ICS 65.020.30 B 44 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2554—2016 貉人工授精技术操作规程 Procedure of Artificial Insemination for Raccoon Dog 2016 - 12 - 09 发布 吉林省质量技术监督局 2017 - 03 - 01 实施 发 布 DB22/T 2554—2016 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所。 本标准主要起草人：徐超、赵家平、宋兴超、邢秀梅、吴琼、李巨民、王凯英、王晓旭、鲍坤、杨 颖。 I DB22/T 2554—2016 貉人工授精技术操作规程 1 范围 本标准规定了貉人工授精设施、采精、精液品质检查、精液处理、母貉发情鉴定、输精等人工授精 技术环节。 本标准适用于貉的人工授精。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 2.1 精子密度 sperm density 单位体积精液中所含的精子总数。 2.2 精子活力 sperm motility 精液中呈直线前进运动精子所占精子总数的百分比。 2.3 精子畸形率 malformed rate of sperm 单位体积精液中畸形精子占精子总数的百分比。 2.4 有效精子数 number of effective sperms 精液中能够直线前进运动的正常形态精子总数。 3 人工授精设施 3.1 采精输精室 2 2 位于饲养区上风向，面积4 m ～8 m ，室内分采精输精室、精液处理室两部分，室内配备相应功率 消毒设备和控温设备，应保温良好、清洁无尘。 3.2 人工授精设备 参见附录A。 4 4.1 采精 采精前的准备 4.1.1 室内温度 控制在18 ℃～25 ℃。 1 DB22/T 2554—2016 4.1.2 器械准备 对所有器具消毒，采精杯、玻棒、载玻片、所需的稀释液等用前预热至37 ℃。 4.1.3 种公貉准备 清洗公貉的阴部（阴茎、阴囊）并用清洁纱布擦干。 4.1.4 采精员准备 采精员洗净双手后穿工作服戴一次性手套。 4.2 按摩法采精 辅助人员保定公貉呈站立姿势。采精员按摩其阴茎至勃起时后快速按摩数次，待射出乳白色精液后 及时用集精杯收集精液。隔天采精1 次。 5 精液品质检查 5.1 感观检查 5.1.1 颜色 呈乳白色或浅灰色。 5.1.2 气味 略带特殊微腥味。 5.1.3 射精量 正常射精量为0.1 ml～1.5 ml。 5.2 显微镜检查 5.2.1 精子密度 用细胞计数板或精子密度仪测量，密度为2.0 亿/ml～13.0 亿/ml。 5.2.2 精子活力 载玻片预热至37 ℃后显微镜下鲜精的精子活力应高于0.6。 5.2.3 精子畸形率 鲜精中畸形精子应低于15%。要求每头公貉每两周检查一次精子畸形率。 5.3 记录 填写公貉精液品质检查记录表。 6 精液处理 6.1 2 精液稀释 DB22/T 2554—2016 6.1.1 稀释倍数确定 根据精子活力和密度确定稀释倍数，确保每头份稀释精液中至少含有0.7亿有效精子数。 6.1.2 等温稀释 稀释液37 ℃预热。精液采集后在20 分钟稀释完毕，稀释后精子活力不低于0.6。 6.2 精液的保存 6.2.1 精液稀释完应即时输精，体外保存时间不超过 2 h。 6.2.2 如需长期保存请选择长效保存稀释液，将精液温度从 33 ℃～35 ℃缓慢降到稀释液推荐温度后 恒温保存，每隔 3 小时缓慢摇匀一次。 6.3 记录 填写精液稀释记录表。 7 母貉发情鉴定 7.1 外阴观察法 发情时母貉阴门肿胀程度有所变化，肿胀面光亮消失而出现皱纹，触摸时柔软不硬，富有弹性，颜 色呈暗红色，阴部外翻且有黄色分泌物呈凝固状，为适宜输精期。 7.2 放对试情法 将母貉放于试情公貉笼内，母貉性情温顺，后肢叉开站立，尾巴翘起歪向一侧，静候公貉爬跨交配。 7.3 阴道细胞学检查法 用棉签或吸管吸取阴道分泌物制成涂片，在400 倍显微镜下观察，角化细胞占满视野，圆型细胞缺 少为适宜输精期。 7.4 记录 填写母貉发情鉴定记录表。 8 输精 8.1 清洗母貉的阴部并用清洁纱布擦干。利用貉输精针过宫颈口输精，缓慢将 0.5 ml～1 ml 精液注入 子宫内，肌注抗生素。 8.2 每日 1 次，连续输精 3 次。 8.3 记录 填写母貉输精记录表。 A 3 DB22/T 2554—2016 附 录 A （资料性附录） 人工授精设备 人工授精设备见表A.1。 表A.1 4 人工授精设备 名称 单位 数量 用途 保定架 台 1 采精输精保定用 显微镜 台 1 观察精液品质和阴道分泌物涂片 输精针 只 适量 输送精液 扩张器 只 适量 扩张阴道 集精杯 只 适量 收集精子 精子密度仪/细胞计数板 台/块 1 检测精子密度 适量 室内空气消毒 3 紫外灯 ≥2 W/m 空调 台 1 室内温度调节 水浴锅 台 1 精液稀释温度调节 蒸馏水器 台 1 制备蒸馏水 干燥箱 台 1 输精设备消毒 超声波清洗器 台 1 输精设备清洗 冰箱 台 常用材料低温保存 DB22/T 2554—2016 BA 附 录 B （资料性附录） 档案记录 精液品质记录表见表B.1。 表B.1 精液品质记录表 采精员： 编号 品种 精液量 颜色 气味 密度 活力 畸形率 备注 精液稀释记录表见表B.2。 表B.2 精液稀释记录表 实验员： 编号 品种 精液量 原精活力 精子密度 稀释体积 稀释后活力 精液编号 发情鉴定记录表见表B.3。 表B.3 编号 品种 日期 状态 检验员 发情鉴定记录表 日期 状态 检验员 日期 状态 检验员 日期 输精员 预产期 输精记录表见表B.4。 表B.4 编号 公貉号 日期 输精员 公貉号 输精记录表 日期 输精员 公貉号 C _________________________________ 5