ICS 65.020.01 B 10 备案号：59984-2018 内 蒙 DB15 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1475—2018 加速溶剂萃取-液相色谱串联质谱法 测定土壤中 13 种除草剂残留量 Detection of 13 herbicide residues in soil by ASE-LC-MS-MS 2018-08-15 发布 内蒙古自治区质量技术监督局 2018-11-15 实施 发 布 DB15/T 1475—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本标准由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。 本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、赤峰市农畜产品质量安全监督站。 本标准起草人：张欣昕、张福金、姚一萍、李国银、张三粉、王文曦、连海飞、刘广华、刘建平、 邵海。 I DB15/T 1475—2018 加速溶剂萃取-液相色谱串联质谱法 测定土壤中 13 种除草剂残留量 1 范围 本标准规定了土壤中砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁 草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于土壤中砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁 草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 52 土壤水分测定法 NY/T 1121.1 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3 原理 用2 %的甲酸乙腈溶液，通过快速溶剂萃取土壤样品中的砜嘧磺隆等13种除草剂，经液相色谱-串联 质谱仪进行测定，外标法定量。 4 试剂和材料 4.1 除另有规定外,所有试剂均为分析纯,实验用水应符合 GB/T 6682 一级水的标准。 4.2 乙腈：色谱纯。 4.3 甲酸：色谱纯。 4.4 2 % 甲酸乙腈溶液（体积分数）：取 2.0 mL 甲酸加乙腈稀释至 100 mL。 4.5 0.1% 甲酸溶液（体积分数）：0.1 mL 甲酸加水稀释至 100 mL。 4.6 0.1 % 甲酸水-乙腈溶液（90+10，体积比）。 4.7 标准品 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二 甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准品：纯度均大于 98%。 4.8 标准溶液 1 DB15/T 1475—2018 4.8.1 标准储备液 准确称取适量的砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、 异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准品，用甲醇分别配制成100 µg/mL的标准储备液， 保存于-18 ℃冰箱内，可使用6个月。 4.8.2 混合标准储备液 分别准确吸取1.00 mL 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、 丁草胺、异丙草胺、二甲戊乐灵、异丙甲草胺、烟嘧磺隆标准储备液至10 mL容量瓶内，用甲醇稀释至 刻度，配制成10 mg/L的混合标准储备液，于-18 ℃冰箱内避光保存，可使用3个月。 4.8.3 基质混合标准工作液 根据需要，用阴性样品基质系列稀释混合标准工作液，使用前临时配制。 3 3 4.9 硅藻土：二氧化硅含量大于 90% ，密度 2.0 g/cm ~ 2.3 g/cm 。 4.10 微孔过滤膜（尼龙）：13 mm ×0.2 µm。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 加速溶剂萃取仪：配有 34 mL 萃取池。 5.3 分析天平：感量 0.01 mg 和 0.01 g。 5.4 旋转蒸发仪。 5.5 涡旋混合器。 6 试样制备 按照NY/T 1121.1 中有关规定采集土壤,去杂质后充分混匀,保存在-18 ℃冷冻冰箱中。按照NY/T 52 标准要求，取新鲜土壤，105±2 ℃烘干冷却称重，测定土壤的水分含量（a）,再计算土壤换算至烘干 的水分换算系数F（F=1-a）。 7 测定步骤 7.1 提取 称取10 g新鲜土壤试样(精确到0.01 g)与10 g硅藻土（4.8）充分混匀后，移入加速溶剂萃取仪的34 mL 萃取池中，设定加速溶剂萃取仪萃取条件：萃取溶剂为2 %甲酸乙腈溶液（4.3），80 ℃加热，静态萃 取时间5分钟，循环次数2次，冲洗体积为60 %，氮气吹扫100 s。提取结束后，提取液转移至250 mL梨 形瓶中，在40 ℃水浴中，旋转浓缩至近干，用5.00 mL 0.1 % 甲酸水-乙腈溶液（4.4）定容，过0.2 µm 微孔过滤膜后，待测。 7.2 阴性样品提取液的制备 2 DB15/T 1475—2018 取不含待测物的阴性马铃薯和土壤样品，按7.1步骤制备阴性样品提取液，用于配制基质混合标准 工作液。 