ICS 65.020.01 B 20 DB41 河 南 省 地 方 标 准 DB41/T 1368—2017 玉米杂交种抗旱性鉴定评价技术规程 2017 - 02 - 10 发布 河南省质量技术监督局 2017 - 05 - 10 实施 发 布 DB41/T 1368—2017 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的标准起草。 本标准由河南省农业科学院提出。 本标准起草单位：河南省农业科学院粮食作物研究所、河南农业大学、河南省种子管理站。 本标准主要起草人：唐保军、赵霞、刘天学、李会勇、邓士政、李晶晶、夏来坤。 本标准参加起草人：丁勇、邵瑞鑫、张凤启、穆心愿、王利锋、张君、马智艳、赵发欣、齐红志、 曹言勇、马娟、李丽华、王浩。 I DB41/T 1368—2017 玉米杂交种抗旱性鉴定评价技术规程 1 范围 本标准规定了玉米杂交种抗旱性鉴定技术、方法及评价标准。 本标准适用于玉米杂交种的抗旱性鉴定与评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.1 农作物种子检验规程 总则 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB 4404.1 粮食作物种子 第 1 部分：禾谷类 NY/T 496 肥料合理使用准则通则 NY/T 1209 农作物品种试验技术规程 玉米 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗旱性 玉米在干旱胁迫下，其生长发育和产量形成对干旱胁迫的反应能力。 3.2 抗旱玉米品种 干旱胁迫下，抗旱指数大于或等于2级的玉米品种。 3.3 对照品种 当前河南省玉米品种区域试验指定的对照品种。 3.4 校正品种 苗期鉴定时，用于校正非同批待测材料鉴定结果的对照品种。 3.5 校正值 苗期鉴定时，经过校正品种校正后的性状值。 3.6 发芽 在实验室内幼苗出现和生长达到一定阶段，幼苗的主要构造表明在田间的适宜条件下能否进一步生 长成为正常的植株。本标准指胚芽长达到种子长度的一半，种子根长度约与种子相等。 1 DB41/T 1368—2017 3.7 发芽率 在规定的条件和时间内成长的正常幼苗占供检种子的百分率。本标准指培养后特定时间测定发芽种 子数占种子总数的百分率。 3.8 反复干旱存活率 玉米幼苗两次干旱复水后存活株数占总株数的百分率。 3.9 旱棚 具备遮雨条件的干旱试验棚 3.10 田间持水量 指在地下水较深和排水良好的土地上充分灌水或降水后，允许水分充分下渗，并防止其水分蒸发， 经过一定时间，土壤剖面所能维持的较稳定的土壤水含量（土水势或土壤水吸力达到一定数值） ，是大 多数植物可利用的土壤水上限。 3.11 抗旱系数 待测品种干旱胁迫处理产量与非干旱胁迫处理产量的比值。 3.12 抗旱指数 以生物产量或者籽粒产量为依据，以非干旱胁迫为比较标准，评价待测品种抗旱性的指标。 4 玉米抗旱性鉴定基本要求 4.1 抗旱性鉴定时期划分 抗旱性鉴定分别在种子发芽期、苗期、拔节期、开花期和灌浆期进行，可以根据鉴定的目的选用任 何一个时期的鉴定结果评价待测材料的抗旱性。品种抗旱性评价以全生育期鉴定和综合抗旱鉴定为主。 4.2 抗旱性分级 抗旱性分五级，从强到弱依次为： 1 级，极强 2 级，强 3 级，中等 4 级，弱 5 级，极弱 4.3 种子要求 种子质量应符合GB 4404.1 要求，数量满足试验需要，禁止药剂处理。 5 玉米种子发芽期抗旱性 5.1 种子发芽期抗旱性鉴定 2 DB41/T 1368—2017 种子发芽期抗旱性鉴定用渗透胁迫法。即用-0.5 MPa 的聚乙二醇－6000(以下简称 PEG－6000)水溶 液对种子进行水分胁迫处理，以无离子水培养作为对照。 5.2 样品准备 试验种子 200 粒，30 ℃～35 ℃烘干 10 h 至恒重，冷却至室温待测。 培养前种子用 7%漂白粉溶液消毒 2 min～3 min（或 0.1%HgCl2 消毒 8 min，再用灭菌蒸馏水冲洗 3 遍，用滤纸吸干附着水。 5.3 胁迫溶液配制 将200 g PEG－6000溶解在1000 ml去离子水中，即-0.5 MPa PEG－6000水溶液。 5.4 胁迫培养 用直径为12 cm的灭菌培养皿，放50粒种子为1次重复，加入25 ml的-0.5 MPa PEG－6000水溶液， 加盖，防止水分蒸发。每个处理重复3次，分别标记为T1、T2和T3。种子放置于28 ℃恒温条件下培养。 5.5 对照培养 用直径为 12 cm 的灭菌培养皿，放 50 粒种子为 1 次重复，加入 25 ml 的无离子水，加盖，防止水 分蒸发。每个处理重复 3 次，分别标记为 T1、T2 和 T3。种子放置于 28 ℃恒温条件下培养。 其他管理应符合 GB/T 3543.1 和 GB/T 3543.4 要求。 5.6 性状调查 2 2 将培养皿放入培养箱中，温度 28 ℃± 1 ℃，光照强度为 750 μmol/（m ·s）～1250 μmol/（m ·s）， 在第 2 d、4 d、6 d 和 8 d 调查发芽种子数。 