SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1940—2007 进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法 Determination of ochratoxin A in foods for import and export 行业标准信息服务平台 2007-08-06发布 2008-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1940—2007 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、北京中检维康技术有限公司、上海博尼 生物科技有限公司。 本标准主要起草人：褚庆华、郭德华、王敏、王雄、沈建英。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T 1940—2007 进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法 1范围 方法。 本标准仲裁法适用于小麦、大麦、玉米、葡萄酒、黄酒、啤酒、葡萄干、胡椒粒/粉中赭曲霉毒素A的 测定。 本标准快速法适用于小麦、大麦、玉米、白葡萄酒、黄酒、啤酒、葡萄干、白胡椒粒/粉中赭曲霉毒素A 的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修改版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是 否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18979食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法 SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法 SN/T0961进出口葡萄干检验方法 3样品制备 3.1样品数量 3.1.1小麦、大麦、玉米：原始样品数量应不少于4kg，按照SN/T0800.1的规定缩分至1kg作为试 验样品。 3.1.2胡椒粒/粉、葡萄干：样品数量应不少于1kg。 3.1.3葡萄酒、黄酒、啤酒：样品量应不少于1000mL。 3.2样品制备 3.2.1小麦、大麦、玉米、胡椒粒：以粉碎机（4.3.2）全部粉碎并通过1mm圆孔筛。粉碎试样置于广 口瓶中混匀备用并标明标记。 3.2.2葡萄干：按照SN/T0961的规定制备。粉碎试样置于广口瓶中混匀备用并标明标记。 念服务平 3.2.3啤酒：使用前置于0℃～4℃冰箱冷藏1h，启盖，倒人锥形瓶中在振荡器（4.3.3）上振摇至泡沫 消失。以塑料薄膜封口备用并标明标记。 3.2.4试样在制备过程中，应防止样品受到污染 4免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法（仲裁法） 4.1方法提要 试样经过甲醇十水溶液或碳酸氢钠溶液提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有赭曲霉毒素A 特异抗体的免疫亲和柱层析净化，以甲醇洗脱，洗脱液供带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标 法定量。 4.2试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中二级用水要求。 1 SN/T 1940—2007 4.2. 1 甲醇：HPLC级。 4. 2. 2 聚乙二醇（polyethyleneglycol，分子量8000）。 4.2.3氯化钠。 4.2.4碳酸氢钠。 4.2.5 磷酸氢二钠。 4.2.6 磷酸二氢钾。 4.2.7 氯化钾。 4.2.8 浓盐酸。 4. 2. 9 吐温-20(Tween-20)。 4.2.10 乙腈：HPLC级。 4.2. 11 磷酸钠。 4. 2. 12 十六烷基三甲基溴化铵（C-tab）。 4. 2. 13 甲醇十水（8+2）：取80mL甲醇（4.2.1）加20mL水。 4.2. 14 聚乙二醇-碳酸氢钠溶液：溶解10g聚乙二醇（4.2.2）、50g碳酸氢钠（4.2.4）于约950mL水 中，并用水稀释到1L。 4.2.15碳酸氢钠溶液：称取1g碳酸氢钠（4.2.4），用水溶解并稀释到100mL。 4.2.16氯化钠-碳酸氢钠溶液：溶解25g氯化钠（4.2.3）、5g碳酸氢钠（4.2.4）于约950mL水中，并 用水稀释到1 L。 （4.2.6）和0.2g氯化钾（4.2.7)溶解于约900mL水中，用浓盐酸（4.2.8)调节pH至7.0，用水稀释至 1 L。 4.2.18淋洗缓冲液A：称取25g氯化钠（4.2.3）、5g碳酸氢钠（4.2.4)溶于水中，加入0.1mL吐温-20 （4.2.9）,用水稀释至1L。 4.2.19淋洗缓冲液B：在1000mL磷酸缓冲溶液（4.2.17)中加入1.0mL吐温-20（4.2.9）。 4.2.20 磷酸钠溶液：0.012mol/L,调节pH至7.5。 4.2.21 猪曲霉毒素A标准品：纯度大于99%。 4. 2. 22 赭曲霉毒素A标准储备溶液：用甲醇（4.2.1)配制0.100mg/mL的赭曲霉毒素A标准储备 液，保存于4℃冰箱备用。 4.2.23赭曲霉毒素A标准工作溶液：准确移取适量的赭曲霉毒素A标准储备液（4.2.21），用甲醇 （4.2.1)稀释成标准工作溶液。 4.2.24赭曲霉毒素A免疫亲和柱。 4.2.25 槽纹折叠滤纸，无荧光特性。 慈服务平台 4.2.26 4.2.27 玻璃试管，无荧光特性。 4.3仪器设备 4.3.1高效液相色谱仪，带荧光检测器。 4.3.2粉碎机或相当的设备。 4.3.3水平方向振荡器，回转式或往复式。 4.3.4高速均质器：18000r/min~22000r/min，或相当的设备。 4.3.5台式离心机，最大转速不低于4000r/min。 4. 3. 6 玻璃注射器：10mL。 4.3.7 空气压力泵。 4.3.8微量进样器：100μL。 2