7.3 测定 7.3.1 液相色谱-串联质谱法测定条件 具体如下： a) 色谱柱：C18，100 mm × 2.1 mm（内径），粒径 1.7 μm； b) 流动相：0.1 %甲酸溶液（4.5），B：乙腈（4.1），梯度洗脱见表 1； 表 1 梯度洗脱表 c) d) e) f) g) h) i) j) k) l) m) 时间 / min 流速/（mL/min） A / % B / % 0.00 0.35 95 5 1.00 0.35 70 30 3.00 0.35 20 80 4.00 0.35 5 95 6.60 0.35 95 5 10 0.35 95 5 柱温：40 ℃； 进样量：1 μL； 离子源：电喷雾电离（ESI）； 扫描方式：正离子扫描模式； 检测方式：多反应监测（MRM） ； 电离电压：2500 V； 离子源温度：120 ℃； 雾化温度：450 ℃； 锥孔气流速：50 L/h； 雾化气流速：650 L/h； 待测物保留时间、定性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量见表 2。 表2 待测物名称 烟嘧磺隆 氯磺隆 砜嘧磺隆 苯磺隆 13种除草剂保留时间、定性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量 保留时间 定性离子对 定量离子对 锥孔电压 碰撞电压 min m/z m/z V V 411.21>182.04 20 358.04>140.91 12 431.99>181.97 25 413.12>147.92 24 2.36 2.75 2.71 3.62 411.21>182.04411 .21>213.21 358.04>140.91358 .04>166.85 431.99>181.97431 .99>325.20 413.12>147.92413 15 10 18 16 25 25 32 3 DB15/T 1475—2018 .12>371.97 12 表2 （续） 待测物名称 扑草净 莠去津 嗪草酮 甲草胺 乙草胺 丁草胺 异丙草胺 二甲戊乐灵 异丙甲草胺 保留时间 定性离子对 定量离子对 锥孔电压 碰撞电压 min m/z m/z V V 242.14>157.89 52 216.16>174.09 40 214.98>187.03 10 286.27>253.97 12 270.07>147.93 12 312.12>162.04 25 284.15>223.97 25 282.11>211.91 16 284.01>252.00 16 242.14>157.89 2.91 242.14>115.76 216.16>174.09 2.91 216.16>104.20 214.98>187.03 2.65 214.98>130.99 286.27>253.97286 3.61 .27>176.02 270.07>147.93270 3.61 .07>237.96 312.12>162.04312 4.29 .12>238.15 284.15>223.97 3.82 284.15>148.00 282.11>211.91 4.32 282.11>117.90 284.01>252.00284 3.61 .01>175.95 22 28 20 20 15 20 18 22 18 10 20 20 10 15 14 18 12 24 7.3.2 定性测定 在相同实验条件下进行样品测定时，如果样品中待测物质的色谱峰保留时间与标准品色谱峰保留时 间相差在± 2.5%以内，且样品色谱图中定性离子的相对离子丰度与浓度相近的基质标准工作液色谱图 中对应的定性离子相对丰度进行比较，相对偏差不超过表3 规定的范围，则可判定样品中存在该种待测 物。 表 3 定性确证时相对离子丰度的最大允许误差（%） 相对离子丰度 K> 50 20＜K＜50 10＜K＜20 K≤10 允许最大偏差 ±20 ±25 ±30 ±50 7.3.3 定量测定 在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作液（4.8.3）进行色谱分析，以峰面积为纵坐标，基 质混合标准工作液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，基质混合标准工 作液和试样中响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱和质谱条件下，基质混合标准工作液中 的各特征离子多反应监测（MRM）色谱图参见附录A中的图A.1。 7.4 平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。 4 DB15/T 1475—2018 7.5 空白试验 除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。 8 结果计算 试样中待测组分的测定结果可由仪器工作软件计算，也可按式（1）计算： X  c  V  1000  F m 1000 …………………………（1） 式中： X ――― 试样中待测组分残留量，µg/kg； c ――― 从标准曲线得到的试样中待测组分的浓度，µg /L； V ――― 试样溶液定容体积，mL； m ――― 试样的质量，g ； F ―――土壤水分换算系数； 计算结果应扣除空白值，保留两位有效数字。 9 检出限、回收率和精密度 9.1 检出限 砜嘧磺隆、氯磺隆、扑草净、莠去津、嗪草酮、苯磺隆、甲草胺、乙草胺、丁草胺、异丙草胺、二 甲戊乐灵、异丙