5.7 种子发芽期抗旱指数 种子发芽抗旱指数的计算分别见公式(1)、(2)、(3)、(4)和(5)： nd = X Ger × 100 ..............................（1） X TS PI = 1.00×nd2 + 0.75×nd4 + 0.50 ×nd6 + 0.25 ×nd8 ..............（2） PIC = 1.00×nd2CK + 0.75×nd4CK + 0.50×nd6CK + 0.25×nd8CK ............（3） PIS = 1.00×nd2S + 0.75×nd4S + 0.50×nd6S + 0.25×nd8S ..............（4） GDRI = PIS ................................（5） PIC 式中： nd --- 种子发芽率，nd2，nd4,nd6 和 nd8 分别为第 2、4、6 和 8 天时的种子发芽率； XGer --- 在特定时间的发芽种子数； XTS --- 种子总数； PI --- 种子发芽指数，PIS 和 PIC 分别为胁迫和对照条件下种子发芽指数； GDRI --- 种子发芽抗旱指数。 5.8 种子发芽期的抗旱性评价 种子发芽期评价标准应符合表 1 的规定。 3 DB41/T 1368—2017 表1 种子发芽期的抗旱性评价标准 级别 种子发芽期抗旱指数 1 ≥0.85 2 0.70～0.84 3 0.55～0.69 4 0.40～0.54 5 ≤0.39 6 玉米苗期抗旱性 苗期抗旱性鉴定在干旱棚内进行，采用反复干旱法。 6.1 试验设计及培养条件 四次重复，每个重复50株(幼苗基数)。在日平均气温为25 ℃± 5 ℃的条件下进行反复干旱试验。 6.2 播种 在长×宽×高 = 60 cm×40 cm×15 cm的塑料箱中装入10 cm厚的中等肥力水平的耕层土壤土（中 壤土），灌水至田间持水量的80%±5%，播种、覆土2 cm。 6.3 第一次干旱胁迫/复水处理 幼苗长至三叶一心时停止供水，开始进行干旱胁迫。土壤含水量降至田间持水量的30%±5%时调查 存活苗数。当土壤含水量降至田间持水量的25%±5%时复水，使土壤水分达田间持水量的80%±5%；72 h 后调查存活苗数，以幼苗或叶片恢复为鲜绿色为存活。 6.4 第二次干旱胁迫/复水处理 第一次复水后即停止供水，进行第二次干旱胁迫，当土壤含水量降至田间持水量的30%±5%时调查 存活苗数，第二次复水。72 h后调查存活苗数，以幼苗或叶片恢复为鲜绿色为存活。 6.5 幼苗反复干旱存活率 幼苗反复干旱存活率按式（6）计算： DS = X + X DS2 DS1 + DS2 = DS1 × 100 .......................(6) 2 2 × XTT 式中： DS --- 幼苗反复干旱存活率的实测值； DS1 --- 第一次干旱存活率； DS2 --- 第二次干旱存活率； XTT --- 第一次干旱前四次重复总苗数的平均值； X DS1 --- 第一次复水后四次重复存活苗数的平均值； X DS2 --- 第二次复水后四次重复存活苗数的平均值。 6.6 幼苗干旱处理后存活率校正值 按照公式（7）计算校正品种幼苗干旱处理后存活率实测值的偏差。依公式（8）求出待测品种幼 4 DB41/T 1368—2017 苗干旱处理后存活率的校正值。即： ADS - ADSA ..................................(7) ADS DSA = DS－ADSA ×ADSE ...................................(8) ADSE = 式中： ADSE —— 校正品种干旱处理后存活率实测值的偏差，即校正品种本次实测值与校正值偏差的百分 率（％） ； ADS —— 校正品种干旱处理后存活率的实测值（%） ； ADSA —— 校正品种干旱处理后存活率的校正值，即多次幼苗干旱存活率试验结果的平均值（%）； DSA —— 待测品种干旱处理后存活率的校正值（%） ； DS —— 待测品种干旱处理后存活率的实测值（%） 。 6.7 苗期抗旱性评价 苗期抗旱性评价标准应符合表2。 表2 玉米苗期抗旱性评价标准 级别 反复干旱存活率(%) 1 ≥80 2 66.0～79.9 3 50.0～65.9 4 40～49.9 5 ≤39.9 7 玉米拔节期、开花期、灌浆期抗旱性 玉米拔节期、开花期、灌浆期抗旱性鉴定在模拟干旱棚下进行。播种前使 0 cm～50 cm 土层水分达 到田间持水量的 80%±5%。根据试验要求适期播种，规范管理。同一项作业在同一天内完成。 7.1 试验设计 2 2 试验采用随机区组法，三次重复，小区面积 2.2 m ～3.3 m 。种植密度按照品种特性设置。设置同 熟期品种作对照；肥料作为底肥一次性施入（肥料应符合 NY/T 496）。播种前土壤墒情应保证出苗要求。 保持土壤含水量为 80%±5%田间持水量。 7.2 干旱胁迫处理 拔节期干旱胁迫：拔节期（播种后 6 片展开叶、叶龄指数 30 时）停止灌水，然后将土壤含水量维 持在田间持水量的 50%±5%，到 12 展叶为止。之后正常灌水。 开花期干旱胁迫：12 片展开叶时停止灌水，使玉米散粉开始至结束时保持土