ICS 65.120.20 B 46 备案号：53569-2017 内 蒙 DB15 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1172—2017 奶牛粗饲料品质评定-GI2008 法 Evaluation of Forage Quality for Dairy Cows-Grading Index （GI2008）Method 2017-02-25 发布 内蒙古自治区质量技术监督局 2017-05-25 实施 发 布 DB15/T 1172—2017 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语与定义 ........................................................................ 1 4 方法原理 .......................................................................... 2 5 评定方法 .......................................................................... 2 I DB15/T 1172—2017 前 言 本标准按GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本标准由内蒙古自治区农牧业厅归口。 本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古赤峰市农牧科学研究院、内蒙古家畜改良站。 本标准主要起草人：卢德勋、胡红莲、高民、红敏、卢媛、马燕芬、杜瑞平、宋利文、张兴夫、羿 静。 II DB15/T 1172—2017 奶牛粗饲料品质评定-GI2008 法 1 范围 本标准规定了分级指数（GI2008）的测定、计算方法以及利用GI2008对奶牛粗饲料品质评定分级的方 法。 本标准适用于奶牛饲用的各种粗饲料品质评定和分级。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6432 饲料中粗蛋白测定方法 GB/T 6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 GB/T 20806 饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定 GB/T 23387 饲草营养品质评定 GI法 NY/T 1459 饲料中酸性洗涤纤维的测定 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 分级指数 grading index（GI） 对粗饲料的粗蛋白（CP）和中性洗涤纤维（NDF）含量经过校正后，粗饲料的可利用能的随意进 食量，单位为兆焦每天（MJ/d） 。 3.2 粗饲料 forages 用于饲喂奶牛的各种鲜草、干草、农作物秸秆和青贮饲料。 3.2.1 禾本科牧草 legumes 由禾本科饲用植物组成的牧草类群。 1 DB15/T 1172—2017 3.2.2 豆科牧草 grasses 由豆科饲用植物组成的牧草类群。 3.2.3 秸秆 straws 各种作物收获籽实后植株的剩余部分，主要包括茎、叶等。 3.2.4 玉米青贮 corn silage 将新鲜的青刈玉米切碎装入青贮设施内，隔绝空气，在厌氧条件下经乳酸菌发酵制成的青贮料。 3.3 粗饲料品质 forage nutritional quality 粗饲料能满足动物理想水平生产性能的综合能力。它是由粗饲料的营养价值和随意采食量大小所决 定。 4 方法原理 根据粗饲料中有效能值和奶牛粗饲料随意采食量计算可采食有效能值，并对粗饲料中可消化粗蛋白 和中性洗涤纤维的影响加以校正，对粗饲料品质进行整体评定。 5 评定方法 5.1 评定步骤 5.1.1 粗饲料采样方法 按照GB/T 14699.1执行。 5.1.2 样品制备 样品根据GB/T 20195制备，置于烘箱内于65 ℃干燥至恒重，粉碎过40目样品筛。 5.1.3 检测方法 5.1.3.1 水分含量测定 按照GB/T 6435执行。 5.1.3.2 粗蛋白含量测定 按照GB/T 6432执行。 2 DB15/T 1172—2017 5.1.3.3 中性洗涤纤维含量测定 按照GB/T 20806执行。 5.1.3.4 酸性洗涤纤维含量测定 按照NY/T 1459执行。 5.1.3.5 体外消化率测定 5.1.3.5.1 试剂 缓冲液组成：9.8 g/L NaHCO3，9.3 g/L NaH2PO4，0.47 g/L NaCl，0.72 g/L KCl ，0.09 g/L MgCl2·H2O ， 0.05 g/L CaCl2 ； 酸性胃蛋白酶溶液：用 0.1 N HCl 溶解胃蛋白酶，最终浓度为 1:10000 活性单位，现用现配； CO2 气体（纯度为 99.5 %）； 氮气(（纯度为 99.5 %）； 5 % HgCl2 溶液； 5 % Na2CO3 溶液。 