(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210551667.5 (22)申请日 2022.05.18 (71)申请人 青岛大学 地址 266071 山东省青岛市宁 夏路308号 (72)发明人 杨艳艳　于涛　李敏　 (74)专利代理 机构 北京众达德权知识产权代理 有限公司 1 1570 专利代理师 刘杰 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/53(2006.01) A61K 31/7105(2006.01) A61P 9/00(2006.01) A61P 29/00(2006.01) (54)发明名称 miR-564或miR-564表达 载体在制备诊断/治 疗主动脉夹层产品中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种miR ‑564或miR ‑564表达 载体在制备诊断/治疗主动脉夹层产品中的应 用； 本发明中miR ‑564在动脉夹层患者和健康样 本中表达差异显著， 进而通过检测所述miR ‑564 的表达量， 能够准确、 快捷、 简单的实现主动脉夹 层的辅助诊断。 权利要求书1页 说明书10页 序列表1页 附图9页 CN 114807357 A 2022.07.29 CN 114807357 A 1.miR‑564或miR‑564表达载体在制备诊断/治疗主动脉夹层产品中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述产品包括试剂盒、 药物、 生物制剂。 3.一种用于诊断主动脉夹层的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括识别权利要求1所 述miR‑564的标记 物。 4.根据权利要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述标记物为所述miR ‑564互补的cDNA 的结合引物或结合所述miR ‑564的生物大分子； 所述生物大分子包括 抗体、 抗体功能片段、 RAN结合蛋白和RAN结合蛋白功能片段。 5.根据权利要求4所述的试剂盒， 其特征在于， 所述miR ‑564互补的cDNA的结合引物的 核苷酸序列如SEQ  ID NO:1所示。 6.一种用于治疗主动脉夹层的药物， 其特征在于， 所述药物包括权利要求1所述的miR ‑ 564或miR‑564表达载体。 7.miR‑564或miR‑564表达载体在制备抑制VSM Cs迁移、 增殖或表型转换产品中的应用。 8.一种抑制VSMCs迁移、 增殖或表型转换产品， 其特征在于， 包括权利 要求7所述的miR ‑ 564或miR‑564表达载体。 9.miR‑564或miR‑564表达载体在制备抑制炎症的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114807357 A 2miR‑564或miR ‑564表达载体在制备诊断/治疗主动脉夹层产 品中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 具体涉及一种miR ‑564或miR ‑564表达载体在制备诊 断/治疗主动脉夹层产品中的应用。 背景技术 [0002]心血管疾病具有很高 的死亡率和发病率， 是世界范围内威胁人类健康和生命的主 要疾病之一。 主动脉夹层(AD)是最复杂的心血管疾病之一， 当主动脉内膜撕裂后血液进入 中膜导致 发病。 在AD的发展中， 最凶险后果是主动脉完全破裂导致的快速死亡， 这减少了对 包括心脏在内的其他器官的血液供应。 在临床上， AD患者的治疗主要 是手术治疗， 目的是闭 合内膜撕裂， 重建假腔造成的血管闭塞区的血流。 然而， 外科治疗造成的创伤及并发症， 不 仅会导致继发性损伤， 而且不能逆转AD的发生和发展。 因此， 对AD进行早期发现和早期干 预， 防止术后复发， 对降低其造成的死亡率具有重要意义。 然而， 目前为止， 可用于AD快速诊 断和治疗的重要分子靶点尚未确定 。 因此， 迫切需要确定AD  预防和治疗的新目标。 [0003]人主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)是血管壁 的主要成分之一， 在多种心血管疾病 的发病机制中起着至关重要的作用。 VSMCs 的重构是与主动脉扩张相关 的早期过程。 此外， 血管平滑肌细胞功能障碍被认为是导致血管重塑中层变性的最重要因素之一。 特别是， 在 AD进展过程中， VSMCs经历了从收缩(分化)  表型到合成(去分化)表型的转换， 表现为增殖 和迁移能力增强， 分化标志表达减少。 此外， AD进展的另一个典型标志是炎症的发生和发 展， 如巨噬细胞和单核细胞的浸润， 或炎症因子表达水平的增加。 因此， 也有研究报道， 包括 位于主动脉壁内的炎症和内皮细胞设计的炎症， 在AD中起着 重要的作用。 在此， 我们旨在了 解血管重构的机制， 以寻找新的AD靶点。 [0004]MicroRNAs(miRNAs)是一类与下游mRNAs的3 ’非翻译区(3 ’UTR)结合并导致其降解 的非编码小RNA。 新的证据表 明， 在血管组织中丰富的miRNAs  在包括AD在内的心血管疾病 的发生和发展中起着至关重要的调节作用。 许多研 究表明， AD的miRNA表达异常， Wang等人 发现在急性AD组织中  miR‑107‑5p的表达维持在较高水平。 进一步的实验证明miR ‑107‑5p 与大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMCs)24的增殖和凋亡有关。 Duan等人报道称， miR ‑133a 上调 有可能挽救急性主动脉夹层(AD)。 Wang等人证实miR ‑134‑5P可以募集  STAT5B/ITGB1来调 节AD 26。 此外， miRNA似 乎还通过调节炎症的发展来调节AD的触发和进展。 Wang等人通过基 因芯片分析和生物信息学研究， 证实了大量mi RNA在健康和AD患者中的差异表达， 其中一些 与炎症有关。 总之，  miRNAs具有在AD诊断和治疗中有希望成为靶点的特性。 [0005]目前， 已经证明miR ‑564通过介导癌细胞的增殖、 侵袭和死亡在各种癌 症中发挥重 要作用。 然 而， miR‑564对VSMCs的调控作用尚不清楚。 发明内容 [0006]本发明的目的在 于提供一种miR ‑564或miR ‑564表达载体在制备诊断/治疗主动脉说　明　书 1/10 页 3 CN 114807357 A 3