SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2472—2010 日本乙型脑炎检疫技术规范 Protocol of quarantine technique for Japanese encephalitis 行业标准信息服务平台 2010-01-10发布 2010-07-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2472—2010 目 前言 1 范围 2规范性引用文件 3 概述 4诊断技术 5综合判定· 15 附录A（规范性附录） 试剂配制· 16 附录B（规范性附录） 感染乳鼠脑组织制备血凝素抗原 19 行业标准信息服务平台 SN/T 2472—2010 前 言 本标准的附录A、附录B均为规范性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准的起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：石建平、孟日增、肖成蕊、王伟利、李树清。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T 2472—2010 日本乙型脑炎检疫技术规范 1范围 本标准规定了日本乙型脑炎病毒的分离与鉴定、RT-PCR方法、乳胶凝集试验、间接免疫荧光试验、 蚀斑减数试验、血凝抑制试验、补体结合试验等实验室检疫技术规范， 本标准适用于马属动物和猪日本乙型脑炎的诊断与检疫 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为该标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准， GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3概述 日本乙型脑炎（Janpaneseencephalitis）又名流行性乙型脑炎，简称乙脑，是由日本乙型脑炎病毒引 起的一种急性人兽共患传染病。蚊虫为传播媒介。在人和马呈现脑炎症状，猪表现流产、死胎和罩丸 炎，其他家畜和家禽大多呈隐性感染。有明显的季节性。本病分布很广，主要存在亚洲地区，给人畜健 康和国民经济造成很大的危害和损失。 引起本病的病原体为日本乙型脑炎病毒（Japaneseencephalitisvirus）属于黄病毒科（Flaviviridae）、 黄病毒属（Flavivirus），是一种球形单股RNA病毒，病毒粒子呈球形，有脂蛋白的囊膜，囊膜上有纤突， 具有血凝活性，能凝集鸡、鸭、鹅及绵羊红细胞。病毒对外界抵抗力不强，对化学药品较敏感，常用消毒 药都有良好的灭活作用，对胰酶、乙醚、三氯甲烷等亦敏感。 小鼠是最常用来分离和繁殖病毒的实验动物，各种日龄的小鼠都有感受性，但以1日龄～3日龄的 乳鼠最易感。小鼠脑内接种病料后经2d～4d开始发病，表现松毛，失去光泽并于1d～2d内死亡。 3～4周龄的小鼠经脑接种后4d～10d发病。大鼠亦可感染发病。豚鼠、兔、鸡都不易感。病毒最适宜 在鸡胚卵黄囊内繁殖，此外病毒亦可在鸡胚成纤维细胞、猪肾或仓鼠肾细胞、vero细胞、MDBK细胞和 蚊细胞上增殖，并产生细胞病变和形成空斑，故可用来繁殖和滴定病毒。 日本乙型脑炎的诊断方法包括临床综合诊断，病原学诊断和血清学试验。进行病毒分离与鉴定时， 要求所有样品处理应于可保证生物安全的相应级别实验室内进行操作；处理样品使用过的容器、物品、 实验材料均应经有效消毒处理后方可运离实验室 4诊断技术 4.1临床综合诊断 日本乙型脑炎在亚热带和温带地区有明显的季节性，流行集中于夏未秋初，呈散发性发生，多发生 于幼龄动物，马有明显的脑炎症状，表现沉郁、兴奋、麻痹或沉郁与兴奋交替出现。怀孕母猪发生流产， 公猪发生睾丸炎，取死后动物的大脑皮质、丘脑和海马角进行组织学检查，发现非化性脑炎变化等，可 作为初步诊断依据。 1