯 胺的纯度均为大于等于95%，避光冷藏。各化合物基本信息参见附录A表A.1。 4.18标准储备液：精确称取适量标准品（4.17），配制成1mg/mL（维生素Bz的浓度为0.1mg/mL）的 液4℃避光保存，叶酸储备液保存期为4d，其他保持期为6d。 4.19标准工作液：根据需要用0.01mol/L盐酸溶液（4.11)将标准储备液（4.18)逐级稀释，配制成一系 列标准工作液，现用现配。 4.20内标储备液：准确称取适量的D4-烟酸、D4-烟酰胺、甲氨蝶呤和乙酰苯胺，分别用甲醇（4,1）配制 成500μg/mL的标准储备液，4℃以下避光保存。 4.21内标工作液：根据需要移取适量内标储备液（4.20），用甲醇（4.1）配制成50μg/mL的标准工作 液，现用现配 4.22微孔滤膜：0.22μm，水系。 5仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 5.2分析天平：感量为0.01g和0.1mg 5.3组织捣碎机。 5.4离心机：转速不小于4000r/min。 5.5均质器：转速不小于15000r/min 5.6涡旋混合器。 标准信息服务平台 5.7走 超声波清洗器。 5.8 聚丙烯具塞离心管：50mL。 5.9 9棕色容量瓶：10mL，25mL和100 6试样制备与保存 6.1制样要求 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 6.2试样的制备 取同一批次3个完整独立包装样品（固体样品不少于200g，液体样品不少于200mL），固体或半固 体样品粉碎混勾，液体样品混合均匀，分成两份，分别装人洁净容器内，一份作为试样供检测用，另一份 作为留样保存并做好标识。 2