5.1.3.5.2 主要仪器和设备 分析天平（感量 0.0001）； 电热恒温水浴摇床（37 ℃-39 ℃）； 培养瓶（100 mL，最小分度 1 mL）； 孔径为 40 目的样品筛； 烘箱（室温-300 ℃）。 5.1.3.5.3 操作步骤 5.1.3.5.3.1 样本称量与设置 准确称取0.5000 g（精确到0.0001 g）粗饲料样本置于100 mL 玻璃培养瓶底部，放入39 ℃恒温水浴 摇床中预热，每个样本设3个平行样。同时每批样本设三个空白对照，即不加待测样本，仅有瘤胃液和 缓存液。 5.1.3.5.3.2 瘤胃液采集与混合培养液制备 晨饲前采集3头牛的瘤胃液，置于经预热达39 ℃并通有CO2的保温瓶中，盖严瓶口，迅速返回实验 室。用四层纱布过滤瘤胃液，合并滤液，39 ℃恒温，混匀，迅速加入装有经CO2饱和39 ℃的缓冲液（提 前配制）中，配制成混合培养液（瘤胃液与缓冲液按1:4的比例均匀混合），边搅拌边通入CO2 气体， 保存在39 ℃水浴中。 3 DB15/T 1172—2017 5.1.3.5.3.3 两级离体消化培养 向保存于39 ℃水浴中的每个培养瓶中加入50 mL混合培养液，即瘤胃液10 mL，缓冲液40 mL，并与 培养瓶内样品混合均匀，通入氮气，使瓶中保持厌氧，然后迅速盖上橡胶塞，密封，置于39 ℃恒温水 浴摇床中培养。每日轻轻摇动2次～3次，经48 h培养后，向每个培养瓶中加入5 % HgCl2 溶液1 mL，5 % Na2CO3溶液 2 mL以抑制微生物活动，促进沉淀。然后在1 ℃下4000 r/min离心15 min，用注射器吸弃 全部上清液，剩下残渣，每个培养瓶加入50 mL酸性胃蛋白酶溶液，使pH降至1.5，继续在39 ℃恒温水 浴摇床中厌氧培养，并且每日轻轻摇动2次～3次。48 h培养结束后再取出培养瓶，以3000 r/min离心10 min，用注射器吸弃上清液，加入蒸馏水30 mL洗涤残渣，再离心，用注射器吸弃上清液。将培养瓶中的 残渣全部移入已知重量的坩埚中，置于烘箱105 ℃烘干至恒重，称重，以测其粗蛋白含量。 5.1.4 参数估测 5.1.4.1 干物质随意采食量（VDMI） 按照 GB/T 23387 执行，具体如下： VDMI按式（1）计算： VDMI=1.2×BW/NDF………………………………………（1） 式中： VDMI——粗饲料干物质随意采食量，单位为 kg/d； BW —— 奶牛体重，计算中以600 kg计； NDF ——粗饲料中中性洗涤纤维含量，单位为 % DM。 5.1.4.2 泌乳净能（NEL） 按照 GB/T 23387 执行，具体如下： 不同种类的粗饲料应选择使用不同的参数估测公式，同属近似粗饲料可参照执行。 豆科牧草的 NEL 按式（2）计算： NEL=[1.044-(0.0119×ADF)]×9.29………………………………（2） 式中： NEL —— 粗饲料产乳净能值，单位为 MJ/kg； ADF —— 粗饲料中酸性洗涤纤维含量，单位为 % DM。以下式（3）和式（4）同。 禾本科牧草的 NEL 按式（3）计算： NEL = [1.085-（0.0124×ADF）]×9.29…………………………（3） 玉米青贮（全株）的 NEL 按式（4）计算： NEL = [1.044-（0.0124×ADF）]×9.29…………………………（4） 4 DB15/T 1172—2017 5.1.4.3 可消化粗蛋白（DCP） DCP按式（5）计算： DCP= CP  IVCPD 100 …………………………………………（5） 式中： DCP ——粗饲料中可消化粗蛋白含量，单位为 % DM； CP —— 粗饲料中粗蛋白含量，单位为 % DM； IVCPD ——粗饲料中粗蛋白消化率，单位为 % DM。 5.1.5 计算公式 5.1.5.1 粗饲料蛋白质消化率（IVCPD）计算公式 IVCPD 按式（6）计算： IVCPD  W1  P1  W2  P2  100 ……………………………………………（6） W1  P1 式中： IVCPD—— 粗饲料粗蛋白消化率，单位为 % DM； W1—— 粗饲料样品重,单位为 g； P1—— 粗饲料样品中粗蛋白含量，单位为 % DM；; W2——培养结束后所剩残渣重，单位为 g； P2—— 培养结束后所剩残渣中粗蛋白含量单位为 % DM。 5.1.5.2 粗饲料分级指数（GI2008）计算公式 GI2008 按式（7）计算： GI2008= NE L  DCP  VDMI …………………………………(7) NDF 式中： GI2008——粗饲料分级指数，单位为 MJ/d； NEL——粗饲料产乳净能值，单位为 MJ/kg； DCP——粗饲料中可消化粗蛋白含量，单位为 % DM； VDMI——粗饲料干物质随意采食量，单位为 kg/d； NDF——粗饲料中中性洗涤纤维含量，单位为 % DM。 5 DB15/T 117